盐酸贝那普利对缺氧复氧损伤培养乳鼠心肌细胞凋亡的干预作用

目的探讨盐酸贝那普利对缺氧复氧乳鼠心肌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法用原代培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,分为空白对照组（C组）、缺氧复氧损伤模型组（H/R组）、盐酸贝那普利组（B组）及缺氧复氧损伤＋盐酸贝那普利组（H/R＋B组）,流式细胞仪检测早期凋亡细胞及坏死细胞,相关软件分析。检测四组乳酸脱氢酶LDH活性、丙二醛MDA含量、超氧化物歧化酶SOD活力、肌酸激酶同功酶CKMB含量以及细胞凋亡率。结果H/R组LDH、MDA、SOD及心肌细胞凋亡率明显高于C组和B组;H/R＋B组LDH、MDA、SOD水平及心肌细胞凋亡率显著低于H/R组,以上差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论离体培养的乳鼠心肌细胞建立的缺氧复氧损伤模型可诱导心肌细胞的凋亡。盐酸贝那普利可明显抑制这种凋亡的发生,其机制可能与其参与抗氧化、清除自由基作用有关。     

厄贝沙坦对慢性心衰模型鼠B-型利钠肽、细胞因子及心肌细胞凋亡的影响

目的观察厄贝沙坦对心衰模型鼠B-型利钠肽、细胞因子及心肌细胞凋亡的变化。方法将37只SD大鼠随机分为对照组(n=12)和造模组(n=25),造模采用盐酸多柔比星诱导心力衰竭,造模成功随机分模型组和厄贝沙坦(6.75mg/Kg,1次/日)组各12只。厄贝沙坦应用4周后,观察大鼠的一般状况、死亡数、心肌组织形态学的改变、心肌细胞凋亡及细胞凋亡指数,检测B-型利钠肽(BNP)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)及白介素-6(IL-6)水平的变化。结果与对照组相比,模型组大鼠死亡数增加,心肌细胞凋亡指数明显增加,BNP、TNF-a及IL-6水平明显升高,差异显著。与模型组比,厄贝沙坦组大鼠一般状况改善明显,死亡数减少、心肌组织形态学明显改善、心肌细胞凋亡减少及细胞凋亡指数,BNP,TNF-a及IL-6水平明显降低,差异显著。结论模型组大鼠BNP,TNF-a,IL-6水平明显升高,心肌细胞凋亡增加;厄贝沙坦通过降低细胞因子水平,抑制细胞凋亡,从而延缓心力衰竭的进一步发展。     

Bcl—2蛋白家族与运动

Bcl_2家族蛋白根据其在细胞凋亡中的作用,分为抑凋亡蛋白和促凋亡蛋白,在骨骼肌细胞和心肌细胞内,Bcl-2家族成员之间形成二聚体,调节细胞是否进入凋亡程序,运动对骨骼肌细胞和心肌细胞凋亡有重要影响。     

糖尿病性心肌病患者血清sFas与外周血淋巴细胞凋亡

目的探讨细胞凋亡在糖尿病性心肌病发病过程中是否发挥作用。方法选取30例糖尿病性心肌病患者和30例体检健康的正常对照组。采用流式细胞仪测定PBMC凋亡。采用ELISA法测定血清sFas水平。结果糖尿病性心肌病组患者PBMC凋亡百分率为(31.8±6.1)%较正常对照组的(21.2±4.1)%明显增高(P0.05),血清sFas水平(6.6±1.1μg/ml)较正常对照组(3.4±0.6μg/ml)明显升高(P0.05)。糖尿病性心肌病患者PBMC凋亡百分率与血清sFas均随心衰程度的加重而升高,两者呈正相关(r=0.64)。结论心肌细胞凋亡在糖尿病性心肌病的发生、发展中发挥着作用。血清sFas有助于判断糖尿病性心肌病心衰程度。     

热休克因子研究进展

在环境温度升高．或有重金属、氧化剂存在以及致病微生物感染等不利条件下，生物共有的一种分子水平上的适应性变化是一类称之为热休克蛋白（heatshockprokein，HSP）的蛋白质家族合成显著增加，从而使细胞免受伤害得以存活。热休克因子（heatshockfactor，HSF）是热休克蛋白基因（heatshockgene．HSP）的主要调控因子。本文简要介绍了HSF的结构，HSF与热休克元件（heatshockelement．HSE）的相互作用，和HSF活性调节等方面的研究进展．     

