透明质酸键合分枝状低分子量聚乙烯亚胺作为siRNA载体的研究

通过构建透明质酸键合低分子量聚乙烯亚胺的低毒性siRNA载体,探究其转染si RNA的效果。利用核磁共振氢谱确定透明质酸与低分子量聚乙烯亚胺嫁接形成复合物的结构,并通过MTT方法检测其对细胞的毒性。采用凝胶电泳法确定siRNA与复合载体的结合比,利用粒度仪对其粒径大小、带电量等进行表征,并通过透射电子显微镜观察其形态。通过复合载体在B16F1细胞内,观察其基因沉默效率。结果表明:当siRNA与复合载体的质量比为1∶20时,其表面带电量约为+0. 3 m V,粒子直径约为113. 7 nm,形态均匀呈球形,分散均匀。其对细胞毒性远远小于高分子量聚乙烯亚胺,但转染效果较好。因此,透明质酸键合低分子量聚乙烯亚胺是一种低毒、高效的新型非病毒载体。