丹参多酚酸对大鼠脑缺血再灌注内质网应激的影响

目的研究注射用丹参多酚酸对大鼠脑缺血再灌注内质网应激的影响。方法将54只雄性SD大鼠随机分为3组(n=18):Sham(假手术)组、IR(缺血再灌注)组、丹参多酚酸组。采取Zea Longa法制备脑缺血再灌注模型,丹参多酚酸组在缺血2小时再灌注24小时后给予尾静脉注射10mg/kg丹参多酚酸,连续7天,每日1次,IR组及Sham组给予同等剂量生理盐水尾静脉注射。末次给药6小时后进行神经功能评分;脑梗死体积测定及HE染色法观察大脑神经元的组织病理学变化;Western Blotting法测定脑组织Caspase-12的蛋白含量。结果 Sham组大鼠脑组织红染,未见梗死灶;IR组大鼠脑梗死体积明显增大,皮质梗死灶明显;神经元坏死明显增多;Caspase-12的蛋白表达均上调(P0.05),丹参多酚酸组大鼠神经功能评分降低(P0.05);脑梗死体积明显小于IR组(P0.05);Caspase-12的蛋白表达下降(P0.05)。结论注射用丹参多酚酸可能通过抑制内质网应激而起到脑保护作用。     

电针治疗对大鼠脑缺血再灌注中AnnexinAl和TRPM7表达的影响

目的：电针治疗在脑缺血再灌注损伤中AnnexinA1与TRPM7共存为探讨TRPM7在脑缺血再灌注损伤中的途径提供理论依据。方法将SD大鼠随机分成正常对照组、缺血再灌组、电针治疗组、假手术组,以线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞再灌注模型,电针穴位选择“水沟”、“承浆”穴。用Morris水迷宫试验验证学习记忆能力和免疫荧光双标方法检测AnnexinA1和TRPM7在大鼠脑组织中的共存表达。结果①大鼠大脑中动脉栓塞60分钟再灌注24小时后,可出现明显学习记忆能力障碍,缺血再灌组与电针治疗组有显著性差异（P＜0.05）,在脑缺血前后以电针治疗后可显著改善大鼠学习记忆能力。②在海马CA1、CA3、皮质区,脑缺血再灌组与正常对照组相比, AnnexinA1和TRPM7共存表达升高率分别是48.06％,50.19％,30.07％（ P＜0.05）。电针治疗组与脑缺血再灌组相比,AnnexinA1和TRPM7共存表达水平下降率分别是34.88％,47.80％,41.96％（ P＜0.05）。结论脑缺血再灌注后大鼠学习记忆能力下降,且AnnexinA1和TRPM7共存表达上调,电针治疗后能够显著改善大鼠的学习记忆能力,并通过逆转AnnexinA1和TRPM7表达,且可能通过TRPM7途径来调整AnnexinA1的作用。电针有可能通过抑制TRPM7和AnnexinA1来改变神经元的凋亡命运。     

MK-801对大鼠局灶性脑缺血再灌注后AQP4蛋白的动态表达及其对脑水肿的影响

目的 1.研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后AQP4蛋白的动态表达及其与脑水肿的关系.2.探讨MK-801对大鼠局灶性脑缺血再灌注后AQP4蛋白表达的影响.方法 清洁级雄性SD大鼠54只,随机分为假手术组、缺血组和MK-801治疗组;缺血组和MK-801治疗组分为4个时间点:MCAO再灌注后4h、1d、3d、7d,每组6只大鼠.参照Zea-Longa线栓法建立大脑中动脉栓塞2h再灌注模型.免疫组化半定量分析AQP4蛋白的表达.另取SD大鼠54只,分组同前,干湿重法测脑组织含水量以评估脑水肿的程度.各组动物处死前,参照Zea-Longa[1]五分法进行神经功能缺损评分.结果 1.所有时间点MK-801治疗组神经功能缺损评分显著低于缺血组(P＜0.05).2.假手术组,缺血4h组和MK-801治疗4h组AQP4蛋白表达无明显差异;再灌注1d、3d、7d缺血组AQP4蛋白表达较假手术组明显增高(P＜0.05),再灌注3d达高峰;MK-801治疗组和缺血组AQP4蛋白表达趋势相同,再灌注1d、3d、7d MK-801治疗组AQP4蛋白表达显著低于相同时间点缺血组(P＜0.05).3.假手术组,MK-801治疗4h组和缺血4h组,脑组织含水量无明显差异;再灌注1d、3d、7d缺血组脑组织含水量较假手术组明显增高(P＜0.01),再灌注3d达高峰;治疗组和缺血组脑组织含水量变化趋势相同,再灌注1d、3d、7d MK-801治疗组脑组织含水量显著低于相同时间点缺血组(P＜0.01).4.缺血再灌后脑水含量与AQP4蛋白表达呈正相关,脑水肿与AQP4蛋白表达有密切关系r=0.918(P＜0.01).结论 1.MK-801改善了缺血再灌后大鼠神经功能,减轻了脑水肿,具有神经保护作用.2.缺血再灌注后AQP4蛋白的表达变化与脑水肿的发展变化相一致,二者密切相关.3.MK-801减轻了大鼠缺血再灌后脑水肿,可能通过下调AQP4蛋白表达实现的.     

