耐力训练大鼠心肌基因谱改变及壳寡糖预处理效应

研究大强度耐力训练大鼠心肌组织基因表达谱的改变,筛选与心肌损伤过程相关的差异表达基因;观察壳寡糖预处理效应,探讨壳寡糖作为抗疲劳强力因子保护心肌结构和功能的分子机制.分别从对照组、壳寡糖处理组、耐力训练组SD大鼠的心肌组织中抽提总RNA.Cy3、Cy5荧光标记,反转录分别合成cDNA探针后,与含有12 000个基因的SBC大鼠高密度12K基因表达谱芯片杂交.杂交信号经扫描后,Genespring软件分析表达信号.差异表达基因共616个,大强度耐力训练组差异表达基因157个,其中上调141个,下调17个;壳寡糖处理组差异表达基因459个,其中上调183个,下调276个,涉及细胞凋亡差异表达基因有36个,下调24个,上调12个.结论：耐力运动所引起的心肌结构和功能的积极适应甚或心肌损害都是由众多基因共同调控的复杂过程.壳寡糖能调控大强度耐力训练大鼠心肌组织多种功能类别基因群表达水平,从分子水平揭示了壳寡糖保护大强度耐力训练对大鼠心肌造成不良影响的作用机制.     

喘安对哮喘大鼠肺组织原癌基因c-fos 表达的影响

通过动物实验研究,探讨喘安对哮喘大鼠肺组织c-fos 表达的影响.方法建立大鼠哮喘模型,设立正常组、哮喘模型组、喘安治疗组,必可酮组,桂龙咳喘宁组,喘必组,治疗36天后,分别测定各组肺组织c-fos 阳性细胞表达的数量.结果大鼠肺组织c-fos 阳性细胞表达的数量在各组的数量对比关系呈模型组＞桂龙组＞喘安组＞必可酮组＞喘安加必可酮组＞正常组(各项指标P<0.01或P<0.05).结论喘安治疗哮喘大鼠有效,可能是通过降低肺组织中c-fos 阳性细胞表达的数量起效的.     

全反式维甲酸对大鼠肾间质纤维化的干扰

目的探讨全反式维甲酸(at-RA)对单侧输尿管梗阻大鼠(UUO)肾间质纤维化的干扰。方法将30只大鼠随机分为假手术组、模型组、给药组,结扎单侧输尿管造成梗阻性肾病模型。术后9天处死大鼠,取梗阻侧肾做组织学检查,HE染色,用免疫组化方法检测肾组织中结缔组织生长因子(CTGF),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)。结果维甲酸显著减轻肾小管间质损害,治疗组肾间质炎细胞浸润和肾间质CTGF、α-SMA表达显著低于对照组。结论维甲酸减轻UUO模型大鼠肾小管间质损害和炎细胞浸润,降低CTGF表达,抑制α-SMA表达,从而减轻肾间质纤维化。     

17β-雌二醇对去势胰岛素抵抗大鼠骨代谢及OPG/RANKL表达的影响

目的 探讨17β-雌二醇对去势胰岛素抵抗大鼠骨代谢生化指标及OPG/RANKL表达的影响.方法 36只雌性大鼠卵巢切除后用高果精饲料喂养12周,诱导胰岛素抵抗产生,大鼠随机分为模型组、雌激素替代组和溶媒对照组,另设正常对照组大鼠12只,用普通饲料喂养12周.检测各组大鼠动脉收缩压(SBP)、血清雌二醇(E2)、空腹血糖(FBS)和空腹血清胰岛素(FSI)水平,并计算胰岛素敏感指数(ISI).测定尿钙、尿脱氧吡啶啉(Dpd)、血清骨钙素(BGP)水平.采用实时定量PCR和Western Blot检测股骨组织中护骨素/细胞核因子KB受体活化因子配体(OPG/RANKL)的表达.结果 与对照组相比,模型组大鼠SBP、FBS、FSI、尿钙和尿Dpd水平均显著性升高(均P<0.05),ISI、血清雌二醇和血清BGP水平显著性降低(均P<0.05),股骨中OPG mRNA和蛋白的表达显著性降低(均P<0.05),而RANKL mRNA和蛋白的表达显著性升高(均P<0.05);与模型组相比,17β-雌二醇替代逆转了上述改变(均P<0.05).结论 17β-雌二醇抑制去势胰岛素抵抗大鼠股骨中骨吸收和促进骨形成,其作用机制可能与17β-雌二醇能上调骨组织中OPG的表达而降低骨组织中RANKL的表达有关.     

