从海鱼加工下脚料中提取核酸的试验(Ⅱ)——从鱼白中提取核酸及产物纯度分析和组分鉴定

对地产海鱼加工下脚料之一--鱼白中核酸的提取方法、产品纯度测定和组分鉴定方法进行了一些探索.结果显示,DNA粗产物得率为4.62%,DNA质量分数为4.77%.RNA粗产物得率为1.98%,RNA质量分数为4.06%,提取方法基本可行.     

结核病核酸疫苗纯化过程的初步研究

对结核病核酸疫苗的质粒DNA的制备性纯化过程进行了初步研究。此工艺主要包括以简化的碱裂解法处理大肠杆菌、超滤与离心法除大部分杂质并浓缩样品、Q-Sepharose阴离子交换层析、DNA B ioSepharTMFF亲和层析等步骤,以去除细胞RNA和蛋白等杂质,并对不同分子结构的质粒DNA作分离。结果表明:以碱裂液中质粒DNA为计算基准的得率为56.61%、超螺旋质粒DNA的电泳纯度100%。     

HCGβ抗肿瘤核酸疫苗的纯化工艺

对HCGβ抗肿瘤核酸疫苗的预处理和层析纯化工艺进行了研究。用碱裂解法对湿菌体进行预处理,当菌体湿重(g)∶悬浮液体积(mL)∶裂解液体积(mL)∶中和液体积(mL)为1∶2∶2∶2,碱裂解时间为8~12 min时,质粒的产量最高,可达32.94 mg/g。用Sepharose 6 FF凝胶过滤层析去除RNA和蛋白质,再用Plasmidselect亲和层析捕获超螺旋质粒DNA,质粒DNA的得率为48.3%。用L-Histidine-agarose亲和层析可从澄清的碱裂解液中一步分离纯化超螺旋质粒DNA,质粒DNA得率为51.62%。经琼脂糖核酸电泳检测,HCGβ抗肿瘤核酸疫苗超螺旋质粒DNA的纯度为100%电泳纯。     

Box-Behnken响应面分析法优化桦褐孔菌多糖提取工艺

根据Box-Behnken试验设计原理,在单因素实验基础上,研究料液比、提取温度、提取时间、酶解时间及其交互作用对多糖得率的影响。结果表明:桦褐孔菌多糖的最优提取工艺为:料液比1∶30,提取温度90℃,提取时间5 h,酶解时间65 min,多糖得率理论值为3.598%,实际测得多糖得率为(3.575±0.24)%。Box-Behnken实验设计方法可较好地对桦褐孔菌多糖的提取工艺进行优化,在该工艺下提取得到的桦褐孔菌多糖质量稳定。     

辣椒基因组DNA两种提取方法的比较

采用SDS法和CTAB法提取新鲜辣椒幼叶的基因组DNA,用核酸蛋白仪检测法、琼脂糖凝胶电泳法和PCR扩增法对两种方法提取的DNA样品分别进行检测,核酸蛋白仪检测表明:SDS法得到的DNAOD260/OD280均大于2.0,说明蛋白质去除彻底,但RNA未除干净;CTAB法得到的DNAOD260/OD280均为1.8～2.0,说明蛋白质、多糖、RNA完全去除。琼脂糖凝胶电泳表明:SDS法提取的DNA有两条带,说明样品中仍含有未被除去的多糖及其他一些次生代谢物质,RNA也有残留;CTAB法提取的DNA只有一条清晰整齐的主带,有效地去除了辣椒幼叶中的多糖及其他次生代谢物质,RNA也降解完全。PCR扩增法显示:SDS法和CTAB法提取的DNA样品均可进行PCR扩增,也可用作SRAP研究,但CTAB法提取的样品扩增出的条带比较清晰。结果表明:CTAB法提取的DNA含量高,纯度高,能够满足后续分子生物学研究的需要。     

多板纲动物的不同保存方法对基因组DNA提取的影响

为了探讨最佳的适合提取DNA的石鳖样本保方法,以日本花棘石鳖Liolophura japonica、日本宽板石鳖Placiphorella japonica、红条毛肤石鳖Acanthochiton ruhrolineatus、平濑锦石鳖Onithochiton hirasei、网纹鬃毛石鳖Mopalia retifera为实验材料,对其分别以甲醛浸泡、95%乙醇浸泡、-75℃超低温保存的样本进行基因组DNA提取.通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳对DNA产物进行检测.结果表明：新鲜材料和用乙醇保存的样品比用-75℃超低温保存的样品提取出的DNA纯度和浓度都高,用甲醛浸泡的方法保存没有提取出DNA.结果表明,超低温保存适合用于DNA提取.但是由于条件限制,长距离外采集样本时适合于用乙醇保存,并且成本较低.     

