固定化腈水解酶的制备及酶学性能

研究磁性纳米载体的氨基化修饰及其固定化腈水解酶的条件,探讨固定化腈水解酶的酶学性能.研究结果表明载体固定腈水解酶的最佳工艺为:腈水解酶与载体配比15mg/g、戊二醛浓度3%、固定化温度30℃、固定化时间60min.固定化腈水解酶的热稳定性及p H稳定性都比游离酶有很大提高.     

卡拉胶固定化Nocardia sp.生产L(+)酒石酸

采用卡拉胶包埋具有环氧琥珀酸水解酶活性的诺卡氏菌菌体用于生产酒石酸。固定化的最适卡拉胶浓度为20 g/L,菌体浓度为200 g/L,交联剂戊二醛浓度为5 g/L,固定化后的酶活回收率可以达到70%。高浓度的环氧琥珀酸对水解反应产生抑制作用,游离细胞的米氏常数(Km)为0.234 m o l/L,抑制常数(KI)为0.22 m o l/L,固定化细胞则分别为0.31 m o l/L和0.21 m o l/L。游离细胞和固定化细胞反应的最适pH分别为8.0和8.5。细胞固定化以后,耐热稳定性增强。30°C 0.2m o l/L的底物浓度下,摇瓶中连续转化25批,L(+)酒石酸的转化率接近100%。     

应用PCR-RFLP技术检测二甲基精氨酸二甲胺水解酶2基因-449G/C多态性的实验研究

目的确定聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-restricted fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术检测二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(dimethyl arginine dimethylamine hydrolase 2,DDAH2)基因-449G/C的最适实验条件。方法对影响DDAH2基因PCR反应的主要因素进行研究。结果最适变性温度为95℃,最适退火温度为58℃,最适引物浓度为0.25μmol/L,最适2X Power Taq PCR Master Mix浓度为12.5μl,酶切体系为15.5μl体系中加5.0μl产物用5U的限制性内切酶Sma I消化。结论应用PCR-RFLP技术建立的DDAH2基因-449G/C位点多态位点检测方法简便、经济、快速。     

离子交换法固定化鸡肝酶及其低温保存的实验研究

采用离子交换法,以大孔径弱酸性阳离子交换树脂 D113为固定化载体,对可被农药抑制的鸡肝酶进行固定化．通过实验得到了最佳固定条件：离子浓度在0．25～0．375 mol/L 之间,固定时间为75 min,酶液活力为(6±2)U/mL．制备的固定化酶可在用于农药残留快速检测的酶传感器中作为生物识别元件使用．同时,初步研究了液体酶和固定化酶的保存,对固定化酶的制备和使用有参考价值．     

壳聚糖/膨润土固定化脂肪酶水解橄榄油的研究

为了改善游离脂肪酶催化稳定性低、难以回收等缺陷,以不同比例的壳聚糖/膨润土复合载体负载脂肪酶,以提高脂肪酶在橄榄油水解中的催化性能.通过红外光谱(FTIR)、扫描电镜(SEM)等对壳聚糖/膨润土复合材料进行表征,并考察了各种壳聚糖/膨润土固定化脂肪酶对橄榄油水解反应的催化性能.结果表明:当壳聚糖与膨润土的质量比为10%(CB-10)时,脂肪酶的负载量达到最高(92.1%),固定化酶的催化活性为0.56 U/mg,连续反应5批次后,固定化酶的剩余活性为初始值的68.2%,显示了较好的催化稳定性.该研究结果说明,壳聚糖/膨润土复合材料较好地兼顾了无机材料的结构刚性和天然高分子物质的生物相容性,是固定化酶的良好载体.     

蔗糖酶水解蔗糖的研究

本实验采用研磨法制备蔗糖酶，酶活性达1．575×105u·ml-1，并对其酶学性质进行了研究．测得其表观Km值约为0．015mol·1-1；初速度反应时间为0-10min；最适酶量为3．152×103-7．88×103u·mmol-1蔗糖；最适底物浓度为0．5mol·1-1；最适pH值在NaAcHAc体系中为4．4；最适反应温度为50℃．     

富硒、锌纳豆芽孢杆菌的选育

实验表明:纳豆芽孢杆菌能够进行无机硒、锌的生物转化,纳豆芽孢杆菌转化无机硒、锌的最大浓度均为1.0×10~(-5)mol/L;过量的无机硒、锌对纳豆芽孢杆菌具有明显的毒害作用,少量的无机硒、锌可促进纳豆芽孢杆菌的生长。通过正交试验优化出富硒、锌纳豆的最佳发酵条件为:每kg大豆中添加硒1.0×10~(-6) mol,锌1.0×10~(-6) mol,接种量7%,培养温度42℃,培养时间19h。经检测,此条件下发酵的纳豆硒含量为6.58μmol/kg,锌含量为7.39μmol/ kg;无机硒、锌的转化率分别为65.8%和73.9%;每克富硒、锌纳豆的纳豆激酶酶活为1195.96IU。     

