禽流感及其对经济的影响

人们对禽流感(Avian Influenza)的研究已有100多年的历史,全世界已经历了12次大流行,范围波及许多国家和地区。禽流感病毒有多种亚型,迄今已初步测得H5N1、H7N1、H7N7等高致性禽流感毒株的基因序列。全球已报道至少183起高致病性禽流感发病,其中H5N1亚型引起的禽流感发病率和死亡率都较高,危害巨大。禽流感病毒的肆虐给全球经济造成了至少150亿美元的损失,也不可避免地给我国经济造成了至少600亿人民币的损失,禽流感疫情的继续和蔓延,使得世界经济前景不容乐观。通过对历史上发生的禽流感、病原体亚型及造成的经济损失等进行了回顾和统计分析,并初步探讨了对我国经济的影响。     

美批准H5N1型禽流感病毒快速检测技术

美国食品和药品管理局日前批准使用一种H5N1型禽流感病毒快速检测技术,用这种技术可以在40分钟内检测出人是否感染了H5N1型禽流感病毒。该局发表新闻公报说,这一技术由加利福尼亚州一家公司开发,其原理是通过判断被检测者体内     

两株野生型枯草杆菌α-淀粉酶基因的克隆和测序

从土壤中筛选得到两株产α-淀粉酶的枯草杆菌QSH4株和SHX6株.根据枯草杆菌168株的淀粉酶基因设计引物,对QSH4、SHX6株的α-淀粉酶基因进行了克隆及测序.结果表明两株菌的α-淀粉酶基因碱基数目相等,均为1948bp.两者的碱基序列具有99.90%的同源性.QSH4株和SHX6株的α-淀粉酶基因碱基均较168株酶基因缺失了35 bp(靠近3'-端),另有28个位点的碱基不同,与枯草杆菌168株α-淀粉酶基因之间有96.97%的同源性.由淀粉酶基因测序结果推测QSH4株和SHX6株的α-淀粉酶蛋白由477个氨基酸组成.与168株的α-淀粉酶蛋白(660个氨基酸)相差183个氨基酸.由此推断酶活性中心可能位于酶分子的N-端的3/4肽段.     

基于动力学评估病毒变异对广东省H7N9禽流感的影响

H7N9禽流感病毒的传播不仅会对家禽养殖业造成巨大损失,还严重威胁人类健康。在第5波疫情中,全国新增确诊人感染H7N9禽流感确诊病例暴发峰值高,确诊病例主要发生在长三角和珠三角地区。为评估第5波疫情中病毒变异对该病毒传播的影响,以广东省为研究区域,人和禽为研究对象,依据H7N9禽流感病毒的传播机理以及温度对病毒存活力的影响,建立了非自治H7N9禽流感传播动力学模型。利用最小二乘法分别对广东省2013年10月—2016年9月、2016年10月—2017年9月每月新增确诊人感染H7N9禽流感病例数进行数据拟合、参数估计,定量比较病毒变异前后环境传染系数的变化。此外,通过参数敏感性分析可知降低禽类的补充率、缩短禽类的销售时间、加强环境的清洁以及禽类因病死亡的出现可使疾病得到控制。     

禽脑脊髓炎病毒内蒙分离株外壳蛋白VP1基因在大肠杆菌中的融合表达及活性分析

为研制禽脑脊髓炎病毒(avian encephalomyelitis virus,AEV)亚单位疫苗,对AEV-NH937内蒙分离株外壳蛋白VP1基因进行融合表达、纯化及活性分析.根据AEV-NH937基因组全序列,设计一对引物.利用RT-PCR技术,扩增AEV的外壳蛋白VP1基因.经序列分析,VP1基因编码区为810bp,编码270个氨基酸残基.将VP1基因插入载体pGEX-4T1构建表达重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21.经IPTG诱导后,用聚丙稀酰氨凝胶电泳分析,结果表明,有融合蛋白表达,其分子量为56KD.纯化后,利用ELISA检测分析VP1蛋白,证明VP1蛋白有一定的抗原活性.     