阿托伐他汀对局灶性脑缺血大鼠神经保护作用的研究

目的：探讨阿托伐他汀对局灶性脑缺血大鼠脑组织丙二醛（ MDA）含量的影响。方法选用健康Sprague-Dawley （ SD）大鼠,随机分为阿托伐他汀预处理组、单纯缺血组和假手术组。阿托伐他汀预处理组于术前15天灌胃阿托伐他汀,6mg/（kg· d）,然后制备大鼠局灶性脑缺血模型,化学比色法测定脑组织匀浆中MDA含量。结果与假手术组比较,局灶性脑缺血24小时,MDA含量明显升高（P＜0.05）。与单纯缺血组比较,阿托伐他汀预处理组明显降低脑组织匀浆MDA含量（ P＜0.05）。结论阿托伐他汀可以降低局灶性脑缺血大鼠脑组织MDA含量,增强氧自由基清除作用,具有神经保护作用。     

岷当归提取物对血管性认知功能障碍模型大鼠海马Bcl-2与Bax蛋白表达的影响

目的通过对岷当归的主要有效成分的提取与分离,观察不同岷当归提取物对血管性认知功能障碍模型大鼠神经凋亡细胞Bcl-2和Bax表达的影响,探讨岷当归提取物对模型大鼠神经细胞凋亡的影响及可能的作用机制。方法采用双侧颈总动脉反复夹闭+单侧颈总动脉结扎的方法制备慢性脑低灌注大鼠血管性认知功能障碍模型。选取雄性wistar大鼠60只,随机分为假手术组(sham-operation group,S)、模型组(model group,M)、尼莫地平对照组(Nimodipine control group,N)、当归挥发油组(Volatile oil from Angelica sinensis group,V)、当归多糖组(Angelica polysaccharide group,P)、岷当归水煎剂组(Min angelicasinensis water decoction group,X)6组。除假手术组S组外其余M组、N组、V组、P组、X组各组采用反复夹闭双侧颈总动脉+硝普钠注射+单侧颈总动脉结扎的方法,制备慢性脑低灌注大鼠血管性认知功能障碍模型。S组、M组给予生理盐水灌胃,N组给予尼莫地平灌胃,V组给予当归挥发油灌胃,P组给予当归多糖灌胃,X组给予岷当归水煎剂灌胃,每日1次,连续灌胃治疗4周。灌胃结束后第1天、第4天、第5天进行行为学试验(水迷宫法)。断头处死大鼠,留取脑组织,光镜下观察HE染色病理切片,免疫组织化学方法检测Bcl-2和Bax表达,高清晰彩色病理图文分析系统定量分析。结果 Morris水迷宫试验显示:各干预组都有提高学习记忆能力的作用,尤以岷当归水煎剂组记忆力改善明显,优于尼莫地平组、当归多糖组和当归挥发油组(P0.01);尼莫地平组、当归多糖组、当归挥发油组与岷当归水煎剂组比较均能促进VCI模型大鼠Bal-2蛋白的表达、抑制VCI模型大鼠bax蛋白的表达(P0.05),尤以岷当归水煎剂组效果最佳(P0.01)。结论当归挥发油、当归多糖、岷当归水煎剂均能降低血管性认知功能障碍模型大鼠脑组织细胞凋亡基因bax的表达,增加具有神经元保护作用的bcl-2基因表达,从而抑制神经细胞凋亡,加速神经功能的恢复,共同发挥脑保护作用,但水煎剂作用更为明显,体现了各种有效成分相互协调的优势。     