固定化HRP海藻酸钙/壳聚糖微球催化水溶性导电聚苯胺的合成与表征

以海藻酸钙/壳聚糖微球为载体、用戊二醛共价交联固定于微球表面的辣根过氧化物酶(HRP)催化合成水溶性导电聚苯胺。考察了酶的固定化效果、负载率、比活力、贮存稳定性及酶促聚合特性,并对酶促聚合产物进行了表征。结果表明:共价交联微球固定化HRP可有效地用于水溶性导电聚苯胺的模板导向合成。     

罗非鱼肠道蛋白酶的提取及催化性质研究

为提高罗非鱼加工下脚料的综合利用率,开发新型的食品级蛋白酶制剂,对罗非鱼肠道蛋白酶的提取及催化特性进行了探讨.试验结果表明,罗非鱼肠道中含有非常丰富的碱性蛋白酶,其提取率可达到6200U/g;该蛋白酶在pH9.0、温度60℃的条件下有最大催化活性;在pH7~9的范围内,温度低于50℃的条件下有很好的稳定性;Fe2+离子、PMSF及EDTA对该酶表现出较强的抑制作用,初步显示该酶为金属离子依赖型丝氨酸蛋白酶.     

不同培养条件对纤维素酶产量和酶活力影响的研究

本试验采用均匀设计U_(to)(10~7)研究影响绿色木霉生产纤维素酶的五大因素(培养温度、加水倍数、底物粗纤维水平、初始pH值、培养时间),试图找出培养条件最佳组合,取得高酶产量和酶活力。结果表明:当底物粗纤维水平为50％,初始pH值为8.0。加水3.5倍,在27℃条件下培养55h,可取得最大酶产量28.09mg/g和CMC酶活力27.16mg/g.h,棉花酶活力33.26mg/g.24h。     

基于纳米CoOx/多壁碳纳米管复合材料的增强效应电化学测定芦丁

通过电沉积法在多壁碳纳米管修饰玻碳电极(MWCNTs/GCE)表面沉积氧化钴(CoOx)纳米粒子制备了纳米CoOx/多壁碳纳米管修饰玻碳电极(CoOx/MWCNTs/GCE)。在0.1 mol/L Na_2HPO_4-NaH_2PO_4(pH=7.0)缓冲溶液中(PBS),用循环伏安法(CV)和方波伏安法(SWV)研究了芦丁在修饰电极上的电化学行为。结果表明,CoOx/MWCNTs/GCE对芦丁的氧化还原反应有电催化作用。在1.0×10^(-8)~2.5×10^(-6)mol/L浓度范围内,芦丁的氧化峰电流与其浓度呈线性关系,检出限为5.0×10^(-9) mol/L(S/N=3)。建立了测定片剂中芦丁含量的新方法,结果令人满意。     

栉孔扇贝血淋巴中酚氧化酶和髓过氧物酶活性

用电镜细胞化学和分光光度技术对栉孔扇贝血淋巴中的酚氧化酶 ( PO)和髓过氧物酶 ( MPO)进行了研究 .结果表明 ,细胞质中直径分别为 30 0— 430 nm和 1 30— 2 0 0 nm的大、小两种颗粒呈 PO强阳性 ;次级溶酶体和小颗粒呈 MPO强阳性 .生化测定结果表明 ,血清中存在 PO和 MPO活性 ,血细胞仅有MPO活性 .以 TMB为底物测得血清中不依赖卤素的 MPO活力为 1 0 7.2 U,以二乙醇胺为底物测得血清中依赖卤素的 MPO活力为 53.6U.血清中 PO和 MPO的最适 p H分别为 6.0和 6.5,最适温度分别为45℃和 35℃ .     

银的新显色反应及氰化物的间接分光光度测定(英文)

本文报道了,银(Ⅰ)与安替比林基重氮氨基偶氮苯(CadionAP)的显色反应。在TritonX-100存在的pH=9.5～11.8的条件下,银(Ⅰ)与CadionAP形成1∶1的橙红色配合物,配合比为1∶1,最大吸收波长为545nm,表观摩尔吸光系数为9.4×10~4l/(mol.cm)。利用上述显色体系,提出了一个新的、灵敏的测定氰化物的间接分光光度方法。对于氰离子符合比耳定律的线性范围为0.25～6μg/25ml;表观摩尔吸光系数为:3.1×10~4l/(mol.cm)。     

MnCO_3非等温热分解反应动力学的研究

本文采用程序升温热分解色谱技术,首次研究MnCO_3在动态条件下热分解速率随温度等条件变化的规律,提出了测定动力学参数的方法。实验表明,MnCO_3在不同条件下的分解速率有较大差异,在氮气流中其分解温度范围为310~400℃,最大分解速率的温度为370℃左右,在空气流中则相应偏低10℃左右,测出表观活化能E_a为177KJ/mol,频率因子k_0为1.69×10~(-2)S~(-1),反应级数近似为1。     

