产冷活性淀粉酶嗜冷菌的分离和纯化

文章主要对产冷活性淀粉酶的冷适应微生物进行分离和纯化。通过对菌株的分离和提取基因组DNA进行PCR扩增得到其16S rRNA基因后连接于T—载体再转入大肠杆菌JM109中,筛选阳性克隆转化子进行培养,最后提取质粒进行琼脂糖凝胶电泳检测。     

通用干扰素与胸腺肽融合基因构建与表达研究

临床上将干扰素(IFN)和胸腺肽(THYα1)联合使用远大于各自单独使用的效果,根据细胞因子协同作用的特点,本文通过DNA重组技术将两者构成一个融合基因。本实验用PCR技术将化学合成的胸腺肽α1基因与干扰素基因通过PCR拼接、扩增并克隆到PGEM-T载体中,构建克隆质粒PGEM-IFNTHY。为使IFNTHY基因在原核细胞中表达,克隆质粒经酶切、插入到表达载体pET28 a中。将重组质粒转化至表达宿主BL21(DE3)中,经诱导,SDS-PAGE和W esterb lot检测显示,pET28 IFNTHY基因得到了表达;微量细胞病变抑制法和玫瑰花结法显示表达产物有活性。     

大肠杆菌巴豆甜菜碱还原酶基因缺失菌株的构建

报道了体外构建caiA基因缺失的带有卡那霉素抗性基因的5.2kb线状DNA分子,以此转化大肠杆菌JM83和BL21(DE3)株,借助于体内DNA同源重组,定向敲除了大肠杆菌中的巴豆甜菜碱还原酶编码基因caiA。经遗传稳定性实验、聚合酶链反应(PCR)以及Southern鉴定,表明所获得的JM83转化子22号和BL21(DE3)转化子4号确为caiA基因缺失突变株;酶活分析结果表明,22号和4号转化子均丧失了巴豆甜菜碱还原酶活性。     

转基因植物遗传传递稳定性

转基因植株遗传稳定性研究是植物新品种育种的热点之一,外源基因遗传传递复杂多样,但一般都将其归结为单位点插入和多位点插入两种方式来研究其传递规律.不同的转化方法对转基因植物的遗传稳定性影响较大,在多数情况下,农杆菌质粒载体共培养转化都能获得完整的供体DNA结构,遗传稳定性好.转基因植物中,常常由于拷贝数、位置效应、甲基化等原因而导致外源基因沉默,使沉默的外源基因在有性世代间的传递因外源基因沉默的发生阶段不同而有差异.     

植物遗传工程的载体

高等植物的遗传工程,旨在用分子生物学和细胞生物学的方法,把外源遗传物质——目的基因或含有目的基因的DNA片段,通过载体或其它技术导入受体细胞并使之发生遗传转化,再利用植物细胞的全能性来获得转化了的植株。本文主要介绍近年来,寻求植物遗传工程载体系统的研究概况。     

太湖新银鱼线粒体Cytb基因PCR扩增条件的优化

为建立适宜太湖新银鱼（NeosalanxtaihuensisChen）线粒体DNA细胞色素b（Cytb）基因PCR的反应体系和扩增程序，利用正交设计LI6（4^5）表，对反应体系的模板DNA、dNTPs、Primers、TaqDNA聚合酶的浓度和退火温度进行五因素四水平优化筛选和扩增程序的优化，确立了最优反应体系和扩增程序。在设定的PCR扩增条件中dNTPs浓度对扩增结果的影响最大，这极显著水平；引物浓度、退火温度对扩增结果的影响显著；TaqDNA聚合酶的浓度对扩增结果的影响最小，不显著。25pL的反应体系中，在退火温度为50℃、引物浓度为0．5μmol／L、Taq酶浓度为2．5U／μL、模板浓度为5ng／μL、dNTPs浓度为2．5mmol／L的条件下，太湖新银鱼线粒体Cytb基因扩增效果为最佳，电泳条带清晰、规则。     

植物细菌诱导型表达载体的构建

根据GenBank中细菌诱导型启动子的碱基序列设计一对引物,通过PCR扩增出启动子PPP3(AF469483,220bp).经分子操作将启动子和质粒pUC18连接后转化E.coliDH5α,经蓝白筛选和PCR检测筛选阳性菌落,测序结果与Genebank中的碱基序列完全相同.对扩增到的PPP3片段和含目的基因(hrap或pflp)的pBI121质粒进行双酶切,分别回收PPP3片段和含目的基因的pBI121大片段,连接后转化E.coliDH5α,通过卡那霉素抗性筛选和PCR检测,表明细菌诱导型启动子和目的基因已正确连接.用重组质粒转化农杆菌,经卡那霉素抗性筛选和PCR检测,证明植物细菌诱导型表达载体构建成功.     

