高效液相色谱和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法分析天花粉蛋白胰酶肽图谱

目的:建立了检测天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)肽图谱方法。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法对天花粉蛋白的肽图谱进行了测定,比较了不同批次产品一级结构的一致性,并用MALDI-TOF-MS法进行了验证。结果:用RP-HPLC和MALDI-TOF-MS法检测天花粉蛋白胰酶裂解后的肽段,发现各批产品的一级结构具有一致性,此分析方法具有简单,灵敏度高,可靠等优点。结论:本法适应于天花粉蛋白药物的肽谱分析,同时也为分析PEG修饰天花粉蛋白药物肽图谱提供了可以借鉴定手段。     

mRuby2在原核细胞中的表达及纯化

采用PCR技术扩增mRuby2,将其插入原核表达载体p ET30a(+)中,用p ET30a(+)-mRuby2转化BL21(DE3)并诱导重组蛋白表达,用荧光显微镜及SDS-PAGE观察、检测目标蛋白的表达情况,以Ni亲和层析技术纯化重组蛋白。结果表明:构建的重组表达菌株经IPTG诱导后,发酵液颜色随诱导时间延长逐渐转为橙红,离心后的沉淀菌体为深粉红色,在荧光显微镜下,菌体发出明亮的红色荧光。SDS-PAGE检测发现,IPTG诱导5 h,重组蛋白表达量达到峰值。采用Ni螯合亲和层析技术从发酵菌体中分离出纯度大于80%的重组蛋白。由此可见:采用DNA重组技术能在原核系统中成功表达mRuby2编码的荧光蛋白,该重组蛋白亮度高、可视性好,能直观呈现实验结果,便于观察相关实验现象、理解并掌握实验原理,非常适合于生化、分子生物学实验教学。     

降钙素原的原核表达及鉴定

为了实现降钙素原(PCT)蛋白在大肠杆菌中高效表达,对PCT的编码基因序列进行优化,通过化学方法合成优化后PCT基因,并将其克隆到p ET28a(+)载体中,构建重组质粒p ET28a(+)/PCT,转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受细胞中。将IPTG作为诱导剂诱导重组蛋白的表达,利用His-tag镍柱纯化PCT重组蛋白,并对纯化后的PCT重组蛋白进行SDS-PAGE电泳分析以及Western blot鉴定。结果表明:当重组菌株的诱导条件为0.5 m M IPTG 25℃诱导12h时,PCT蛋白表达量最高。SDS-PAGE电泳显示:纯化所得PCT蛋白纯度达到了90%以上。Western blot显示:在17KD处有明显的蛋白印迹条带,与预期相符。说明成功实现了在大肠杆菌中高效表达PCT蛋白,为后续开展PCT单抗的制备以及检测方法的研究奠定了基础。     

十一类农药禁止使用

据有关部门统计,我国已颁布了5批农药安全使用标准.尚未制定标准的,应严格按产品说明提供的方法使用,我目前已禁止下列11种农药在农业上使用。(1)敌枯双:对动物有致畸作用,对人可引起皮炎。(2)二溴氯丙烷:对动物有致空变和致癌作用。对人可引起男性不育,在花生中残留。(3)三环锡、     

骨骼的粮食

氨糖5步挑选法?1.看氨糖纯度:一般而言氨糖纯度越高,意味着氨糖提取工艺越好,氨糖的品质也越好。建议大家,在挑选氨糖产品时,挑选那些纯度高于95%的产品。纯度高,才能服用方便,且1天1次,1次1片就能达到1500毫克。2.看氨糖原料:很多人不了解,其实氨糖的原料分为很多种,有深海动物里提取的,也有普通动物软骨里提取的。一般来说深海提取氨糖,品质要优于普通动物软骨提取的氨糖。(进口的一般都为深海提取的氨糖,保质期为3年)     

骨肽对成骨细胞骨形成蛋白2表达影响的实验研究

目的 研究骨肽对成骨细胞骨形成蛋白2（BMP2）表达影响.方法 体外分离培养成骨细胞,0.02mg/ml,0.08mg/ml,0.32mg/ml三个剂量浓度骨肽分别作用24小时,应用流式细胞术检测成骨细胞增殖情况.以上三个剂量浓度骨肽再分别作用成骨细胞24小时、48小时、72小时,收集细胞上清利用酶联免疫法（ELISA法）检测BMP2表达含量.结果 三个尽剂量浓度作用24小时均可引起成骨细胞增殖,并存在剂量依赖性.骨肽各浓度组在24小时、48小时均可引起BMP2表达增高,其中0.08mg/ml剂量组作用48小时效果最为显著.结论 骨肽可促进成骨细胞BMP2蛋白表达,从而发挥促进成骨细胞增殖和分化的作用.     

