大肠杆菌巴豆甜菜碱还原酶基因缺失菌株的构建 |
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引用本文: | 张文刚,叶江,吴海珍,张惠展.大肠杆菌巴豆甜菜碱还原酶基因缺失菌株的构建[J].华东理工大学学报(社会科学版),2004(5). |
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作者姓名: | 张文刚 叶江 吴海珍 张惠展 |
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作者单位: | [1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 [2]上海200237 |
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摘 要: | 报道了体外构建caiA基因缺失的带有卡那霉素抗性基因的5.2kb线状DNA分子,以此转化大肠杆菌JM83和BL21(DE3)株,借助于体内DNA同源重组,定向敲除了大肠杆菌中的巴豆甜菜碱还原酶编码基因caiA。经遗传稳定性实验、聚合酶链反应(PCR)以及Southern鉴定,表明所获得的JM83转化子22号和BL21(DE3)转化子4号确为caiA基因缺失突变株;酶活分析结果表明,22号和4号转化子均丧失了巴豆甜菜碱还原酶活性。
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关 键 词: | 同源重组 巴豆甜菜碱还原酶 基因缺失 抗性基因 突变株 |
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