一株PEDV广东流行株S1基因遗传进化分析及其在昆虫细胞中的表达纯化

为了解猪流行性腹泻病毒广东流行株的S1基因流行变异情况,制备相应的诊断试剂,试验采用RT-PCR从猪流行性腹泻疑似发病仔猪的肠道内容物中扩增获得S1基因,利用生物信息学软件构建S1基因的遗传进化树.将S1基因克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBac1,转化至DH10Bac感受态细胞中,经抗生素筛选重组杆粒,把重组杆粒转染到昆虫细胞Sf9,盲传3代后进行间接免疫荧光试验和Western blot鉴定.结果表明：该猪流行性腹泻病毒广东流行株分布于GII-b分支,与国内猪流行性腹泻病毒分离株（HN-HB1-2018、HBHA2015）的核苷酸相似性为98.0%～98.3%,而与猪流行性腹泻病毒经典毒株CV777、DR13的核苷酸相似性仅为89.9%～90.0%.且S1重组蛋白可在昆虫细胞Sf9中以细胞培养分泌上清的形式表达.本研究可为猪流行性腹泻病毒的流行现状研究提供参考,以及后续猪流行性腹泻病毒诊断制品的研发提供前期基础.     

禽流感H9N2病毒样颗粒疫苗佐剂的筛选及其对鸡的免疫效果评价

为使禽流感H9N2病毒样颗粒疫苗尽早投入市场,有效防控H9N2禽流感的流行,拟从油乳、ISA 206和微球佐剂中筛选出一种最适用于禽流感H9N2病毒样颗粒疫苗的佐剂。首先对H9N2病毒样颗粒血凝效价及血凝素(HA)含量的测定,然后制备出禽流感H9N2病毒样颗粒油乳疫苗、ISA 206佐剂疫苗、微球疫苗,并对其稳定性、无菌性和安全性等进行检验。通过溶菌酶含量、血凝抑制试验以及T淋巴细胞刺激指数等试验检测其非特异性免疫和特异性免疫水平。结果表明:微球VLP疫苗组溶菌酶含量高于其他各疫苗组(p﹤0.01),能引起非特异性免疫;微球VLPs(口服)疫苗组的血凝抑制滴度高于其他各疫苗组(p﹤0.01),抗体增长趋势与阳性对照组无显著差异(p0.05),产生了有效的体液免疫应答;微球VLP疫苗(口服)疫苗组T淋巴细胞刺激指数最高。微球口服疫苗其免疫原性强,安全稳定,能诱导机体产生有效的免疫应答,可为新型病毒样颗粒疫苗佐剂的选择提供参考。     

不同方法制备鸡传染性支气管炎病毒血凝抗原的研究

本文对传染性支气管炎病毒(IBV)澳大利亚T株、M_(41)株、K_(9301)株、K_(9302)株、K_(9401)株、H_(52)株,经不同浓度的胰酶和家兔A型魏氏梭菌培养液处理,对其血凝特性进行了系统的研究。结果表明IBV供试毒株经1. 5％胰酶处理后,能凝集鸡的红细胞,不同毒株对鸡红细胞的血凝价有差异,但均能被其特异性的抗血清所抑制,而不能被抗新城疫病毒、减蛋综合症病毒及禽流感病毒的阳性血清所抑制。处理后的IBV抗原对鸡红细胞的血凝以37℃、0. 1M pH5.9一8.4 PBS液(含1—2％NaCl)为宜,对稀释液种类无严格要求。家兔A型魏氏梭菌培养液处理抗原与胰酶处理抗原比较,结果其血凝滴度较胰酶处理抗原明显偏低。浓缩抗原与未浓缩抗原无显著差异。     

吉林一养殖户起诉国家卫计委

H7N9？ H7N9病毒？还是H7N9禽流感？自2013年3月,新型重配H7N9病毒首次在国内出现以来,关于该病毒的说法和解释可以说是五花八门、不绝于耳：官方有说法、专家有疑问、民间还有流言,但是不管怎么说,大多数人还是将“H7N9病毒”与“禽类”联系了起来,因为不管是官方、专家,还是普通百姓都把该病毒称为“H7N9禽流感”.这也导致不少消费者闻鸡色变,据而远之.那对于大多数人来说,怎么称呼H7N9似乎并不要紧,因为只要不吃禽肉就好了.但是,在养禽企业看来,“禽流感”的叫法正给他们带来灭顶之灾.     

人类SSX基因族简介

人类的SSX基因家族包括5个成员:SSXl,SSX2,SSX3,SSX4和SSX5,它们都位于X染色体上.这5个基因有很高的序列同源性:碱基序列有88%-95%同源;所编码188个氨基酸残基构成的蛋白质有77%-91%同源.它们所编码的蛋白质中含有KRAB(Kruppel associated box).SSX蛋白质也是癌/睾丸抗原(CT:Cencer/testis antingns)中的成员.研究SSX基因结构、基因表达等对于肿瘤免疫疗法的建立具有重要意义.     

