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大肠杆菌巴豆甜菜碱还原酶基因缺失菌株的构建
引用本文:张文刚,叶江,吴海珍,张惠展.大肠杆菌巴豆甜菜碱还原酶基因缺失菌株的构建[J].华东理工大学学报(社会科学版),2004(5).
作者姓名:张文刚  叶江  吴海珍  张惠展
作者单位:[1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 [2]上海200237
摘    要:报道了体外构建caiA基因缺失的带有卡那霉素抗性基因的5.2kb线状DNA分子,以此转化大肠杆菌JM83和BL21(DE3)株,借助于体内DNA同源重组,定向敲除了大肠杆菌中的巴豆甜菜碱还原酶编码基因caiA。经遗传稳定性实验、聚合酶链反应(PCR)以及Southern鉴定,表明所获得的JM83转化子22号和BL21(DE3)转化子4号确为caiA基因缺失突变株;酶活分析结果表明,22号和4号转化子均丧失了巴豆甜菜碱还原酶活性。

关 键 词:同源重组  巴豆甜菜碱还原酶  基因缺失  抗性基因  突变株
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