核黄素受体蛋白的原核融合表达

用PCR(polymerase-chain-reaction)方法从含有软体海龟编码核黄素结合蛋白(riboflavin binding protein,RfBP)基因的质粒中克隆出RfBP基因,将该基因与原核表达载体pET30a( )重组并研究了表达条件,聚丙烯酰胺凝胶(SDS)电泳表明,蛋白质的大小为35 kD,以BL21(DE3)pLysS作宿主菌,1 mmol/LIPTG(isopropyl-l-thio-β-D-galactoside)诱导4h,融合蛋白His-tag-RfBP表达量达到最大.本文研究结果可为研究核黄素受体蛋白调节植物的核黄素含量及生长发育机制奠定基础.     

鸡蛋小白兔

材料和工具: 熟鸡蛋,小刀。制作方法: 1.将熟鸡蛋的蛋壳剥光(图1)2.用小刀将鸡蛋底部切平(图2);切下的蛋白做成小兔耳朵(图3)。3.在离鸡蛋较尖的一端约2厘米处由上往下斜切小口,切口深约1.5厘米(图4)。     

HPLC在N-Fmoc-Cys(Trt)合成工艺中的定性、定量分析

本文主要是通过高效液相色谱对半胱氨酸保护氨基酸,N-Fmoc-Cys(Trt)中各杂质做出定性和定量分析,由实验结果可知:产物的纯度达到98.5%以上,其中主要杂质及其含量如下:Trt·Cl其含量为0.0520%,Trt·OH其含量为0.4931%,Cys(Trt)含量为0.1345%,Fmoc-Osu其含量为0.2330%,Fmoc2-Cys2其含量为0.1334%,Fmoc-Cys2其含量为0.1102%。在此基础上提出实验室内小样需要在反应中要严格控制原料比例,溶液的pH条件以及中间产物的纯化度。     

温度、时间和水分对配合饲料脂质酸败的影响

采用三因素二次回归正交组合设计 ,研究了温度 (6～ 4 2℃ )、时间 (3～ 57d)和水分 (9%～ 1 8% )与配合饲料 (1 0～ 2 0kg仔猪 )脂质酸败的关系。试验结果表明 :脂质水解酸败随着温度升高、时间延长和水分含量升高 ,呈极显著线性增强 (P <0 .0 1 )。水分范围 1 6%～ 1 8%配合饲料脂质氧化酸败最慢 ,随着饲料水分含量的降低 (低于 1 6% ) ,温度的升高 (6～ 4 2℃ )和时间的延长 (3～ 57d) ,脂质氧化酸败显著地增强 (P <0 .0 5)。水分含量 1 6% ,贮藏温度低于 2 0 .6℃ ,贮藏时间在 2 4 .0d内 ,饲料未产生酸败味     

心理素质教育的教育学基础

心理素质教育有其深厚的教育学基础 :(1)教育人性观是心理素质教育必须遵循的根本思想 ;(2 )心理素质教育目标的确立必须符合素质教育总体目标的要求 ;(3)心理素质教育的内容理应是学校素质教育的重要内容 ;(4)心理素质教育模式的构建必须遵循素质教育模式的规范。     

两种教育测量理论在试卷质量控制和评价中的应用及其展望

研究归纳了经典测量理论与项目反应理论的异同,通过文献检索的方法阐明项目反应理论在国外教育机构已得到普遍运用,而国内医学院校的试卷质量控制和题库建设还停留在经典测量理论阶段,需要指导理论和方法的革新。     

英国重商主义思想的分期问题

过去学术界一般都把英国重商主义思想划分为早期和晚期两个阶段，随着对18世纪上半期重商主义作品研究的深入，这种笼统的分期已经不利于深化重商主义的研究。根据英国重商主义思想的内容和演变轨迹，可以将其划分为三个时期：雏形时期、成熟时期、完善时期。     

