应用差速离心法提纯禽脑脊髓炎病毒及电镜观察

为了建立一种有效的方法分离禽恼脊髓炎病毒（Avian Encephalomyelitis Virus．AEV），本实验通过SPF鸡胚首先来增殖AEV．将1：5倍稀释的AEV-NH937株和阴性对照磷酸缓冲赫溶液分别经卵黄囊接种于6日龄SPF鸡胚，继续孵化10d后，收集尿囊液，比较接种组和健康对照组鸡胚的大小．结果显示．健康对照组鸡胚明显大于接种组．取接种组的胚脑、消化道和胰腺，经匀浆后与同组尿囊液配成1：5的组织悬液，应用差速离心法从该组织悬液中分离纯化AEV，经纯化的AEV被磷钨酸染色后．电镜下可观察到大量AEV粒子，结果表明．差速离心法提纯禽脑脊髓炎病毒效果良好。     

蓖麻粗毒蛋白的提取及灭鼠试验

研究了从蓖麻籽和蓖麻饼粕中提取蓖麻粗毒蛋白的工艺条件，并对其进行了灭鼠试验。结果表明：这两种蓖麻粗毒蛋白杀鼠活性明显，小鼠死亡率均达100％。从对小鼠的致死速度来看，两者相差不大。这为进一步分离提纯杀鼠活性成分提供了基础，也为蓖麻作为植物源灭鼠剂的开发提供了依据。     

脲酶和谷氨酸脱氢酶的制备及有关性质的研究

本文报告了脲酶和谷氨酸脱氢酶制备的先进工艺、方法,以刀豆粉代替进口粗脲酶为原料,得到与粗脲酶收率基本相同,提纯倍数为5．93的脲酶,并简化了纸装过滤的步骤．通过正交试验获取了谷氨酸脱氢酶硫铵分级的最优条件为流铵浓度40％,除杂蛋白硫铵浓度12％,并对谷铵酸脱氢酶的有关性质进行了研究：其最适pH值为7．6,最适温度为40℃。     

H_2O_2浸种对油菜种子萌发的影响

低活力油菜种子经H2O2浸种后，其发芽率和活力指数发生改变。0．01％和0．1％H2O2可以提高油菜的发芽率和活力指数，大于3％H2O2其作用相反。H2O2可改变种子的电解质外渗率，并使种子活力指数与电解质外渗率呈极显著负相关。低活力油菜种子用H2O2浸种的最适浓度范围为0．1─0．01％。     

鹅血SOD的纯化与鉴定

新鲜鹅血经氯仿—乙醇分级分离 ,丙酮沉淀及DEAE纤维素层析的方法得到纯铜锌超氧化物歧化酶 (Cu .Zn -SOD)。每升鹅血可获得纯化的SOD总活力为 2 314 0 0U ,比活力为 7713U/mg。经聚丙烯酰胺凝胶电泳后显示出两条带。结果表明用该纯化方法得到的SOD为均一性纯酶     

生物世纪的八个福音

生物技术新药．基因治疗基因工程疫苗·植物的细胞与组织培养植物基因工程·动物基因工程·动物克隆技术分子标记辅助育种和基因克隆随着分子生物学的发展，人们在本世纪70年代初创立和发展了重组DNA技术。这一技术结合动植物细胞和组织培养、酶的固定化、现代化生物反应器和计算机技术的应用以及产品分离、纯化等技术的迅速发展，形成了现代生物技术。它包括四个方面，即基因工程。细胞工程、酶工程和发酵工程。以重组DNA为核心的现代生物技术的创立和发展为生命科学注入了新的活力，它所提供的实验方法和手段极大地促进了传统生物学科…     

农村改革最需要激发农民的活力

而今．农民自发的活力．越来越被现代化的浪潮所淹没，特别是面对工业化、城市化的大社会．分散的农民愈来愈显得无所适从。南下拥挤的火车上．众多的建筑工地里，甚至阴暗的煤矿砖窑中．经常见到农民的身影．原来的活力已经被消解!留在田园中的老人、妇女进行着无奈的耕种。在城乡二元结构的落差中．农民成为消极、被动和缺乏活力的群体。     