TNF-α-NF-кB对成骨细胞分化过程中BMP-2-Smadl信号通路的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)-NF-кB信号通路通过骨形态发生蛋白-2(BMP-2)-Smadl信号通路对成骨细胞分化影响的分子机制.方法 应用BMP-2体外诱导鼠肌源细胞 C2C12 向成骨细胞分化模型,瞬时转染表达其下游效应物,通过实时RT-PCR 以及蛋白电泳和免疫印迹技术(Western-blot),检测其下游效应物Smadl与核转录因子(NF-кB)及其抑制剂(IкBα),研究 TNF-α和NF-кB对BMP-2-Smadl信号通路的影响.结果 TNF-α能够将Smadl(BMP-2的下游效应物)的活性从对照组的2.04倍降低至0.63倍.NF-кB过表达则将Smadl活性从2.04倍降低至0.39倍.蛋白质印迹实验可见,TNF-α能明显降低BMP2活化的C2C12细胞中磷酸化Smadl的含量,而RT-PCR研究发现其并不能改变Smadl的mRNA丰度.结论 TNF-α抑制成骨细胞分化其分子机制是通过TNF-α激活NF-кB而降低BMP-2信号通路中磷酸化的Smadl,进而抑制BMP-2-Smadl通路活性而发挥作用.提示持续性的炎症反应能直接抑制成骨细胞的分化和骨形成.     

补肾益髓中药对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织Runx2的mRNA及蛋白表达的影响

目的 观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠模型骨组织Runt相关基因2(Runx2)mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制以及补肾益髓中药的疗效及其调控作用.方法 采用后肢肌注地塞米松(2.5 mg/kg,每周2次,连续9w)的方法复制GIOP大鼠模型,按体重分层随机分为正常组、模型空白组、补肾益髓中药组、补中益气颗粒组、血府逐瘀胶囊组、骨疏康颗粒阳性对照组.灌胃给药9w.应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,以评价动物模型的成立及药物疗效.实时定量RT-PCR(Real-Time Quantitative RT-PCR)检测骨组织Runx2 mRNA表达,Western blot检测骨组织Runx2蛋白表达.结果 (1)股骨骨密度:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾益髓中药组明显升高(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组明显升高(P<0.05),补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有升高趋势,但无统计学意义(P>0.05).(2)骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾益髓中药组明显上调(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组也有明显上调(P<0.05),补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有所升高,但无统计学意义(P>0.05).结论 (1)肌注地塞米松可以成功复制GIOP大鼠模型,(2)骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达水平降低可能是GIOP的发病机制之一,(3)应用补肾益髓中药具有明显防治效果,疗效优于健脾中药和活血中药,其作用机理与上调骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达密切相关.     

氨基胍和维生素C调节1型糖尿病大鼠胰腺细胞iNOS的表达

目的观察氨基胍、维生素C对糖尿病大鼠胰腺的胰腺细胞iNOS蛋白表达有何影响。方法利用链脲佐菌素腹腔注射法诱导建立1型糖尿病大鼠模型,SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、维生素C治疗组、氨基胍治疗组,治疗16周后取胰腺组织作免疫组织化学检测胰腺细胞iNOS蛋白表达情况。结果①糖尿病组胰腺细胞iNOS阳性产物呈弥漫分布,其色明显深于正常对照组和氨基胍、维生素C组。②氨基胍、维生素C组iNOS蛋白表达与正常对照组相似为弱表达。结论1型糖尿病大鼠胰腺细胞iNOS蛋白表达升高,氨基胍（AG）、维生素C（VC）对糖尿病组大鼠胰腺细胞iNOS的表达存在抑制作用。     