联合应用LY294002和表柔比星对骨肉瘤细胞株MG63的研究

目的探究使用表柔比星联合磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路抑制剂LY294002对体外培养骨肉瘤细胞MG63的影响。方法以不同浓度及组合的药物处理MG63细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖状况;利用流式细胞术检测药物对MG63凋亡率;采用免疫蛋白印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3等凋亡相关蛋白表达。结果 CCK-8检测结果显示,与对照组相比表柔比星(EPI)和LY294002对MG63的生长均有抑制作用,两者联合使用的抑制作用更加显著并呈现剂量依赖性。流式细胞术的结果表明LY294002(20μM)的凋亡率为(32. 1±3)%,EPI(10μM)的凋亡率为(21. 5±2)%,两者合用于细胞后可显著引起细胞凋亡,细胞凋亡率为(65. 2±5)%(P 0. 01)。免疫蛋白印记法结果显示随着两药联用的浓度增加,活化的凋亡蛋白Cleaved PARP,Cleavedcaspase-3表达显著增加(P 0. 01)。结论LY294002可以增强表柔比星对MG63细胞的生长抑制作用并且促进其凋亡,机制可能是通过半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶依赖性的细胞凋亡途径发挥作用。     

急性力竭运动后大鼠心肌细胞AngII受体表达的时间研究

目的：通过对急性力竭运动后不同时间大鼠心肌细胞血管紧张素Ⅱ受体AT,R和AT2R的表达变化以及心肌细胞凋亡进行研究,探讨血管紧张素Ⅱ受体与运动引起的心肌细胞凋亡之间的关系,揭示运动影响心脏的分子机制．方法：SD健康大鼠40只随机分为安静组（An=10）和力竭运动组（B,n=30）,B组在运动后又分为3个亚组即0h、6h和24h处死组．运动组大鼠进行运动速度为（25±2）m／rain,跑台坡度为0。力竭运动．应用RT—PCR法测定AIFmRNA的表达,TUNEL法测试心肌细胞凋亡指数,用Westernblotting方法测试心肌细胞ATlR和AT2R表达．结果：急性力竭运动后0h、6h和24hAIFrtlRNA表达量分别为6．69（P〈0．05）、9．32（P〈0．05）和10．82倍（P〈.．001）;运动后0h、6h和24hA1分别为（17．10±3．6）％（P〈0．001）、（33．3±10．4）％（P〈0．001）和（30．7±9．2）％（P〈0．001）;运动后0h、6h和24h心肌细胞ATlR蛋白表这分别增加5．16％（P〉0．05）、30．19％（P〈0．05）和64．44％（P〈0．05）而AT2R蛋白表达分别增加2．15％（P〉0．05）、10．12％（P〉0．05）和28．30％（P〈0．05）．结论：急性力竭运动后AT,R和AT2R表达增加,24h后仍然维持较高水平的表达;运动后AIFmRNA表达增加,运动后6h表达量达最大,24h开始下降．而ATlR和AT。R可能均参与介导急性力竭运动引起心肌细胞凋亡的过程．     

D-柠檬烯对人胃癌MGC803细胞增殖和凋亡的影响

目的研究D-柠檬烯对人胃癌MGC803细胞生长抑制和凋亡的影响。方法噻唑蓝(MTT)法比色检测细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;激光共聚焦检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量和caspase- 3蛋白的表达。结果D-柠檬烯对人胃癌MGC803细胞生长抑制作用呈剂量依赖关系;流式细胞仪检测发现D-柠檬烯可引起MGC803细胞凋亡,且呈时间依赖性;激光共聚焦显微镜荧光检测发现D-柠檬烯处理的细胞内ROS明显升高(P<0.05),caspase-3蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论D-柠檬烯能够有效地抑制癌细胞的生长以及诱导凋亡。这种作用机制可能是使MGC803细胞内产生大量的活性氧。也可能与细胞内caspase-3基因的表达变化有关。     

SMND-309对缺氧缺糖诱导的SH-SY5Y神经细胞凋亡的影响

体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,利用缺氧、缺糖诱导细胞凋亡,采用SRB法测定细胞活力,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡,Western blotting测定凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax含量.结果显示SMND-309能显著抑制SH-SY5Y细胞的凋亡,降低细胞损伤程度并提高细胞活力(P<0.05或P<0.01),这与其上调胞内抗凋亡蛋白Bcl-2表达密切相关,但对促凋亡蛋白Bax的表达影响不明显.     