镝中杂质对其压缩力学性能和细观断裂特征的影响

研究了提纯后金属搞中三种杂质元素，Si、O和Ca的含量对其压缩力学性能的影响．结果表明，随着杂质Si和O含量的降低镝的压缩强度逐渐增加，其塑性也同时明显增加。而镐中所含杂质Ca对其压缩性能基本没有影响．扫描电镜下的断口观察显示，和宏观实验的结论一致，Si和O的存在会严重损害镝的塑性，其含量的减少使细观断裂特征由沿晶的脆断转变为穿晶难解理．     

从枯草芽孢杆菌中提纯SOD的几种方法比较

通过实验找出一种从枯草芽孢杆菌提纯超氧化物歧化酶的最佳方法。实验着重对从枯草芽孢杆菌中提取SOD的工艺过程进行了研究,通过对热变性法、等电点法、盐析法等几种方法的实验分析比较,找出一套操作简便,SOD总收率高的提纯工艺。实验结果表明:硫酸铵分级盐析法是三种方法之中提取出酶的活力最高的一种工艺,适用于工业化大规模的提取SOD酶。从而为寻找更简便、经济的SOD生产方法提供依据。     

抗HPV16E6全蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

为了制备特异性识别HPV16E6蛋白的单克隆抗体,为建立HPV早期诊断试剂盒提供有效试剂,通过细胞融合、间接ELISA方法筛选阳性克隆、多次亚克隆得到稳定分泌抗体的单克隆杂交瘤细胞株,体内诱生法大量制备腹水,过UNOsphere SuPrA~(TM)柱和ENrich~(TM)SEC650分子筛柱纯化,通过蛋白电泳鉴定其纯度并测定抗体浓度,并采用Western Blot法和间接免疫荧光法验证纯化后HPV16E6抗体与HPV16型阳性Caski细胞和HPV18型阳性Hela细胞特异性结合。建立了亚型为IgG2a的单克隆HPV16E6-4D4杂交瘤细胞株,两步纯化后得到纯度较高的抗体,可特异性识别HPV16型阳性的Caski细胞中的E6蛋白,不与Hela细胞反应,为在蛋白水平上检测HPV16型病毒提供了新手段。     

昆虫离体细胞质膜的提纯

利用蔗糖密度梯度的漂浮技术，把样品置于蔗糖密度梯度37％、41％、45％、48％（W／W）的最底层，在64800g条件下离心1．5h，在37％～41％蔗糖界面收集膜蛋白，其产率可达到3．975％．质膜纯度为：5’－AMPase活力提高了11倍，G－6－Pase活力降低了3倍．     

PRRSV JL／07／SW毒株GP5重组蛋白间接ELISA检测方法的建立

本研究将以纯化的重组GP5蛋白作为包被抗原,建立了诊断PRRS的间接ELISA方法。实验确定了最佳抗原包被浓度为2．30μ／mL,PRRSV阳性血清稀释度为1：100。用间接ELISA方法检测猪瘟、猪细小病毒、猪戊肝病毒阳性血清无交叉反应,证明有很好的特异性。     

浅谈职业学校政治课“自主教学三步曲”

随着新课程实施所需要的教学改革．教师的思想观念在变革——既要更新课程理念和教学思想．又要在新理念的影响下变化教学方法。但无论怎样的方式，目的都是建立一个有活力的课堂．使学生真正参与到教学．从而提高学生的各个方面能力．以适应社会的需要。那么，如何使课堂有活力、学生感兴趣？笔者认为以“自主”二字贯穿政治课始终，实现“自主教学三步曲’’即：课前自主——课上自主——课后自主。     

线粒体ATP合成酶复合体分离纯化的方法学研究与探讨(英文)