牛膝提取物对去卵巢大鼠骨密度、骨转换及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

目的 观察牛膝醇提取物对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度(BMD)、骨转换和骨组织Ⅰ型胶原蛋白表达的影响.方法 背侧切口切除大鼠双侧卵巢,分为去卵巢组,牛膝提取物高、中、低剂量组和雌激素对照组,另设一假手术组,分别给予基础饲料和不同剂量治疗药物,12w后使用双能X线骨密度仪测量股骨、胫骨和腰椎的骨密度;采用酶联免疫吸附法对骨转换指标血清骨碱性磷酸酶(BAP)、血清骨钙素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)、尿Ⅰ型胶原氨基末端肽(NTx)/肌酐比值(NTx/Cr)进行测定,并利用Western免疫印迹法检测骨组织Ⅰ型胶原蛋白表达的变化.结果 大鼠去势后骨密度和Ⅰ型胶原蛋白的表达显著下降(P<0.01),骨转换指标有较大变化.牛膝醇提取物高、中剂量组可使去势大鼠骨密度和Ⅰ型胶原蛋白的表达显著提高,改善骨转换指标的变化,且存在一定的剂量-效应关系.结论 牛膝醇提取物能提高去势大鼠的骨密度和Ⅰ型胶原蛋白的表达.     

外源性生物活性肽研究进展

长期以来，人们普遍认为食物或饲料中的蛋白质主要起营养作用，而且必须在消化道中分解成必需或非必需氨基酸，其营养价值才能体现出来。近二十年的研究表明，饲料或食物中的某些蛋白质隐含有一些特殊肽质。这些特殊肽在消化酶作用下释放出来。’”］，以肽的形式被吸收后，能参与摄食、消化、代谢及内分泌的调节。我们把这种非机体自身产生的却具有生物活性的肽类物质称为外源性生物活性肽（E。ge。usoriginBiofogic。IActi＼epeptides，eBAPX”。本文对eBAn的研究进展作一综述。互eBAP的主要来源饲料和食物是eBM的重要来源。研究表…     

尿素喂牛应注意的问题

牛瘤胃中的微生物,具有利用非蛋白质含氮化合物的能力。非蛋白氮,特别是尿素,已在养牛业中广泛使用。理论上,1公斤尿素相当于2.6公斤可消化蛋白质,可代替6—7公斤饼类饲料。由于瘤胃微生物利用尿素合成菌体蛋白,提高了限制性氨基酸的含量.使蛋白质的利用率可达90%以上。在日粮蛋白质不足的情况下,补充尿素     

植物病原细菌群体感应机制及其应用

群体感应是细菌群体行为的一种调控机制.自然界中的很多细菌都有这种能力,即分泌一种或多种信号分子,通过这些信号分子的密度来感知菌群密度,调控一系列相应靶基因的表达.目前,已在许多革兰氏阳性菌和阴性菌中发现了群体感应系统,调控基因的表达.该文综述了细菌群体感应系统的研究进展及其应用.     

复方中药卫康胶囊抗氧化作用的实验研究

背景卫康星牌卫康胶囊是以人参、鹿茸、菟丝子等名贵中药为主要成分提取的现代复方中药,具有增强免疫力的功能.以往的人体试验研究发现此产品的栓剂型具有明显的抗氧化作用.目的研究卫康星牌卫康胶囊在动物实验中的抗氧化作用及其机制.方法纯系BALB/c小鼠喂食混有卫康胶囊药粉或者维生素E的饲料.至28天时取小鼠血液和脑、肝、心肌和骨骼肌等组织,测定锰过氧化物歧化酶活性和还原型谷胱甘肽水平分析其线粒体抗氧化状态,通过测定ATP产生能力确定其线粒体功能.结果喂食含有卫康胶囊药粉或者维生素E饲料的BALB/c小鼠血液以及脑、肝、肌肉中线粒体抗氧化状态明显提升,线粒体功能得到加强.雄性与雌性动物之间未见明显区别.有些情况下卫康胶囊的作用强于维生素E.结论卫康星牌卫康胶囊可以提高小鼠不同组织中线粒体抗氧化状态,促进线粒体功能,具有明显的抗氧化功效.     

