应用QIAamp DNA Investgator Kit试剂盒提取牙齿DNA

目的:应用QIAamp DNA Investgator Kit试剂盒提取牙齿DNA,并评价其应用价值。方法:实验室日常受理的12例牙齿,分别采用有关文献方法和QIAamp DNA Investgator Kit试剂盒提取牙齿DNA。结果:12例牙齿采用两种方法检出结果一致,但是QIAamp DNA Investgator Kit试剂盒提取牙齿DNA过程较简单,时间短。结论:QIAamp DNA Investgator Kit试剂盒可以应用于牙齿DNA提取,减少实验人员工作量。     

M48磁珠法提取脱落细胞DNA的改良方法

目的:对M48磁珠法提取脱落细胞DNA进行改良。方法:在常规M48磁珠法基础上省略MW1试剂及一次酒精的洗涤步骤,同时利用磁力架快速倾倒溶液法及吸瓶加液法减少提取时间。结果:采用两种方法提取DNA,在STR检验成功数及图谱上没有明显差异,但用改良的M48磁珠法提取时间少于常规的M48磁珠法。结论:采用改良的M48磁珠法提取纯化DNA,可以缩短提取时间,并能保证提取质量。     

陈旧性血迹的DNA检验

该文利用Chelex-100法和M48磁珠提取法分别提取陈旧性血迹,比较发现,M48磁珠提取法更适用于陈旧性血迹的DNA检验。     

光滑载体上人体脱落细胞的DNA检验

目的:对运用EZ1磁珠法和QIAquick@Spin Columns硅膜法提取光滑载体上人体脱落细胞DNA的检验效果进行比较,为优化提取方法提供参考。方法:选取案件受理检材33例,应用二步棉签擦拭法收集各类光滑载体上的微量脱落细胞DNA,采用EZ1磁珠法和QIAquick@Spin Columns硅膜法提取纯化后,进行常规STR检测。结果:光滑载体上人体脱落细胞DNA材采用2种方法提取DNA,所得结果有较大差异;采用QIAquick@Spin Columns硅膜法提取的效果明显优于EZ1磁珠法。结论:相对而言,QIAquick@Spin Columns硅膜法更具优势。     

直接扩增法提取脱落细胞DNA

随着社会的发展,法医DNA检验的检材除了常见的血痕、精斑、唾液斑外,越来越呈现出微量化的趋势,比如盗窃案件中常常遗留的汗潜指纹、工具、手套等。这些现场的生物学检材,大多需要进行纯化提取,提取过程耗时、繁琐并伴有DNA模板的损失,特别对于微量检材,往往得不到STR分型。该文采用直接扩增法来检验,并同时采用M48核酸纯化试剂盒进行平行对比提取,结果表明直接扩增法对于微量检材的提取具有很好的效果。     

改良的差异裂解法提取混合斑中精子DNA

目的:采用改良的差异裂解法提取混合斑中精子DNA,并评价其应用价值。方法:对实验室日常受理的34例混合斑检材,分别采用改良的差异裂解法与常规差异裂解法提取其精子DNA。结果:34例混合斑检材采用两种方法的检出结果基本一致,但是改良的差异裂解法相比常规差异裂解法在时间上缩短一半。结论:改良的差异裂解法能较快提取混合斑中精子DNA,并能保证检验结果。     

激光捕获显微切割结合低体积扩增技术研究

目的:研究激光捕获显微切割技术联合应用低体积扩增技术,建立一套微量混合样本DNA的检验方法。方法:使用PALM系统切割捕获目标细胞,弹射到低体积扩增玻片的反应位点上,消化细胞,提取DNA,使用Identifiler?试剂盒在1.5μL体系中进行PCR扩增。结果:分别捕获10个口腔上皮细胞、20个精子细胞,成功获得16个完整的STR基因座分型谱带。结论:激光捕获显微切割技术联合应用低体积扩增技术适用于法医学中微量混合样本DNA检验。     