一种长链结构稳态哌啶氮氧自由基的性能

合成了长链结构的氮氧自由基,并通过电子自旋共振(ESR)测试证明了产物的结构。通过膨胀计试验证明了长链型稳态哌啶氮氧自由基对以A IBN为引发剂,60&#176;C下热引发的苯乙烯本体聚合有明显的阻聚作用。紫外吸收光谱测试表明该长链型氮氧自由基对引起塑料老化的,波长在230~350 nm之间的紫外光有强烈的吸收。TG测试证明该氮氧自由基有良好的热稳定性,将有可能作为一种优良的塑料光稳定剂使用。     

吡格列酮对正常MC3T3-E1成骨细胞增殖、凋亡以及功能蛋白表达的影响

目的 探讨不同浓度吡格列酮(PIO)对正常糖浓度培养下MC3T3-E1小鼠早期成骨细胞增殖、凋亡及功能蛋白分泌表达的影响.方法 体外培养MC3T3-E1细胞,分为正常对照组、不同浓度PIO干预组(5 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L、40 μmol/L),分别干预24、48 h.CCK-8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RIA法和ELISA法分别检测相关功能蛋白骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP),RT-PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、成骨因子runt相关基因2(Runx2)及骨形成蛋白-2(BMP-2)mRNA表达水平.结果 (1)与对照组比较,MC3T3-E1细胞增殖能力在5μmol/L PIO干预组增加显著(P<0.05)、在PIO大于5 μmol/L～10 μmol/L干预组则降低(P<0.05).干预时间由24 h延长至48 h,各组细胞增殖能力呈不同程度增加,但在20、40 μmol/L PIO干预的两组增加无统计学差别.(2)对照组及各PIO浓度干预干预24 h,细胞凋亡率分别为:1.97%、0.43%、13.0%、48.30%、81.00%;(3)随着PIO浓度从0～40μmol/、L范围内的增加,MC3T3-E1细胞的PPARγmRNA表达水平呈增加趋势(P<0.05);Runx2 mRNA表达量在5 μmol/L PIO浓度组时较对照组增加,在剂量较高时(PIO≥10 μmol/L)随浓度升高表达下降.(4)细胞功能蛋白ALP、OCN的分泌及BMP-2的表达在5 μmol/L PIO浓度组时最高,PIO≥10 μmol/L时,上述蛋白量逐渐下降(P<0.05);随干预时间从24～48 h延长,各PIO浓度干预组ALP以及BMP-2量增加(P<0.05),而OCN无显著改变(P>0.05).结论 PIO对正常糖浓度培养的MC3T3-E1细胞具有双向作用:低浓度促进细胞增殖,高浓度则促进凋亡.PPARγ适当激活可促使成骨细胞通过Runx2增加功能蛋白的合成;过度激活,则表现出细胞毒性.     

热老化氧化铈填充硫化天然橡胶单轴疲劳有限元研究

通过加速热老化方式在60℃、80℃、100℃下对氧化铈填充硫化天然橡胶进行了24h的热老化处理,并且对热老化后的橡胶试件进行了单轴疲劳试验.提取并采用疲劳试验结果中应变范围0-175%的单轴拉伸数据,在等效应力状态推导下获得相应的等双轴数据,利用FEA软件建立了可以有效地描述氧化铈填充硫化天然橡胶热老化后材料属性的有限元模型,根据疲劳加载条件模拟获得的应力计算结果与试验结果偏差在10%以内,为下一步的疲劳寿命预测提供可靠的数据模型支持.     

亚砷酸对肺癌细胞凋亡及LRP基因表达影响的体外研究

目的观察亚砷酸(As2O3)对人肺腺癌的诱导凋亡作用及对LRP基因表达的影响及可能机制.方法选用人肺腺癌A549细胞系,应用体外细胞培养法,流式细胞术检测As2O3对人肺腺癌的诱导凋亡作用;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测LRPmRNA的表达.结果不同浓度的As2O3均可诱导A549细胞凋亡.1.0μmol/L、2.0μmol/L的As2O3可下调LRPmRNA的表达.结论As2O3诱导肿瘤细胞凋亡作用主要是通过下调LRPmRNA表达有密切关系.     