缺血后处理脑保护作用的研究进展

缺血后处理可以诱导脑缺血耐受形成而产生脑保护作用,其机制可能与内源性生成物如腺苷和一氧化氮增多,氧自由基导致细胞脂质过氧化作用的减轻,细胞内信号转导通路的激活,线粒体的三磷酸腺苷敏感性钾通道开放和线粒体通透性转换孔道的关闭,脑缺血再灌注皮质内HSP70的表达增加有关。现对缺血后处理脑保护作用的研究现状做一综述。     

白藜芦醇对脑出血和小胶质细胞的作用研究

目的探讨白藜芦醇对脑出血和小胶质细胞的保护作用。方法采用Rosenberg法构建大鼠脑出血模型,并给予白藜芦醇(30mg/kg),分组为对照组、脑出血模型组和脑出血模型+白藜芦醇组,并检测三组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑组织血肿体积;培养SD乳鼠小胶质细胞,给予25μM的白藜芦醇处理,采用CCK-8实验和ELISA试剂盒检测两组细胞活性和炎性因子水平。结果与对照组相比,脑出血模型组大鼠神经功能评分升高、脑组织含水量增加、脑组织血肿体积增加,而给予白藜芦醇能够逆转这些变化。此外,给予白藜芦醇不能改变小胶质细胞活性,但能降低小胶质细胞炎性因子水平。结论白藜芦醇能够改善脑出血后的炎性损伤,可应用于临床治疗脑出血。     

厄贝沙坦对慢性心衰模型鼠B-型利钠肽、细胞因子及心肌细胞凋亡的影响

目的观察厄贝沙坦对心衰模型鼠B-型利钠肽、细胞因子及心肌细胞凋亡的变化。方法将37只SD大鼠随机分为对照组(n=12)和造模组(n=25),造模采用盐酸多柔比星诱导心力衰竭,造模成功随机分模型组和厄贝沙坦(6.75mg/Kg,1次/日)组各12只。厄贝沙坦应用4周后,观察大鼠的一般状况、死亡数、心肌组织形态学的改变、心肌细胞凋亡及细胞凋亡指数,检测B-型利钠肽(BNP)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)及白介素-6(IL-6)水平的变化。结果与对照组相比,模型组大鼠死亡数增加,心肌细胞凋亡指数明显增加,BNP、TNF-a及IL-6水平明显升高,差异显著。与模型组比,厄贝沙坦组大鼠一般状况改善明显,死亡数减少、心肌组织形态学明显改善、心肌细胞凋亡减少及细胞凋亡指数,BNP,TNF-a及IL-6水平明显降低,差异显著。结论模型组大鼠BNP,TNF-a,IL-6水平明显升高,心肌细胞凋亡增加;厄贝沙坦通过降低细胞因子水平,抑制细胞凋亡,从而延缓心力衰竭的进一步发展。     

盐酸多奈哌齐对拟VD大鼠模型海马神经元保护作用机制的研究

目的观察盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(VD)大鼠模型海马NMDA受体亚单位NPR1的免疫组织化学表达的变化,及对GSH-PX、CAT的影响,探讨其在血管性痴呆中的神经保护作用机制。方法采用双侧颈总动脉反复夹闭、再通, 并腹腔注射硝普钠法制备模型,药物组用盐酸多奈哌齐溶液灌胃;用Y-型迷宫试验观察其行为学改变;用免疫组织化学技术观测大鼠海马神经元N-甲基-D -天门冬氨酸受体-R1的表达变化;GSH-PX、CAT分别采用DTNB法及紫外分光光度法测定其活力。结果盐酸多奈哌齐组大鼠学习、记忆成绩优于模型组 (P<0．01),其海马CA1区NMDA受体-R1表达明显降低,与模型组比较有显著性差异(P<0．01);GSH-PX、CAT较模型组明显增高(P<0．01),与假手术组相比无显著性差异(P>0．05)。结论盐酸多奈哌齐可通过降低NMDAR1的表达,提高GSH-以、CAT的活力来保护VD大鼠海马神经元。     