三种新鲜长骨DNA提取方法的比较

目的:研究对新鲜长骨DNA的快速高效提取。方法:采用Chelex-100法、核酸提取仪法、改良法提取肋软骨和新鲜长骨的DNA,对检测所得STR数据进行统计分析。结果:改良法对肋软骨和新鲜长骨样本的检出率均是100%。结论:改良法能快速高效地获得新鲜长骨DNA。     

利用mRNA分析技术鉴别血液与精液研究

目的:探讨鉴别血液与精液的一种新方法。方法:采集月经血、外周血和精液样本,试剂盒提取样本RNA,反转录试剂盒反转录后得到c DNA,利用挑选的引物进行PCR扩增,检测若干个特定基因m RNA的表达情况。结果:发现月经血中可以同时检测到HBB与MMP11基因m RNA;而在外周血中只检测到HBB基因m RNA;在精液中可以同时检测到TGM4、PRM2基因m RNA。结论:检测MMP11、TGM4、PRM2基因m RNA表达可用于鉴别外周血、月经血和精液。     

Identifiler与Identifiler Plus扩增试剂盒检验结果的比较

该文通过对Identifiler与Identifiler Plus扩增试剂盒对于含有PCR抑制物、DNA降解检材样本扩增结果的比较,结果表明:Identifiler Plus扩增试剂盒相比于Identifiler具有更好的抗PCR抑制物作用,对于低模板降解DNA样本具有更高的灵敏度。     

充分挖掘低拷贝检材在案件侦破中的价值

低拷贝检材常无法进行针对性提取,得到理想分型的难度较大。该文分别采用增加循环数、细胞富集、低模板试剂盒扩增等方法,提高该类检材的检出率。联合应用新技术、新方法,正确应用低拷贝检材检验结果,可提高低拷贝检材在案件侦破中的应用价值。     

男性Amelogenin基因异常分析

目的:探讨男性个体牙釉质蛋白基因(Amelogenin)异常时的性别判定。方法:利用chelex-100法提取男性个体血样,分别用Ampf STR Identifile、PowerPlex?16 HS、Goldeneyetm 20A和Ampf STRYfiler Kit试剂盒扩增,AB3130xl基因荧光分析仪进行检测。结果:Amelogenin基因分型为X,Ampf STR Yfiler Kit试剂盒扩增检测获得了Y-STR分型。结论:男性Amelogenin基因异常时需用其它方法判定性别。     

KingFisher核酸提取仪在疑难检材中的应用

目的:探讨King Fisher核酸提取仪的应用价值。方法:通过对不同检材的提取纯化,对比King Fisher核酸提取仪和4种提取纯化方法的提取效果。结果:King Fisher具有高效的纯化效果。     

解胶剂对脱落细胞粘取器DNA检验的影响

目的:探讨折叠粘膜对粘膜DNA检验、解胶剂对折叠状粘膜的DNA检验的影响。方法:使用常规Chelex100法,分别提取伸展状、折叠状粘膜、加入解胶剂的折叠状粘膜。结果:组间两两比较,伸展组与折叠组、H解胶剂组与折叠组、D解胶剂组之间有显著差异;而从组间的平均峰面积看,H解胶剂组>伸展组>折叠组。结论:过分折叠对粘取器粘膜的DNA检验不利,溶解效果较强的解胶剂能更充分地释放被粘附的脱落细胞,Chelex100法结合滤膜离心套管,能有效避免无机提取溶液消化粘胶乳化的影响。     

恶性疟原虫/间日疟原虫胶体金法快速检测试剂盒稳定性及特异性评估方法研究

为评价自制恶性疟原虫/间日疟原虫胶体金法快速检测试剂盒的稳定性及特异性,采用自制试剂盒与市售试剂盒对全血参考品进行分析性能评估、交叉干扰物的影响评估、稳定性评估及临床应用效果评估实验。结果显示,自制试剂盒具有较好的检测性能、对不同干扰物的检测未出现交叉反应影响,自制试剂盒具有较好的实时稳定性,自制试剂盒与市售试剂盒具有同样的临床效果。     