科研工作者们在过去的50年前赴后继的工作中深入研究了ATP合成酶的功能,并努力尝试解析该酶的空间结构以其能够从结构基础上对ATP合成酶的催化机理进行阐明;但蛋白的纯化工作却一直是困扰研究顺利进展的最大障碍。蛋白的纯化技术是与特定阶段科技发展及科研工作者思维模式的直接反应,因而是一门不断发展的艺术。高纯度的ATP合成酶及其亚基是研究酶结构与催化机理的基础和关键,文章综合半个世纪以来ATP合成酶研究发展,提出了一条较为完备的ATP合成酶提取与纯化的方法路线,并对F0-ATPase部分亚基c的纯化方法进行了重点介绍。     

布鲁氏菌Omp16蛋白的原核表达与鉴定

为实现布鲁氏菌Omp16蛋白在大肠杆菌中的高效表达,根据GenBank发表的Omp16(登录号为JF918760. 1)基因序列,在不改变Omp16蛋白氨基酸序列的情况下,根据大肠杆菌密码子偏好性优化基因序列,全基因合成Omp16基因,并将其克隆到pET28a(+)载体中,构建重组质粒pET28a(+)-Omp16,转化至BL21工程菌进行诱导表达,利用His-tag镍柱纯化Omp16重组蛋白,并对纯化后的重组蛋白进行鉴定。结果表明:当重组菌株pET28a (+)-Omp16/BL21(DE3)诱导条件为37℃、IPTG浓度为0. 5 mmol/L诱导6 h时,Omp16蛋白表达量最高; SDS-PAGE电泳显示经镍柱纯化后Omp16蛋白达到了电泳纯,经Western blot分析,目的蛋白具有抗原特异性,在21ku处出现阳性条带,与预期蛋白分子大小相符,因此成功在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达出布鲁氏菌Omp16重组蛋白,为后续单克隆抗体的制备和布鲁氏菌病的检测试剂的研发提供了参考。     

远见定义未来

这些年，中国公关行业不仅在社会和商业中扮演越来越重要的角色．更以其活力．进取、创新．成为文化创意产业的新亮点。风物长宜放眼量．从前瞻未来的角度．我们当下就应着眼于公关业的可持续发展     

争当岗位示范 打造活力驾校

南京市雨花台区天保驾校党支部在创先争优活动中，紧扣“争当岗位示范．打造活力驾校”主题．以“强化管理．提升服务”为目标．组织开展“党员示范岗”系列争创活动．积极打造文明驾培“名片”．为驾校发展添活力。     

构造“大党建”格局 做足“服务型”文章

今年3月上旬，江宁实行区划调整，原上坊街道并入东山街道．为东山街道的经济发展、党建工作以及社会各项事业发展注入了生机和活力。     

降钙素原的原核表达及鉴定

为了实现降钙素原(PCT)蛋白在大肠杆菌中高效表达,对PCT的编码基因序列进行优化,通过化学方法合成优化后PCT基因,并将其克隆到p ET28a(+)载体中,构建重组质粒p ET28a(+)/PCT,转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受细胞中。将IPTG作为诱导剂诱导重组蛋白的表达,利用His-tag镍柱纯化PCT重组蛋白,并对纯化后的PCT重组蛋白进行SDS-PAGE电泳分析以及Western blot鉴定。结果表明:当重组菌株的诱导条件为0.5 m M IPTG 25℃诱导12h时,PCT蛋白表达量最高。SDS-PAGE电泳显示:纯化所得PCT蛋白纯度达到了90%以上。Western blot显示:在17KD处有明显的蛋白印迹条带,与预期相符。说明成功实现了在大肠杆菌中高效表达PCT蛋白,为后续开展PCT单抗的制备以及检测方法的研究奠定了基础。     

Office 甜心很受伤

在钢筋水泥丛林构筑的写字楼．是刻板的工作、冰冷的电脑和匆忙的脚步。这时．如果有一个女孩，像啁啾的林中云雀一样，无所顾忌地展现她天性的欢乐与活力．俨然是办公室的“甜心”，使整个僵硬的空间立马柔和起来．随之化解的还有同事们脸上单调、冷漠和疲惫的表情。