脑缺血后神经元Caspase-3 mRNA表达的研究进展

脑缺血损伤过程中神经元存在两种死亡形式:坏死(necrosis)和凋亡(apoptosis)。细胞的死亡形式取决于细胞类型及其受到的损伤的性质和强度。轻度、短时间的缺血刺激常表现为凋亡。凋亡是指细胞程序性死亡过程,涉及一系列基因的激活和其表达调控的改变。内源性凋亡调节基因的表达可能在决定缺血性神经细胞的生死命运中起重要作用。Caspase是涉及细胞凋亡的蛋白酶, 参与缺血缺氧性脑损伤的病理过程。 1．Caspase-3的生物学特性     

依达拉奉治疗急性脑梗死的疗效观察

目的观察依达拉奉对急性脑梗死的治疗效果。方法将78例急性脑梗死患者随机分为治疗组和对照组,治疗组在常规治疗基础上给予依达拉奉治疗（10～14）d。两组分别于治疗前及治疗后14d进行神经功能缺损评分及疗效评定。结果治疗14d后治疗组神经功能缺损评分明显低于对照组,（10.4±3.9）分VS（14.9±4.6）分（P〈0.05）;治疗组总有效率为89.5%,明显高于对照组的70.0%（P〈0.05）。结论依达拉奉可促进急性脑梗死患者的神经功能恢复。     

凋亡通路蛋白表达对过氧化氢诱导PC12细胞凋亡的影响

目的探讨过氧化氢（H2O2）诱导PC12细胞凋亡的机制。方法 MTT测定细胞存活率,荧光染色观察细胞形态,透射电镜观察细胞的超微结构,流式细胞仪测定细胞凋亡率,Western blotting技术和流式细胞仪检测Bcl-2和Bax蛋白的表达,分光光度计测定Caspase-3释放率。结果 0.25 mM的H2O2可诱导PC12细胞凋亡,细胞的形态发生改变,细胞核受损,细胞内Bcl-2蛋白的表达降低、Bax蛋白的表达增加,Caspase-3被激活。结论 H2O2诱导了PC12细胞凋亡,其作用机制与细胞内Bcl-2、Bax蛋白的表达及Caspase-3活性密切相关。     

木犀草素对大鼠肝癌细胞CBRH7919的作用机制

从细胞凋亡的角度研究木犀草素对大鼠肝癌细胞CBR．H7919tk／GCV系统的作用机制．采用流式细胞仪技术分析木犀草素砷大鼠肝癌细胞CBRH7919出／GCV自杀基因治疗系统的影响,以及基绿-派诺宁染色、丫啶橙（AO）染色的观察,还用琼脂糖凝胶电泳技术分析了药物对DNA的作用．经过统计学检验：联合组的凋亡率明显高于非联合组;甲基绿-派诺宁染色和丫啶橙（AO）染色出现了较为典型的凋亡形态;琼脂糖凝胶电泳出现明显可辨的梯状条带．综上,木犀草素对CBRH7919墩／GCV系统具有诱导其凋亡的作用．     

中药浴足预防下肢深静脉血栓的临床观察

目的：探讨中药浴足对预防术后下肢深静脉血栓的疗效。方法自2010年7月～2012年12月,收集60例在本院接受关节置换或关节镜术的患者,随机分为治疗组和对照组各30例,对照组予术后皮下注射低分子肝素钙抗凝联合康复训练,治疗组在对照组的基础上使用中药浴足,行双下肢血管彩色多普勒超声,观察两组下肢深静脉血栓的发生率,并观察术后引流袋引流量。结果治疗组发生下肢深静脉血栓5例（发生率16．67％）,对照组发生下肢深静脉血栓7例（发生率23．33％）,两组比较,差异有统计学意义（P＜0．05）。治疗组引流血量335．3±47．4ml,对照组引流血量347．4±40．8ml,两组引流量差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论中药浴足对下肢静脉血栓有一定的预防效果,且安全无副作用。     