岷当归提取物对血管性认知功能障碍模型大鼠海马Bcl-2与Bax蛋白表达的影响

目的通过对岷当归的主要有效成分的提取与分离,观察不同岷当归提取物对血管性认知功能障碍模型大鼠神经凋亡细胞Bcl-2和Bax表达的影响,探讨岷当归提取物对模型大鼠神经细胞凋亡的影响及可能的作用机制。方法采用双侧颈总动脉反复夹闭+单侧颈总动脉结扎的方法制备慢性脑低灌注大鼠血管性认知功能障碍模型。选取雄性wistar大鼠60只,随机分为假手术组(sham-operation group,S)、模型组(model group,M)、尼莫地平对照组(Nimodipine control group,N)、当归挥发油组(Volatile oil from Angelica sinensis group,V)、当归多糖组(Angelica polysaccharide group,P)、岷当归水煎剂组(Min angelicasinensis water decoction group,X)6组。除假手术组S组外其余M组、N组、V组、P组、X组各组采用反复夹闭双侧颈总动脉+硝普钠注射+单侧颈总动脉结扎的方法,制备慢性脑低灌注大鼠血管性认知功能障碍模型。S组、M组给予生理盐水灌胃,N组给予尼莫地平灌胃,V组给予当归挥发油灌胃,P组给予当归多糖灌胃,X组给予岷当归水煎剂灌胃,每日1次,连续灌胃治疗4周。灌胃结束后第1天、第4天、第5天进行行为学试验(水迷宫法)。断头处死大鼠,留取脑组织,光镜下观察HE染色病理切片,免疫组织化学方法检测Bcl-2和Bax表达,高清晰彩色病理图文分析系统定量分析。结果 Morris水迷宫试验显示:各干预组都有提高学习记忆能力的作用,尤以岷当归水煎剂组记忆力改善明显,优于尼莫地平组、当归多糖组和当归挥发油组(P0.01);尼莫地平组、当归多糖组、当归挥发油组与岷当归水煎剂组比较均能促进VCI模型大鼠Bal-2蛋白的表达、抑制VCI模型大鼠bax蛋白的表达(P0.05),尤以岷当归水煎剂组效果最佳(P0.01)。结论当归挥发油、当归多糖、岷当归水煎剂均能降低血管性认知功能障碍模型大鼠脑组织细胞凋亡基因bax的表达,增加具有神经元保护作用的bcl-2基因表达,从而抑制神经细胞凋亡,加速神经功能的恢复,共同发挥脑保护作用,但水煎剂作用更为明显,体现了各种有效成分相互协调的优势。     

凋亡通路蛋白表达对过氧化氢诱导PC12细胞凋亡的影响

目的探讨过氧化氢（H2O2）诱导PC12细胞凋亡的机制。方法 MTT测定细胞存活率,荧光染色观察细胞形态,透射电镜观察细胞的超微结构,流式细胞仪测定细胞凋亡率,Western blotting技术和流式细胞仪检测Bcl-2和Bax蛋白的表达,分光光度计测定Caspase-3释放率。结果 0.25 mM的H2O2可诱导PC12细胞凋亡,细胞的形态发生改变,细胞核受损,细胞内Bcl-2蛋白的表达降低、Bax蛋白的表达增加,Caspase-3被激活。结论 H2O2诱导了PC12细胞凋亡,其作用机制与细胞内Bcl-2、Bax蛋白的表达及Caspase-3活性密切相关。     

阿托伐他汀对2型糖尿病患者CRP的影响

目的观察阿托伐他汀治疗对糖尿病患者C反应蛋白的影响,以了解阿托伐他汀在糖尿病患者中的非调脂作用.方法30例2型糖尿病患者经阿托伐他汀治疗(10mg/d)8周,测定治疗前后C-反应蛋白(CRP),空腹血糖,胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL-C),高密度脂蛋白(HDL-C)以及血压的变化.结果治疗前后CRP及各项血脂指标均减低,有统计学意义,而且CRP水平下降与TC、LDL-C的减低之间并不存在相关性.结论在糖尿病患者使用阿托伐他汀治疗,除可明显降低血脂水平外,还可明显降低CRP水平,可能有利于减轻糖尿病患者的心脑血管并发症.     

