根癌农杆菌Atu5117基因原核表达载体的构建

为进一步提高农杆菌在植物转基因中的效率,构建一个原核基因表达载体,为农杆菌T-复合物招募蛋白VBP1的编码基因Atu5117的表达调控机理研究奠定基础。首先,通过聚合酶链式反应(PCR)获得Atu5117基因5’端上游具有转录活性的基因片段。然后,用绿色荧光蛋白基因(gfp)和493bp Atu5117启动子构成嵌合基因,体外构建原核表达载体PRSET-Agfp1,并转化到宿主细胞(大肠杆菌DH5α)。通过对绿色荧光蛋白(GFP)的跟踪观察,最终确定有启动子转录活性的基因片段。结果表明,该原核表达载体PRSET-Agfp1构建成功,为Atu5117基因的表达调控机理研究奠定基础。     

HCGβ抗肿瘤核酸疫苗的纯化工艺

对HCGβ抗肿瘤核酸疫苗的预处理和层析纯化工艺进行了研究。用碱裂解法对湿菌体进行预处理,当菌体湿重(g)∶悬浮液体积(mL)∶裂解液体积(mL)∶中和液体积(mL)为1∶2∶2∶2,碱裂解时间为8~12 min时,质粒的产量最高,可达32.94 mg/g。用Sepharose 6 FF凝胶过滤层析去除RNA和蛋白质,再用Plasmidselect亲和层析捕获超螺旋质粒DNA,质粒DNA的得率为48.3%。用L-Histidine-agarose亲和层析可从澄清的碱裂解液中一步分离纯化超螺旋质粒DNA,质粒DNA得率为51.62%。经琼脂糖核酸电泳检测,HCGβ抗肿瘤核酸疫苗超螺旋质粒DNA的纯度为100%电泳纯。     

通用干扰素与胸腺肽融合基因构建与表达研究

临床上将干扰素(IFN)和胸腺肽(THYα1)联合使用远大于各自单独使用的效果,根据细胞因子协同作用的特点,本文通过DNA重组技术将两者构成一个融合基因。本实验用PCR技术将化学合成的胸腺肽α1基因与干扰素基因通过PCR拼接、扩增并克隆到PGEM-T载体中,构建克隆质粒PGEM-IFNTHY。为使IFNTHY基因在原核细胞中表达,克隆质粒经酶切、插入到表达载体pET28 a中。将重组质粒转化至表达宿主BL21(DE3)中,经诱导,SDS-PAGE和W esterb lot检测显示,pET28 IFNTHY基因得到了表达;微量细胞病变抑制法和玫瑰花结法显示表达产物有活性。     

利用CRISPR/Cas9双质粒系统构建Nissle 1917ΔcheZ基因缺失株

为研究趋化性基因cheZ对大肠杆菌益生菌Nissle 1917的影响,研究以敲除大肠杆菌Nissle 1917的cheZ基因为目的.首先,利用诺唯赞ClonExpress?MultiS一步克隆试剂盒构建pTargetTΔcheZ重组质粒,随后将pTargetTΔcheZ重组质粒电转入含pCas质粒的Nissle 1917感受态中,以实现对大肠杆菌益生菌Nissle 1917染色体中cheZ基因进行靶向敲除,经PCR鉴定和基因测序双重证实,Nissle 1917基因组中的cheZ基因已敲除.最后,经IPTG诱导和高温培养,消除缺失株中的pTargetTΔcheZ和pCas 2个质粒,最终获得趋化性基因cheZ缺失株Nissle 1917ΔcheZ.本试验为验证cheZ基因在益生菌Nissle1917中的生物活性及其扮演的基因功能的后续相关研究打下了前期基础.     