正交试验优选马铃薯糖苷生物碱提取工艺

对马铃薯中糖苷生物碱的超声提取工艺进行了研究。以α-茄碱为对照品,通过L9（34）正交试验,优选了工艺参数。结果表明：选用含5%醋酸的乙醇为提取溶剂,各因素的影响依次为：提取次数〉乙醇体积分数〉料液比〉提取时间。最优提取工艺条件是：以60%的乙醇为溶剂,提取时间30 min,料液比1：10,三级提取,粗提物得率薯芽最高为0.016g/g,测得粗提物糖苷生物碱含量230 mg/g;薯芽、薯皮、薯肉中糖苷生物碱含量分别为3.37 mg/g、2.91 mg/g、0.68 mg/g。     

超声波辅助乙醇溶剂提取马蹄皮渣总黄酮研究

研究了响应面法优化超声波提取马蹄粉加工皮渣中总黄酮的提取工艺,建立了影响因素与马蹄皮渣总黄酮得率之间的函数关系。确定马蹄皮渣总黄酮的超声波法最佳提取工艺条件为:乙醇浓度为53.2%,料液比1:29,超声波电流0.6 A,超声提取40 min,提取2次,在此条件下总黄酮得率为2.239%。     

高纯度莱鲍迪甙A的结晶制备工艺

针对现有结晶法制备甜菊糖中存在的结晶步骤复杂、回收率低、结晶周期长等问题,提出了二次结晶法从甜菊糖 粗品中提取高纯度RA的新工艺。同时研究了提取溶剂、固液比、结晶温度、结晶时间等对结晶效果的影响,优化了现有 结晶工艺,简化了结晶步骤。实验表明,结晶法制备高纯度RA的最佳工艺为：一次结晶提取溶剂为无水甲醇(质量分数 >99%),固液比为1：5g/mL,溶解温度为50℃,结晶时间为2h;二次结晶提取剂为86% -88%的乙醇溶液,固液比1:4 g/ml溶解温度为50℃,结晶时间为16 - 24 h。两次结晶RA总得率为70. 9%,通过本结晶工艺,可制得RA的质量分 数为97. 51%的甜菊糖产品     

从废水中提取硼

本文讨论了从废水中提取硼的常用方法如生成难溶盐沉淀，无机吸附剂，阴离子交换树脂、有机溶剂革取，蒸发浓缩结晶等，并且对实验参数如浓度，温度，酸度等提取硼的影响进行了分析。     

落葵果实中总黄酮提取条件的研究

采用超声波提取法,通过正交实验确定从落葵果实中提取总黄酮的最佳工艺条件,并用比色法测定提取物中总黄酮的含量.结果表明,最佳条件是以体积分数为70%的乙醇为提取剂、料液比为1：20、提取时间为35min.在此条件下,落葵果实总黄酮提取量为5.3 mg蛐g.     

黑桫椤叶中总黄酮含量的测定

采用超声提取和分光光度法测定了黑桫椤叶中总黄酮的含量,并对总黄酮的提取条件进行了探讨.以体积分数为60%的乙醇为提取剂,超声提取60 min,以1：50的料液比测定黑桫椤叶中总黄酮的效果较好.生长于沟底和山坡的黑桫椤叶中总黄酮的质量分数分别为3.303%和4.625%.     