链霉菌查尔酮合成酶基因克隆及原核表达载体构建

根据Genbank数据库已知的链霉菌的查尔酮合成酶基因的保守区设计chs基因特异简并引物,土壤总DNA为模板,利用PCR技术扩增得到该l条chs基因编码区,通过TA克隆、测序和同源比对及进化分析表明:该基因为放线菌来源chs基因.分别在该基因5’末端和3’末端分别引入的限制酶NcoI和EcoR I酶切位点,利用上述2种限制酶分别酶切导入到psimple-T/chs载体和原核表达pET32a,凝胶回收目的片段后,将二者连接并转化大肠杆菌感受态细胞,转化子经菌液PCR筛选、双酶切鉴定后,3730测序结果表明,该基因全长编码区为1089 bp,推测该基因编码全长为362个氨基酸残基,等电点(PI)为5.41、分子量为3 965道尔顿含有CHS保守功能区的酸性蛋白质.分析表明,该基因与Streptomyces lividans来源的查尔酮合成酶RppA基因核苷酸相似性高达93％,氨基酸序列相似性高达87.70％.测序结果表明,该基因已经成功插入到pET32a载体中.     

GUS(β—glucuronidae)基因在水稻植株中的表达

采用花粉管通道法,将带GUS基因的PBI121质粒DNA导入栽培稻农垦58。用荧光法检测GUS基因在水稻植株中的表达以及根据Dot blotting和Southern blotting的结果分析,揭示了经花粉管通道途径导入的外源DNA整合到了转基因植株的基因组中,并在某些转基因植株中得到表达。本文还对转基因植株后代出现的各种变异型进行了探讨。     

绿色荧光蛋白基因在转基因金鱼中的整合与表达

通过分子克隆技术将鲤鱼β—肌动蛋白启动子(carpβ-actinpromoterA)与编码绿色荧光蛋白(GFP)的cD NA融合构建成能在真核生物体内表达的质粒载体pAGFP。质粒pAGFP经PvuⅠ线性化后采用显微注射法导入金鱼受精卵,在胚胎发育初期,经紫外光激发能观察到少数胚胎发绿色荧光。在通过PCR实验检测出的5个阳性个体染色体DNA中,经点杂交实验证实有2个个体染色体基因组上整合了GFP基因。     

GPS/罗兰C/SINS/AHRS组合导航系统及试验

组合导航系统已成为现代船用导航系统的重要配套设备,并已向着多组合导航系统方向发展。针对导航精度及可靠性,设计了GPS/罗兰C/SINS/AHRS组合导航系统,该组合导航采用了自适应联邦卡尔曼滤波(Kalman)的方法,通过闭环形式校正SINS,并用姿态航向参考系统(AHRS)代替捷联惯性导航系统(SINS)输出的航向角以保证航向角的收敛,同时对罗兰C的测量值进行坐标变换以消除由于坐标系不同而带来的常值误差。实际的静态与动态试验结果表明,该组合导航系统是可行的,能满足任务要求,并且易于工程实现。     

关于爱多士猜想4/n=1/x+1/y+1/z

文献[3]指出,不定方程 4/n =1/x+1/y+1/z除了n≡1 ,121,169,289,361,529(mod840)外,对其余的所有正整数n都可解。本文给出了上述不定方程的解满足的条件,借助这一条件,得到了文献[3]中没有解决的n≡1,121,169,289,361,529(mod840)中每一种情形的两大类正整数解的具体表达式。     

人文/文化生态/生生

人文、生态的关系,首先是其自身的生成关系.在中国,“天文—地文—人文”是一体性的.西方则不然,我们所熟知的人文主义是以文艺复兴为基础的人本主张,即一切围绕“人”的原则,生态亦然.对我们而言,它是一个历史不长的舶来概念,并迅速窜红.而在“生态危机”下的各种生态问题,根本上说也与“以人为本”有关.我国古代的“生生”概念虽不能与生态边界重叠,所包容的意义和意思却更大、更积极、更符合我国传统的知识体制.它更完整地体现了我国的人文与生态的意涵,对当下的生态危机具有治疗作用,应竭力彰扬之.     