城市绿色与灰色空间复愈作用的初步对比研究

通过对比城市绿色及灰色空间复愈作用的差异,初步探讨这两类城市环境对个体身心资源产生影响的效果和速度,为今后环境复愈作用的本土化理论研究与应用提供支持。采用文献法和实验法相结合,在查阅与整理国内外相关文献的基础上,设计了单因素重复测量的实地实验。实验随机选取14名男性被试,分组后暴露于绿色或灰色空间这两种环境刺激中,进行词语联想测验引发压力状态,以正性负性情绪量表呈现被试在压力和复愈状态下的情绪变化,用唾液淀粉酶活性水平作为生理指标,直观监测被试的自主唤醒水平。结果显示,本实验压力引入的效果并不理想,没有造成显著的身心资源消耗;实验所选的城市绿色空间可在5 min内有效降低个体的自主唤醒水平,10 min时此作用更加明显;绿色空间组被试的消极情绪在15 min内得到有效缓解,而灰色空间组被试的积极情绪则在复愈阶段显著减少。因此,城市绿色空间在短时间内对个体的生理资源有较好的复愈作用,而灰色空间缺乏该复愈作用;同时绿色空间对个体的心理资源有显著的复愈作用,而灰色空间有消耗个体心理资源的可能。     

怀旧对“金钱欲望”的影响——一个探索性研究

尝试将怀旧与金钱的研究领域相结合,通过3个实验证实了怀旧会降低个体对金钱的欲望.具体表现为:消费者在怀旧状态下会提高个体的社会支持感知,进而提高对产品的支付意愿(实验1);在独裁者游戏中,怀旧会让个体舍弃更多的钱(实验2);怀旧会降低个体对金钱重要性的评估(实验3).这一研究丰富了现有关于怀旧和金钱的文献,结论对营销人员、政策制定者、慈善和政治组织有深远影响.     

绿色广告诉求与消费者购买意愿关系研究——产品类型和面子意识的调节作用

随着企业绿色化发展战略的转型,如何采取有效的广告诉求促进绿色营销已经引起企业界和学术界的高度关注。根据精细加工模型和印象管理动机理论,通过3个情境实验研究绿色广告诉求与消费者绿色购买意愿的关系及内在作用机制。研究发现：诉求方式(利己和利他)与产品类型(实用品和享乐品)交互作用于消费者绿色购买意愿,绿色感知价值在这交互效应中发挥部分中介传导机制,广告诉求在不同的购买情境(群体和独立)下对绿色购买意愿存在显著的匹配效应,面子意识在这交互效应中起到调节作用。研究结论一方面对丰富绿色广告理论具有一定的参考价值,另一方面为推动绿色营销实践提供有效的广告策略。     

Hela细胞膜表面LDL受体运动追踪研究

本实验利用带DiI荧光标记的低密度脂蛋白(LDL)与Hela细胞表面LDL受体结合,通过CCD荧光观测系统实时记录观测图象,并利用自己开发的单粒子追踪(SPT)数据处理系统,对被标记上的受体进行定位和轨迹分析。通过实验,得到了LDL受体几类典型的运动方式,并经过大量轨迹的统计,讨论了LDL受体在细胞膜表面存在的特定结构的一些性质。     

信号检测论在内隐学习研究中的应用

信号检测论引入心理学研究领域是对传统心理物理学方法的一个发展.在内隐学习实验中,信号检测论的两个指标d'和β分离了个体的感受性和主观判断标准,利用d'和β的共变关系证实了内隐学习的存在和内隐学习的特征.本文探析了内隐学习研究中应用信号检测论(正态分布信号检测模型)的逻辑机理.从被试的心理行为反应上微观地分析了用SDT揭示无意识领域的可行性.     

生命科学若干概念简析

酵母人工染色体(yeast artificia) 它是利用酵母染色体的着丝粒和端立元件,人工构成的能够在酵母细胞中增殖并能转移到哺乳动物细胞中的遗传元件。这类载体能够将大至200～1000kb的DNA遗传物质导入寄主细胞。YAC现在被用来研究大的遗传座位,例如11号染色体的β-蛋白区段的生理调节作用。     

英语、汉语、朝鲜语、日语宾语的对比

对比英语、汉语、朝鲜语、日语四种语言的宾语,人们会发现它们存在很多异同。而这些异同点会为外语教学、翻译及第二语言习得等方面具有一定的实用价值。     

文学意义的消解与重建

在商品化和信息化的时代大潮冲击下 ,文学面临着意义的流失与消解。文学的这种现状是与整个人类文化的困境紧密相关的 ,是人类发展特殊阶段上的必然产物。中国当代文学应致力于意义的探寻与重建 ,这表现为在对现实的清醒认识的基础上对理想的重新肯定 ,对现实中的物欲的批判性把握 ,以及对人类生存意义的重新认识。     