MSCT对于肺栓塞的诊断价值

目的:探讨MSCT诊断肺栓塞的检查方法、技巧及临床应用价值。方法:回顾分析21例肺栓塞患者的MSCT图像。21例患者均经肘静脉注入造影剂,延迟约20秒,从肺尖到膈下行MSCT扫描,图像传至ADW 4.2工作站行MPR、M IP、VR重建。结果:21例患者肺动脉充盈良好,血栓表现为部分或完全腔内充盈缺损。对PE的显示MPR效果更佳。结论:MSCT是肺栓塞安全、有效、无创伤的诊断方法,对肺栓塞的治疗及预后有非常重要的作用。     

VEGF基因多态性与2型糖尿病视网膜病变的相关性

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)基因启动子rs699947(-2578C/A)多态性与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性。方法:提取161例并发DR的2型糖尿病患者(病例组)和213例未并发DR的2型糖尿病患者(对照组)的DNA,PCR反应扩增含rs699947(-2578C/A)位点的DNA片段,限制性内切酶Bgl II酶切,测定rs699947(-2578C/A)基因多态性。结果:糖尿病视网膜病变组VEGF rs699947(-2578C/A)基因AA型基因频率高于对照组,CC基因型明显低于对照组。糖尿病视网膜病变危险因素的多元逐步Logistic回归分析显示,血糖、高血压、高血脂是糖尿病的独立危险因素,携带VEGFrs699947 AA基因型的2型糖尿病患者发生DR的危险性明显增高。结论:VEGF基因启动子-2578C/A多态性与DR病有关,携带AA基因型的2型糖尿病患者发生DR的危险性较高。     

指甲内侧DNA检验成功率影响因素探讨

人体指甲接触其他个体时,指甲内侧会留下少量的其他个体DNA,对它的检验是当代案件侦破的热点。在不同情况下,指甲内侧DNA检验的成功率差异较大。影响指甲内侧DNA检验成功率的主要因素有个体差异、案件性质和案件发展过程、检材的前处理、检材提取是否正确以及能否正确判读分型结果等,该文详细综述了指甲内侧DNA检验成功率的影响因素。     

Nd:YAG激光仪治疗太田痣1341例的临床体会

探讨多波长激光仪治疗太田痣的疗效。方法 :我院应用多波长激光仪对 1341例太田痣患者进行皮损区的多次照射治疗。治疗间期 3月 - 6月 ,对患者治疗次数、年龄、颜色以及不良反应等进行了分级别观察研究。结果 :年龄小 ,皮损颜色浅者 ,随治疗次数增加疗效越显著 ,1341例患者经过 1～ 7次左右的治疗 ,痊愈 96 6例 ,显效 2 4 0例 ,有效 6 7例 ,无效 6 8例 ,总显效率 90 % ,总有效率 95 % ,96 6例痊愈患者平均治疗次数为 5 .74次 ,其中小于 6岁儿童为 4 .2 5次 ,一般治疗 5次左右可以治愈 ,无遗留瘢痕。结论 :多波长激光仪治疗太田痣安全有效。     

樟脑类化学品的检验与研究

目的:检验检材中的樟脑类化学品成分,研究樟脑类化学品定性分析方法。方法:采用乙酸乙酯溶液分别提取检材奶粉和井水中的樟脑类化学品,建立GC/MS分析方法检验其樟脑类化学品成分。结果:检材奶粉中检出樟脑成分,检材井水中检出龙脑成分。结论:采用乙酸乙酯溶液能提取检材中的樟脑类化学品,建立的GC/MS分析方法可有效对樟脑类化学品进行定性分析。通过报道此类案件,提醒技术人员注意生活常用低毒化学品及临床药物等作为。