斑马鱼内皮脂肪酶(EL)、丝氨酸磷脂酶(PLA1A)和H型脂肪酶(LH)基因的组织分布与胚胎发育表达分析

以模式动物斑马鱼为研究对象,运用实时定量PCR技术和原位杂交技术,对脂肪酶基因家族中的内皮脂肪酶(EL)、丝氨酸磷脂酶(PLA1A)和H型脂肪酶(LH)基因的组织分布和胚胎发育表达进行了研究.三种基因在所检测的组织中都有表达,其中EL mRNA在精巢、卵巢和皮肤中表达较高,PLA1A mRNA在肠道、心脏、肝脏和皮肤中表达较高,LH mRNA在卵巢、皮肤和精巢中表达较高.在胚胎发育过程中,EL和LH基因均在胚胎发育的早期(卵裂期和囊胚期)有较高的表达,表现出明显的母源表达特征,而PLA1A基因在胚胎发育的原肠期前后表达较高,显示其在胚胎发育的原肠作用中可能承担角色.     

MF-多源治疗仪对高血脂大鼠血脂的影响

目的建立高血脂模型,探讨MF-多源治疗仪对高血脂大鼠各项血脂的影响。方法 wistar大鼠随机分为正常组和高血脂组。正常组用普通饲料饲养,高血脂组用高脂饲料喂养,喂养20天建立高血脂模型。模型建立后,重新分组,原正常组剩下的大鼠仍然是正常组(Ⅰ组),原高血脂组剩下的大鼠随机分成高血脂模型组(Ⅱ组)和MF-多源治疗仪照射组(Ⅲ组),其中Ⅲ组在MF-多源治疗仪照射15天后,对大鼠血脂水平、血液的生化指标和血流变学指标进行分析。结果表明:Ⅱ组与Ⅰ组比较,谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、全血粘度、全血还原粘度、红细胞聚集指数等指标均有明显差异(P<0.05);Ⅲ组与Ⅱ组比较,谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、全血粘度、全血还原粘度、红细胞聚集指数原等指标均有明显差异(P<0.05),而高密度脂蛋白胆固醇升高极显著(P<0.01)。这表明MF-多源治疗仪照射对高血脂症有良好的保健效果,对心血管疾病有预防作用。     

人缺血脑组织IL-17、TNF-α和IL-1β的研究

细胞因子(cytokine)是具有多种生物活性的可溶性小分子蛋白质,包括白细胞介素(interleukin,IL)、趋化因子(chemokine)、黏附分子(adhesion molecule)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)和干扰素(interferon,IFN)等.白细胞介素是一组由单个核细胞(包括单核-巨噬细胞和淋巴细胞)产生的细胞因子,作用于淋巴细胞、巨噬细胞和其他细胞.脑缺血发生时,一些细胞因子参与了脑缺血后炎症反应的启动、发展过程.本课题采用尸检的方法,取因脑梗死死亡患者脑组织以对侧正常脑组织为对照,通过免疫组化检测IL-17、TNF-α和IL-1β在人类缺血脑组织中表达状况.     