木聚糖酶活性测定方法的研究

探讨了木聚糖酶活性测定中的几个关键因素对酶活性的影响。结果表明,木聚糖酶活性测定的最适条件是:测定温度55℃,pH5.5,底物浓度1%,酶促反应时间10min,稀释度40。     

三唑磷降解菌的筛选、鉴定及其系统发育分析

从长期施用有机磷农药的土壤中,以三唑磷为唯一碳源和能源,采用逐渐加量的驯化方式,分离纯化到2株对三唑磷有较好降解能力的细菌,命名为TAP-W和TAP-R。其中TAP-W菌革兰氏染色阴性,能够在30℃～40℃范围内和pH6.0～9.0范围内良好生长,其最适生长温度为35℃,最适pH为7.0。TAP-W菌在含0.1%三唑磷的无机盐培养基中(三唑磷浓度400mg/L)振荡培养72h后,对三唑磷降解率最高,达到65.9%。根据TAP-W菌株的形态特征,生理、生化特性和系统发育分析,初步鉴定其为假单胞菌属(Pseudonmonas)细菌。     

产β-1,3-葡聚糖酶链霉菌菌株的筛选及其酶特性研究

从大白菜植株根际土壤中取样,通过茯苓粉琼脂培养基的透明圈试验,分离筛选到4株产β 1,3 葡聚糖酶的链霉菌菌株R8,R15,R31和AS.经比较发现,链霉菌菌株R15最早产生较明显的透明圈,且透明圈最大,澄清度最高.从R15菌株提取酶液,测定其分解β 1,3 葡聚糖的酶活力.结果表明,该酶作用的最适温度为55℃,最适pH为5 0;低于55℃,pH7 5以下,该酶较稳定;Fe3 ,K ,Cu2 ,Hg2 对酶有抑制作用,而Ca2 ,Fe2 ,Ba2 ,Mn2 ,Al3 及Zn2 对酶有激活作用.抑菌圈试验表明,该酶对小麦纹枯病菌具有很强的抑制作用,抑菌圈宽度达15mm.盆栽防病试验结果表明,小麦种子经酶液处理后,病根率为34 51%,防病效果为64 28%.     

淡水白鲳、团头鲂、黄颡鱼主要消化酶活性研究

同种鱼不同组织 ,蛋白酶和淀粉酶最适温度相同 ,淡水白鲳、团头鲂、黄颡鱼各组织淀粉酶和蛋白酶的最适温度分别为 2 5℃、35℃、2 5℃和 4 5℃、5 0℃、5 0℃。淡水白鲳和团头鲂淀粉酶的最适pH值均为 6.4 ,黄颡鱼肝胰脏、肠、胃最适pH为 6.8、6.8、6.4。淡水白鲳和黄颡鱼蛋白酶最适pH值胃、肠、肝胰脏分别为 2 .6、8.0、10 .0和 4 .2、8.0、10 .0。团头鲂蛋白酶最适pH值肠、肝胰脏分别为 8.0、9.4。同种鱼不同组织淀粉酶均以肝胰脏活性最高 ,且三种鱼顺序为 :团头鲂 >淡水白鲳>黄颡鱼 ;同种鱼不同组织蛋白酶活性顺序为 :胃 >肠 >肝胰脏 ,三种鱼蛋白酶活性顺序为 :淡水白鲳 >黄颡鱼 >团头鲂     

添加剂对斑点叉尾鮰肠道蛋白酶活力的影响

本试验测得在饲料中添加适量甜菜碱、喹乙醇、大蒜素都能显著增强斑点叉尾鱼回肠道蛋白酶活力 ,其蛋白酶最适温度为 4 0℃ ,最适pH值为 7.2 ,酶活力由高到低依次为喹乙醇组 >大蒜素组 >甜菜碱组 >对照组 ;并且三种添加剂均能明显促进鱼体的生长 ,尤其以添加大蒜素组鱼的生长最快 ,其次为添加喹乙醇组和甜菜碱组     

催化动力学光度法测定痕量锰的研究

本文研究了在PH6.4的HAc—NaAc介质中,痕量Mn(Ⅱ)对过氧化氢氧化铬黑T褪色的新指示反应,其反应的表观活化能为63.68KJ·mol~-1,表观速率常数K=5.68×10~(-4)/S,半衰期T_(1/2)为20.32mm,该反应为一级反应。由此建立了催化动力学光度法测定痕量锰的新方法。本方法的Sandell灵敏度为4.48×10~(-7)ug/cm~2,测定范围为0～20ng/25ml。对合金钢标样和饮用水中锰的测定,结果令人满意。