论奥基夫/法尔利《阿拉丁或神灯》的特点和影响

奥基夫/法尔利的《阿拉丁或神灯》(1813)让《天方夜谭》中阿拉丁和神灯的故事成功地走上伦敦舞台，并对后世的阿拉丁改编剧产生重要影响。文章通过历史主义的研究方法发现《阿拉丁或神灯》的成功之处有三:第一，大规模的中国风；第二，约瑟夫·格里马尔迪的滑稽表演；第三，顺应社会进步的伴侣式婚姻观。它的影响至少体现在以下两处:第一，亨利·拜伦的《阿拉丁:了不起的无赖》(1861)继承《阿拉丁或神灯》的三个特点；第二，波洛克玩具剧院所用的剧本《阿拉丁或神灯》(1876)是奥基夫/法尔利《阿拉丁或神灯》的简写本。      

服务台可修的M／G／1／N排队系统分析

研究了服务台可修的Ｍ／Ｇ／１／Ｎ排队系统，其中服务台在系统的空闲期内仍可能失效，在平稳状态下，分析了队长的嵌入马尔柯夫链。应用补充变量法和样本点技术，导出了一般队长分布，获得顾客消失的概率和服务员忙期分布。     

CTAB/脂肪醇/正戊烷/水体系中的微乳化作用

通过制作十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)/脂肪醇/C5H12/水体系的拟三元相图,讨论了助表面活性剂(醇)与表面活性剂的质量比(Km)和助表面活性剂的种类对混合体系微乳化作用的影响.在研究范围内,当Km=1时,混合体系形成的微乳区最大.醇的链长是影响微乳区大小的另一个因素,所研究的3种醇中,丁醇为助表面活性剂时所形成的微乳状液含水量最大.     

论维吾尔语元音/i/和/e/的定位及其音位变体

在维吾尔语音系统中,元音/i/和/e/的地位十分重要,关于这两个元音的定位及其变体的问题历来成为学者们研究和争论的焦点。尤其是20世纪90年代以来,研究成果大量涌现,其研究方法和研究角度也呈现多样化的趋势。对这些研究成果进行科学的述评,不仅在揭示维语语音在各语音层面的共性和个性方面具有理论意义,而且对于少数民族语言的教学工作具有实践的指导意义。     

关于不定方程1/x+1/y=b/a的几个结果

给出了不定方程1/x+1/y=b/a有解的充要条件,确定了解的构造和在特殊条件下解的个数。     

“消失”还是“隐匿”:《1844年经济学哲学手稿》中“市民社会”存否辨析

马克思在《1844年经济学哲学手稿》中避谈“市民社会”的事实,在学界引发了市民社会概念是“消失了的范畴”这一代表性观点,但从文本表述和文本内容相结合的整体性视角来看,市民社会概念实质上是“隐匿”而非“消失”的。市民社会概念的“隐匿”主要源于马克思研究视域和批判方法的双重变革：从国家到市民社会的研究视域的转变促使马克思认识到现实的市民社会内蕴多重历史面相和理论意涵,马克思为革新和重构市民社会概念而刻意将其加以“隐匿”;政治经济学批判方法的运用则推动马克思自觉意识到应当深入市民社会内部展开具体的、历史的分析,这种批判方法的变革为市民社会概念的“隐匿”留存可能性与合理性空间。市民社会概念的“隐匿”不仅表征马克思思想发展中的一种进步性指向,也反映出马克思主义在不断展开的市民社会批判中自我革新的理论品质。     

中国的市值账面比效应为什么不显著？

新古典因子定价理论认为，市值账面比（MB）能够衡量企业未来的发展潜力，是重要的价值定价因子。然而国内外多数研究发现，中国的市值账面比效应并不显著，部分西方学者甚至提出了中国市场不适合价值投资的论断。目前中国市场市值账面比效应不显著的深层原因和逻辑机制尚未明确。实证研究发现：（1）存在一种M绕B循环往复的绕锚运动，污染了传统方法下的三因子定价检验。 （2）绕锚运动污染三因子定价检验的机制路径是：M来源于市场，信息实时传递，信息传递效率高；B来源于账目，每个季度公布一次，信息传递效率低。M和B之间的信息传递效率不匹配导致了传统的MB检验机制被污染。（3）剔除了MB指标的绕锚运动后，中国市值账面比效应变得显著，反驳了部分西方学者认为中国市场不适合价值投资的论断。