干类中药治疗老年支气管哮喘的临床应用及机理研究

目的研究干类中药对治疗老年支气管哮喘的临床疗效及其作用机制。方法将老年支气管哮喘患者随机分为射干治疗组和常规治疗组。常规治疗组用氨茶碱片,0.1g,tid,同时加服酮替酚;射干治疗组除常规治疗外给予射干煎剂口服,30ml,每日3次,疗程均为4周。观测肺功能、外周血EOS计数和MBP、ECP含量。采集外周血,裂解红细胞后用Percoll液密度梯度离心分离收集EOS,初步培养后,以ELISA法检测射干甙对EOS释放MBP和ECP的影响。结果干类中药对支气管老年哮喘有明显疗效,可改善肺功能,减少ECP释放;射干甙明显减少EOS释放MBP和ECP。结论干类中药治疗老年支气管哮喘具有明显疗效,其作用机制在于具有抑制嗜酸性粒细胞脱颗粒的作用。     

成本收益分析方法在美国政府公共管制中的应用

成本收益分析方法在美国政府公共管制中的引入始于20世纪70年代,经历了30多年的发展,目前已经成为美国政府公共管制绩效评估的最主要方法。这一方法被看好的原因是它较少具有观念上的障碍,所以在美国政府公共管制中得到广泛推广与应用。其所形成的经验和理论,在我国政府明确提出建立"积极探索对政府项目尤其是立法项目的成本效益分析制度"的今天,可以给我们带来一些思考和启示。     

发展质量：高等教育评价的新视野

将＂发展质量＂纳入高等教育评价的范畴,既有其理论依据,也有其现实要求。高等教育发展质量的评价内容主要包括发展理念评价、发展目标评价、发展条件评价、发展规模评价、发展结构评价、发展效能评价等几个方面。在高等教育大众化的时代背景下,要构建高等教育发展质量的评价体系,主要应完善高等教育发展质量的评价主体、评价指标、评价方法,即是解决谁来评、评什么、怎么评的问题。在其实践中,要实现评价主体的多元化、评价指标的科学化、评价方法的综合化,才能得出公正合理的评价结论。     

国外教师教育的研究热点与特点探析——基于《教学与教师教育》2008至2017年载文分析

运用CiteSpace V知识图谱软件，对Web of Science数据库收录的教师教育研究权威期刊《教学与教师教育》（Teaching and Teacher Education）2008至2017年间的1 430篇研究文献进行可视化分析。研究结果表明，当前国外教师教育研究的热点主题主要包括"教师专业身份认同""教师专业发展""教师自我效能感"以及"教师教育实践变革"等4个方面。分析国外教师教育可知：在方式上，强调通过教师的自我发展来推动教育质量改善；在内容上，由"教学分离"转向"以学为本"，重视职前教师实践能力的培养；在方向上，以构建教师教育发展体系为目标，加强制度建设；在方法上，坚持问题导向，提倡多元的研究方法。     

清初在京贰臣文人社集唱酬活动探微

自顺治元年至顺治三年,在京的仕清贰臣文人群体频繁举行唱和活动,并以社集标榜,已经有了文学社团的雏形。其唱和多为抒发对明朝故国的怀恋,抒写失节的痛苦和在异族治下为官的苦闷感,抒发南人仕北的思乡之情,纾解精神苦闷的寻欢作乐。贰臣士人们在此种同病相怜的交往过程中,逐渐形成模糊的群体意识。     

基于CAT大学英语学业测试语料库建设的探讨

计算机在教学领域的广泛应用,极大地促进着外语教学与测试的研究。建立基于计算机的校本大学英语学业测试语料库,已成为改革测试模式、提高教学质量的重要组成部分。文章在探讨有关测试理论的基础上,提出了创建基于计算机适应性学业测试语料库的主要原则和实际做法,同时设计了该库的计算机适应性运行与管理系统。     

降低量热器法试验台漏热量的设计研究

本文介绍在研制第二制冷剂量热器法试验台时选用合适的制冷量作为设计参数,可降低量热器漏热量,以提高试验台测试精度。经过试验验证,理论和实际测量相符合。