大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)RPS24基因cDNA克隆及序列分析

本研究运用RT-PCR技术,首次从大熊猫(Ailuropoda melanoleuca)的肌肉组织总RNA中成功克隆了RPS24(Ribosomal Protein S24)基因的表达序列,并对其进行了测序及初步分析.结果表明:大熊猫RPS 24基因的表达序列全长为431bp,开放阅读框(ORF)为399bp,编码132个氨基酸的蛋白质,该蛋白的分子量为15.3251kD,pI为10.92,含有7种类型共14个功能位点:即1个N-糖基化位点、2个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、6个蛋白激酶C磷酸化位点、1个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、3个N-酰基化位点、1个酰胺化位点及1个RPS 24e sig-nature.进一步分析发现,大熊猫RPS 24基因与已报道的人、牛、苏门答腊猩猩、褐家鼠和小家鼠5个哺乳动物物种的表达序列及其编码的氨基酸序列具有很高的相似性:编码序列同源性分别为94.1%、92.4%、94.7%、89.9%和90.4%;与人RPS 24蛋白的氨基酸序列同源性为98.48%,其余均为99.24%.     

抗击禽流感之战

2005年10月,在欧洲禽类身上发 现了高致病性禽流感H5N1病毒。迄今 只在几个疑似病例中发现了人际传播, 由于治愈率很低,全世界的卫生官员 们都在焦急地关注着病毒的传播,并 准备应对最坏局面的出现。     

人患禽流感后会有哪些症状

禽流感是禽流行感冒的简称。禽流感分为高致病性禽流感、低致病性禽流感和无致病性禽流感。最近国内外由H5N1血清型引起的禽流感称高致病性禽流感，发病率和死亡率都很高。     

杆状病毒核心基因ac78的克隆、表达与活性研究

杆状病毒核心基因ac78在杆状病毒的生活周期中具有重要作用。生物信息学分析发现,Ac78与斯氏假单胞菌的细胞色素C氧化酶cbb3-型亚基III具有一定的序列一致性,表明Ac78可能具有氧化酶活性,并在氧化还原反应中具有一定功能。用PCR的方法成功扩增得到ac78基因,该基因序列与GenBank上的苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV) ac78基因的核苷酸同源性100%,将其克隆至原核表达载体p QE30,构建了ac78基因原核表达质粒,转化大肠杆菌M15[pREP4],在1 mmol/L IPTG和低温诱导下超量表达了可溶性的目的蛋白。使用Ni-NTA Resin蛋白纯化树脂获得了较纯的含有6×His接头的Ac78蛋白,使用纯化细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒测定其细胞色素C氧化酶活性,结果为阴性,表明Ac78可能不具有细胞色素C氧化酶活性。上述研究结果为深入探究Ac78的作用机理打下了坚实的基础。     

中国H5N1禽流感病毒传播的动力学研究

H5N1高致病禽流感在禽类中的广泛流行,不仅对家禽养殖业造成巨大的损失,而且严重威胁人类健康。以禽养殖与销售场所、养殖业相关人员、普通人群为研究对象,既考虑禽养殖与销售场所对人的感染,又考虑养殖业相关人员对禽养殖与销售场所的感染,建立基于场群的中国H5N1禽流感场群间传播动力学模型。首先,利用稳定性理论对模型进行了性态分析;再结合中国禽类结构、禽养殖与销售场所数以及感染情况,利用数值方法,计算出中国H5N1禽流感病毒传播的基本再生数R_0,利用数值模拟对R_0进行敏感性分析,从而定量评估防控措施的防控效果。     

基因组中的基因家族

在人及高等有机体基因组中,有许多基因家族。有的基因家族成员多,有的基因家族成员少;有的基因家族成员功能相似,有的基因家族成员功能各异。所谓多基因家族是指一类具有序列同源性及相似功能的基因;而基因超家族是指一类具有序列同源性而不具相似功能的基因。如果一类蛋白或基因具有共同起源的一个结构域,就属于一个基因超家族,同一个基因可归属于两个或多个基因超家族。     

兜兰二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因的克隆及其表达特性

克隆同色兜兰二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因DFR,分析其序列特征,了解其在不同组织部位的表达情况.采用RT-PCR和RACE技术从花中克隆DFR的全长cDNA,用生物信息学方法分析序列特征,并用半定量RT-PCR研究其在不同组织的表达.分离到DFR,该cDNA全长1267bp,具有1个1074 bp的完整开放阅读框,编码357个氨基酸.序列分析表明,该DFR蛋白含有1个NADB_Rossmann superfamily保守结构域,1个NADP(H)结合域和1个底物特异性结合域,其与文心兰、石斛兰和大花蕙兰等的DFR同源性在75％～80％.系统进化树显示,该DFR蛋白与兰科植物的DFR蛋白亲缘关系比较近.半定量RT-PCR表明,该DFR在成熟花和营养叶中的表达量最高,在子房、苞叶、萼片和花瓣中的表达量相当,在唇瓣中的表达量次之,在蕊柱中的表达量较唇瓣中的低,在花茎中的表达量最低,在根中几乎检测不到.原核表达结果表明,该DFR在大肠杆菌中获得表达.从兜兰中克隆到花色代谢途径中的关键酶基因DFR,该基因可能参与调控花色素的合成.     