槐杞黄对哮喘气道及血清IL-13水平的影响

目的:探讨IL-13在哮喘患儿血清中的表达及槐杞黄对于哮喘大鼠IL-13表达的可能影响及与布地奈德的共同作用?方法:选择 10例哮喘缓解期儿童 (哮喘组)及10例健康儿童 (健康对照组)为研究对象?两组年龄?性别?体质指数比较差异均无统计学意义?测试两组儿童初诊时肺功能,并利用酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)检测两组儿童血清 IL-13的水平?取50只4~6周龄的健康雄性SD大鼠,适应性喂养1周后,随机分为5组,即对照组?哮喘模型组?布地奈德组?槐杞黄组?布地奈德联合槐杞黄组?用卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)致敏及激发共持续6周,建立哮喘模型?通过HE染色观察肺部炎症细胞浸润情况?应用ELISA检测及比较各组大鼠之间肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)及血清中IL-13浓度的差异?结果:与健康对照组儿童比较,哮喘组儿童初诊时第1秒用力呼气量占预测值百分比及呼气峰流速占预测值百分比均升高,血清IL-13水平升高(P < 0.05)?大鼠肺组织病理学改变:模型组气道周围大量炎症细胞浸润?柱状细胞增生?气管壁增厚;对照组则无上述表现;相比模型组,布地奈德组?槐杞黄组?布地奈德联合槐杞黄组大鼠不同程度减轻(P < 0.05)?模型组BALF及血清中IL-13的浓度增加(P < 0.05)?相较于模型组,布地奈德组?槐杞黄组?布地奈德联合槐杞黄组大鼠BALF及血清IL-13浓度有不同程度降低(P < 0.05),且布地奈德联合槐杞黄组变化比布地奈德组更明显(P < 0.05)? 结论:在OVA诱导的大鼠哮喘模型中,使用布地奈德?槐杞黄或是布地奈德联合槐杞黄治疗可以不同程度改善气道IL-13分泌,因而可能改善气道炎症?布地奈德联合槐杞黄治疗可能存在协同效应?     

电针对5月龄APP/PS1转基因小鼠海马组织及组织间液可溶性Aβ1-42水平短时作用的影响

目的：探讨电针干预对早期阿尔茨海默病小鼠脑组织间液( brain interstitial fluid,ISF)及海马组织中可溶性Aβ1-42水平的影响.方法将16只雄性5月龄APP/PS1转基因阳性小鼠随机分为模型组和针刺组,将8只同窝、同性别转基因阴性小鼠设为正常对照组,采用电针“百会”、“涌泉”或同等条件束缚作为干预手段,以脑微透析技术获取小鼠海马组织间液,应用ELISA法检测3组小鼠海马组织以及海马ISFβ淀粉样蛋白1-42水平,分别在干预后的6,7,8,9 h观察其是否发生改变.结果与正常对照组相比,模型组海马组织以及 ISF中可溶性Aβ1-42明显升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组小鼠ISF可溶性Aβ1-42降低(P<0.05),海马组织Aβ1-42水平对比差异无统计学意义(P>0.05).针刺组在电针治疗后6~9 h样品ISF中Aβ1-42含量的检测结果没有随时间变化而变化(P>0.05).结论电针可降低AD模型小鼠海马ISF可溶性Aβ1-42水平.     

中草药复方A对罗非鱼消化酶活性的影响

以奥尼罗非鱼为试验对象,探讨中药复方A饲料添加剂（主要成分的配方为山楂：麦芽：砂仁=2：2：1）对罗非鱼主要消化酶活性的影响。结果显示：中药复方A能极显著地提高鱼体胃和肝胰脏的淀粉酶活性（P〈0．01）,能显著地提高肠道淀粉酶活性（P〈0．05）,也能显著甚至极显著地提高胃与肝胰脏中的脂肪酶活性（P〈0．05,P〈0．01）;但对罗非鱼的肠脂肪酶与肠胰蛋白酶的活性无显著作用（P〉0．05）。由本实验看出,中草药复方A能一定程度地提高罗非鱼的主要消化酶活性。