一种新的与渗调蛋白基因启动子结合的蛋白基因的分离

渗调蛋白基因可受多种外界环境因子的诱导表达,并与植物细胞的渗透调节、抗逆境及植物抗病性等重要的生理过程有着密切关系,通过寻找与渗调蛋白基因启动子中FA区域DNA结合的蛋白,克隆参与该基因表达调控的反式作用因子,有利于明确渗调蛋白基因在转录水平上的调控机制,揭示外界环境因子通过信号传导系统诱导渗调蛋白基因表达的过程。利用近年来发展起的酵母单杂交系统,从适盐的烟草悬浮细胞的cDNA文库中分离到1个可与渗调蛋基因启动子中FA片段结合的蛋白因子的基因OPBP1。核酸序列分析表明OPBP1包含有一个完整的阅读框架,可编码277个氨基酸,氨基酸序列的比较分析表明该蛋白与近年来发现的一类新的DNA结合蛋白如EREBP,AP,ANT等具有相同的保守区,其中一些氨基酸完全相同,OPBP1与EREBP3最接近,同属该类新的DNA结合蛋白的第1组,仅有1个保守区。     

电针治疗对大鼠脑缺血再灌注中AnnexinAl和TRPM7表达的影响

目的：电针治疗在脑缺血再灌注损伤中AnnexinA1与TRPM7共存为探讨TRPM7在脑缺血再灌注损伤中的途径提供理论依据。方法将SD大鼠随机分成正常对照组、缺血再灌组、电针治疗组、假手术组,以线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型,电针穴位选择“水沟”、“承浆”穴。用Morris水迷宫试验验证学习记忆能力和免疫荧光双标方法检测AnnexinA1和TRPM7在大鼠脑组织中的共存表达。结果①大鼠大脑中动脉栓塞60分钟再灌注24小时后,可出现明显学习记忆能力障碍,缺血再灌组与电针治疗组有显著性差异（P＜0.05）,在脑缺血前后以电针治疗后可显著改善大鼠学习记忆能力。②在海马CA1、CA3、皮质区,脑缺血再灌组与正常对照组相比, AnnexinA1和TRPM7共存表达升高率分别是48.06％,50.19％,30.07％（ P＜0.05）。电针治疗组与脑缺血再灌组相比,AnnexinA1和TRPM7共存表达水平下降率分别是34.88％,47.80％,41.96％（ P＜0.05）。结论脑缺血再灌注后大鼠学习记忆能力下降,且AnnexinA1和TRPM7共存表达上调,电针治疗后能够显著改善大鼠的学习记忆能力,并通过逆转AnnexinA1和TRPM7表达,且可能通过TRPM7途径来调整AnnexinA1的作用。电针有可能通过抑制TRPM7和AnnexinA1来改变神经元的凋亡命运。     

防癌新招——常吃鸡蛋

据台湾医学教授董大成科学实验,把老鼠分为两组,一组在喂食中添加黄曲霉毒素,另一组除了在饲料中添加黄曲霉毒素之外,还增加维生素B2或鸡蛋黄。5个月后,没加维生素B2或码蛋黄的那一组老鼠全部患痛症,而添加的那组则安然无恙。由此董教授论证,台湾地区肝癌发病率高的因素之一,是台湾人的维生素B2量摄取不足,     

选对食物 补充蛋白质

蛋白质是生命的物质基础,是人体组织的重要组成部分。选择补充蛋白质的食物,不仅要看数量(即蛋白质含量,每100克这种食物中蛋白质的数量),还要看质量(即蛋白质的氨基酸评分,得分越高说明蛋白质质量越好,越容易被吸收和利用)。本文列举优质蛋白质十佳食物,希望对人们日常进行蛋白质的补充有帮助。     

糖尿病大鼠胰腺组织SUR1蛋白表达及药物干预

目的观察糖尿病大鼠胰腺KATP通道的SUR1亚基蛋白表达变化,以及那格列奈、丹参素对其干预的结果。方法wistar大鼠高糖高脂饲料加静脉注射链脲佐菌素法建立糖尿病模型后,西药组给予那格列奈（37.5mg/kg体重）,中药组给予丹参素（0.224mg/kg体重）灌胃,4周后摘取胰腺组织,Western blot法检测SUR1蛋白表达改变。结果模型组SUR1蛋白表达显著低于对照组（P〈0.05）,那格列奈对SUR1蛋白表达表现了一定的上调作用,丹参素对其表达几乎没有影响。结论胰腺SUR1蛋白表达的降低可能是糖尿病发病的分子机制之一,对其表达的上调是那格列奈的作用机制。