Trpm7下调对大鼠心肌细胞游离Ca~(2+)浓度影响的研究

目的 TRPM7是心肌细胞内一种阳离子通道,对Mg~(2+)和Ca~(2+)都具有通透性。为了深入研究TRPM7基因在心肌细胞的功能,本试验试图研究下调TRPM7后大鼠心肌细胞内Ca~(2+)浓度的变化。方法大鼠心肌细胞的原代培养,心肌细胞存活度的测定,小干扰RNA(siRNA)技术,大鼠心肌细胞胞内游离Ca~(2+)荧光强度的检测。结果经过胞内游离Ca~(2+)荧光强度的检测发现下调TRPM7后大鼠心肌细胞内Ca~(2+)浓度无显著变化。结论调TRPM7后对心肌细胞钙的代谢没有显著影响。     

白藜芦醇逆转过氧化氢引起的心肌细胞损伤研究

目的研究白藜芦醇是否能够逆转过氧化氢(H_2O_2)引起的心肌细胞损伤。方法培养心肌H9C2细胞,应用不同浓度过氧化氢(100μM、200μM、300μM、400μM)构建细胞损伤模型,并用25μM、50μM、100μM白藜芦醇处理损伤的心肌细胞,6小时后进行后续实验。应用MTT检测细胞活性;应用实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测凋亡相关基因Bax、BCl_2的表达情况;应用乳酸脱氢酶(LDH)含量检测试剂盒检测上清中LDH水平;应用丙二醛(MDA)含量检测试剂盒检测MDA水平;应用超氧化物歧化酶(SOD)含量检测试剂盒检测SOD水平。结果不同浓度过氧化氢降低心肌细胞活性,其中400μM最显著;此外,25μM、50μM、100μM白藜芦醇能够提高H_2O_2引起的心肌细胞活性降低;PCR实验结果表明,25μM、50μM、100μM白藜芦醇能够逆转H_2O_2引起的Bax基因表达上调,而逆转H_2O_2引起的BCl_2基因表达下调;试剂盒检测实验结果表明,25μM、50μM、100μM白藜芦醇能够逆转H_2O_2引起的心肌细胞分泌LDH、MDA,而提高H_2O_2引起的心肌细胞分泌SOD减少。结论白藜芦醇能够逆转过氧化氢引起的心肌细胞损伤。     

鼠尾藻提取液对米氏凯伦藻的克生作用研究

为分析鼠尾藻中有效的克生物质(allelochemicals),通过生态学方法,研究不同浓度的鼠尾藻提取液(蒸馏水及3种有机溶剂甲醇、甲苯、正己烷)对赤潮微藻—米氏凯伦藻的生长抑制作用.结果表明,甲醇和蒸馏水提取液与对照组相比能显著抑制米氏凯伦藻的生长(P0.05),其中甲醇提取液的抑藻作用最强且其EC50值为25mg·L-1;正己烷和甲苯对米氏凯伦藻生长无明显影响.通过实验分析鼠尾藻水提液对米氏凯伦藻叶绿素荧光特性指标(叶绿素含量、Fv/Fm)及生理生化指标(可溶性蛋白含量、丙二醛含量)的影响,表明鼠尾藻水提液对米氏凯伦藻的叶绿素含量及Fv/Fm值无显著影响,对蛋白质含量影响显著(P0.05),丙二醛(malondine,MDA)含量与对照组相比升高极显著(P0.01),在培养的第12天丙二醛含量为对照组的163.91%.结果表明,鼠尾藻组织中有效的克生物质应为具较高极性的有机化合物.     

氯化聚氯乙烯(CPVC)的制备及性能研究

分别利用SG-3、SG-5、SG-8三种原料聚氯乙烯(PVC)进行后氯化,得到氯含量由低到高氯化聚氯乙烯(CPVC)产品。通过考察氯化实验中原料、温度、压力、反应时间对反应的影响,筛选出最佳反应条件;同时对产品的增塑剂吸收量、粘数、粒径、表观密度、表观形貌(SEM)、X射线光电子谱(XPS)及热重(TG)各项重要性能做了检测,并对结果进行了分析。研究结果表明:制得的CPVC树脂具有良好的性质。