从原型角度看《远大前程》中的郝维仙小姐

瑞士著名心理学家荣格的原型理论有四个重要方面：人格面具（persona）、阴影（shadow）、阿妮玛（anima）和阿妮姆斯（animus）、自性（self）。从以上四个方面来挖掘和分析《远大前程》中的郝维仙这一悲剧女性形象具有重要的意义，她的悲剧有着其自身的人格面具、阴影、阿妮玛和阿妮姆斯、自性等心理因素。     

从美语、英语差异看美语固有的活力

主要论述了美国英语和英国英语在语法运用、单词拼写和遣词造句等方面存在的差异。这些差异充分体现了当代美语既保持英语传统又从传统中革新的特点。并从这些差异的分析上进一步论述美国英语由于科技文化的发展 ,语言由繁趋简、活泼生动、富有表现力     

On the Principle with Listening and Speaking in the Lead

ＯｎｔｈｅＰｒｉｎｃｉｐｌｅｗｉｔｈＬｉｓｔｅｎｉｎｇａｎｄＳｐｅａｋｉｎｇｉｎｔｈｅＬｅａｄ￥ＬｕＤｏｎｇＡｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｄｅａｌｓｗｉｔｈｗｈａｔｔｈｅｐｒｉｎｃｉｐｌｅｗｉｔｈｌｉｓｔｅｎｉｎｇａｎｄｓｐｅａｋｉｎｇｉｎ...     

圣西门的实业思想与法国近代的工业化

圣西门的思想以实业理论而著称,这一理论认为近代社会是实业社会,以实业活动为基础,以创造财富、造福人类为目的;为此必须努力发展近代工商业,实现工业化;圣西门还就发展法国新型的金融业和改进农业经营提出了自己的主张.圣西门的实业思想和工业化主张成了第二帝国时代工业化的主导思想,对法国近代经济发展产生了重大而深远的影响.     

本然的和谐

科学创造文明 ,也使世界受到损害。当代人的生存被合法地虚无掉了 ,这种合法化的生存危机只有通过艺术的“解合法化”才能克服。艺术是人类感情的全音阶 ,能够使人意识到生命的真实存在。人与世界的和谐 ,是自然而然地拥有的。只是由于人的不断超越 ,这种本然的和谐被遗忘掉了。艺术能够引导人们回归人与自然本原的和谐状态     

绿色城市背景下如何实现景观的人本表达

我国城市建设发展迅速,对城市景观小品需求增大。速生的景观小品设计质量参差不齐,即使是设计质量较高的景观小品也因奢华而与绿色环保的时代要求相去甚远。景观设计将野草文化、就地取材纳入设计理念中,可以实现在绿色城市背景下景观的人本表达。     

《拉格泰姆时代》:向历史意义的回归

美国后现代小说家多克特罗的小说《拉格泰姆时代》,以历史事实与虚构故事相互交织,构筑了一个历史人物与虚构人物的共同世界;使文学政治化,政治历史化。它表现了历史人物和虚构人物都被无法控制的经济和政治力量所异化的命运,也讲述了一段作为拉格泰姆音乐撰写的历史,从而构成了一部节奏明快的新历史主义小说文本。     

广告语与幽默语的顺应性对比研究

广告语与幽默语的顺应性特征有显著的可比性。广告语是通过顺应受众、＂投其所好＂来达到目的。顺应受众是显性的＂褒扬的＂顺应过程;使受众顺应广告语者的目的、产生购买行为则是隐性的顺应过程。幽默语的特点是：幽默制作者有意违背或不顺应受众或听者的预期,这是一个显性的不顺应过程;而通过某种＂线索＂或＂关联＂（即隐性顺应因素）引导受众朝意想不到的或隐性的意义上思考,这个意义就是幽默制作者的意图,这是一个隐性的且具备＂贬损性质的＂顺应过程。广告幽默语具备广告的特征和幽默的顺应性特征。