霍山石斛组培苗多糖的提取工艺研究

[目的]研究霍山石斛组培苗多糖的最佳提取工艺。[方法]通过单因素和正交试验法确定最佳工艺条件。[结果]霍山石斛组培苗多糖的最佳提取工艺条件为温度80℃、料液比1∶30、时间3h、提取次数2次,该条件下多糖得率为17.763%。[结论]该工艺提取霍山石斛组培苗多糖效果好,简便可行。     

仙人掌茎多糖的分离纯化

采用水浸-醇沉法提取粗多糖,多糖得率为1.48%.仙人掌茎粗多糖再经DEAE-Sepharose fast flow柱层析,分离出3种多糖组分,3种多糖组分再经Sephadex-G 75和Sephadex-G200柱层析,得5种仙人掌茎多糖,均达到电泳纯,多糖的回收率在78.9%～95.8%之间.     

用盐析法从苹果皮中提取果胶

在加热条件下，于酸性溶液中浸提干、鲜苹果皮，通过ｐＨ值调整，用盐析法制得果胶，产品得率２％，颜色灰白，符合食品卫生要求．     

从槐米中提取芦丁的酸化条件研究

碱溶酸沉法是提取芦丁的常规方法，但对其酸沉时的酸度的确定，文献报导多有不同。在大量实验的基础上，优化出最佳酸化条件为pH3.5左右，且使其提取收率比原来提高了0.6％。     

草木犀黄酮提取工艺优化及抑菌活性研究

利用超声波辅助技术研究优化草木犀中黄酮类化合物的提取工艺,及黄酮类化合物的抑菌效果.采用分光光度法对所提取的黄酮类化合物的进行含量测定,通过单因子试验、均匀设计试验考察了料液比、超声时间、乙醇浓度、超声温度对草木犀中黄酮类化合物提取率的影响,结果表明:以上四个因子对黄酮化合物的提取具有不同程度的影响,由大到小依次为乙醇浓度、超声时间、超声温度、料液比.确定最佳工艺为料液比1:10(g.mL-1)、超声时间30min、乙醇浓度80%、超声温度30℃,粗黄酮得率为0.884g.kg-1.通过滤纸片试验发现黄酮类化合物对土壤细菌具有一定的抑菌作用,对酵母菌具有促进作用.     

两种茵陈总黄酮提取方法的对比研究

本文采用微波辅助法,分别用水、β-环糊精水溶液做溶剂提取茵陈黄酮。以总黄酮提取率为考察指标,通过正交实验设计考察了提取时间、料液比、微波功率和环糊精浓度对总黄酮提取率的影响,优选了最佳提取条件。结果表明,水法提取茵陈黄酮的最佳条件为:料液比1:20(g:mL)、提取时间10min、微波功率250w,最佳提取条件下总黄酮提取率为2.90%;β-环糊精水溶液法提取茵陈黄酮的最佳条件为:β-环糊精质量分数1.0%、提取时间8min、料液比1:20(g:mL)、微波功率250w,最佳提取条件下的总黄酮提取率为3.68%。β-环糊精水溶液法提取茵陈黄酮的提取率较水法提取高26.7%。     

黄连须中盐酸小檗碱的提取工艺研究

根据黄连须中主要有效成分小檗碱易溶于乙醇的性质 ,采用正交设计筛选醇提工艺的最佳条件 ,用紫外分光光度法 ,以提取物中盐酸小檗碱的含量为指标优选提取工艺。结果表明 :黄连须粗粉中加入 5 %的中药提取因子 ,37℃恒温浸泡 6h,乙醇连续回流 3次 ,每次 1h ,总加醇量为2 2倍 ,所得盐酸小檗碱的总量最高 ,提取的盐酸小檗碱总量可达 3.81% ,该工艺为黄连须的更好利用提供了实验依据     

卵磷脂提取工艺的研究

研究建立了以新疆本地植物油脚为原料的卵磷脂提取工艺。水化油脚在0.065-0.085MPa、80℃条件下真空浓缩脱水,得浓缩磷脂,再经丙酮脱油、分离、干燥得粉状磷脂即粗磷脂;粗磷脂在55℃、30MPa条件下用超临界流体二氧化碳萃取2小时萃除油脂等杂质,纯化得磷脂;然后用三倍量85%的乙醇60℃下提取磷脂1小时,提取三次,最终得到以磷脂酰胆碱为主的产品即卵磷脂。大豆、葵花和胡麻三种卵磷脂的提取率分别为:17.8%、12.6%及13.2%,含磷量分别为:4.52%、2.93% 及 3.28%,磷脂酰胆碱含量分别为:64.3%、53.3% 及59.8%。