科技部:7个月内完成H7N9预防性疫苗研制

中国科学技术部4月10日晚向媒体发布消息说,该部会同国家卫生和计划生育委员会已启动人感染H7N9禽流感科技应急防控研究项目,重点推进临床诊断试剂开发、疫苗研制等工作,预计在两个月内完成核酸诊断试剂的临床验证,7个月内完成人感染H7N9禽流感预防性疫苗研制。新启动的人感染H7N9禽流感科技应急防控研究     

姜荷花叶绿素降解酶基因PAO的分离及特征

姜荷花是国内新兴的一种热带花卉,其不育苞片尖端带有由叶绿素形成的绿色沉着,严重影响观赏效果.获得叶绿素降解关键酶基因信息有利于后期通过分子育种手段来改良苞片的颜色.为了获得叶绿素降解的关键酶基因PAO信息,本试验在前期通过姜荷花全长转录组测序获得大量转录组信息的基础上,进行筛选分析,获得了2条PAO基因,分别命名为PAO1和PAO2.PAO1基因(Gen Bank:MT077180),c DNA序列全长1 794 bp,开放阅读框1 611 bp(10 bp～1 620 bp),编码一条536AA的氨基酸序列.PAO2基因(Gen Bank:MT077181),c DNA序列全长1 843 bp,开放阅读框1 611 bp (10 bp～1 620 bp),编码一条536AA的氨基酸序列.PAO1和PAO2的氨基酸序列,仅存在4个氨基酸残基的差异.采用Blast,Translate tool(Ex PASy),Clustal Omega,Find Conserved Domains(NCBI),ProtParam,TMHMM Server,SOPMA,SWISS-MODEL,Clustal X(1.81),MEGA4.1等预测和分析了这2个基因编码蛋白氨基酸的一级结构(包括氨基酸序列的组成、保守区、理化特征等)、二级结构、三级结构及分子系统进化关系.PAO1和PAO2的核苷酸与蛋白氨基酸序列与其他物种的PAO基因都具有很高的同源性,两者都包含PLN02518的保守区.分子系统进化分析表明,姜荷花的PAO1和PAO2组成的小类,与小果野芭蕉PAO(XP_009398041.1)的亲缘关系最为接近,然后与禾本科植物的PAO聚为一大类.本研究为后期通过分子手段改良姜荷花不育苞片的颜色提供基础,并为进一步丰富和探索叶绿素降解代谢理论提供铺垫.     

甘蓝多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白BoPGIP基因的克隆及序列分析

PGIP是一种特异性结合和抑制真菌内切PG活性的细胞壁结合蛋白,在植物分子抗病育种中占有十分重要的地位.甘蓝PGIP基因的克隆和序列分析,将为进一步通过转基因技术培育抗病甘蓝新品种奠定基础.本研究通过同源序列克隆法,根据GenBank已登录的青花菜BoPGIP1(Accession:JF325875)基因全长序列设计基因特异性引物,利用PCR扩增技术从甘蓝中克隆基因,利用生物信息学的方法对其编码蛋白的结构和功能进行了预测.将获得的PGIP基因命名为BoPGIP.该基因DNA全长为1065bp,包含1个内含子和2个外显子.外显子全长975 bp,编码342个氨基酸,分子量为36.2 kD,等电点是6.26.该基因属于PGIP基因家族,具有典型的LRR结构域;功能位点分析显示编码蛋白序列中包括4个N-糖基化位点(65～68,106～109,130～133,254～257),1个蛋白激酶C磷酸化位点(189～191),5个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点(73～76,78～81,151～154,182～185,304～307)和4个N-豆蔻酰化位点(157～162,188～193,236～241,273～278);N末端具有一明显跨膜区域和一个典型信号肽序列;二级结构中包含31.79％helix,13.89sheet和54.32％loop,二级结构以无规则卷曲为主.通过对所克隆的甘蓝BoPGIP基因分析可知,该基因属于PGIP基因家族的新成员,基因的克隆及序列分析为进一步验证甘蓝BoPGIP的功能奠定了基础.