高效液相色谱柱的使用与维护

色谱柱是高效液相色谱仪的关键部件,对色谱柱的维护十分重要。本文介绍了色谱柱的构造、使用与维护、再生和发展方向。     

Grace Vydac新品推荐

VENTURETM A:用于纯化抗体的蛋白A亲和色谱柱 Grace Vydac新近推出VENTURE A色谱柱-VEN-TURE系列亲和色谱柱中的首个产品。VENTURE系列亲和色谱柱采用了ICE(Inert Coating Enhancement)技术以消除硅胶表面上的非特异性结合。凭借ICE技术,     

强保留固定相的色谱特性

在新方法的发展过程当中,色谱方法最重要的目标之一是得到具有一致性且可重现的分离。选取具有高重现性和良好性能的高效液相色谱(HPLC)柱是实现这一目标最基本的要素。对装入HPLC柱的色谱介质进行物理测试毋庸置疑也是非常重要的,该测试可以揭示HPLC柱的部分色谱特性。柱的本身特性以及如何与一个宽范围的分析物相互作用只能通过严格的色谱评估来获得。     

气相色谱法的柱效参数和峰面积计算的讨论

本文以气相色谱中半峰宽与保留数据的线性关系为基础,对现已提出的一些柱效参数作了比较,指出真实峰数RPN是一个较完善的柱效参数。对各种手测色谱峰面积计算式的适用性进行了讨论,说明大多数实测色谱峰的峰面积可使用统一的公式来计算。     

色谱柱预防性保护与柱寿命的延长

通常,一根色谱柱在分析数千个样品之后性能仍然保持良好,但也有的柱仅分析不多的样品后几乎就报废了。影响柱寿命和其它问题的因素很多,而有些因素是操作者很难控制的,如果被分析的样品(如分析生物样品),怎么净化样品也是“脏”的,好于色谱柱的影响是非常大的。然而采取下列措施后,在多数情况下总能够人为地减少柱上故障,达到延长柱寿命的目的。     

用于蛋白质的分离和蛋白质组学研究的高稳定性疏水相互作用色谱柱

本文介绍了一种以硅胶为基质,修饰多功能氨基官能团的疏水相互作用色谱固定相。由于同时具有疏水和亲水配基,这种固定相在水相中的稳定性得到了改善。这种修饰还能改善蛋白/多肽分离的分辨率和柱效,同时延长色谱柱的使用寿命。     

氯代苯类化合物的气相色谱保留指数与其理化参数的相关性研究

构建了从氯代苯化合物气相色谱保留指数I_i预测其理化参数P_i的公式,研究了该类化合物在不同极性固定柱上测得的气相色谱保留指数I_i预測其理化参数P_i的准确性,得出了比弱极性固定柱上测得的气相色谱保留指数I_i更能准确地预測其理化参数P_i,为有机化合物的理化参数的測定和预报提供了一种简便易行的新方法。     

高效液相色谱仪器的进展

介绍了高效液相色谱仪的输液系统、色谱柱和检测器的进展。     

大黄中氨基酸的DNFB柱前衍生化高效液相色谱测定

通过升高色谱柱温度,结合线性梯度洗脱的分离模式调整分离选择性,发展了一种氨基酸的2,4-二硝基氟苯柱前衍生化高效液相色谱分析方法,也将该方法用于大黄中氨基酸含量的测定。所发展的方法采用Kromasil C18,(250mm×4.6mm I.D.5μm)色谱柱,44℃柱温,以3段线性梯度可以在30分钟内基线分离17种基本氨基酸,方法具有普适性好、稳定性高等特点。     

计算机预测组分在气相色谱填充柱程序升温过程中的保留时间

本文阐述了根据组分谱带在气相色谱填充柱中的运动规律，推导出在程序升温过程中组分保留时间与温度的关系式。运用据此式编制的Ｂａｓｉａ程序，预测有机物在气相色谱填充柱程序升温过程中的保留时间；并对八种有机物在ＳＥ—３０柱和Ｐｏｒａｐａｋ—Ｑ柱上，进了在不同程序升温条件下的保留时间的验证，其预测值与实验值的相对误差大多小于３％，最高相对误差小于５％。     

毛细管电色谱柱制备技术及其进展

综合评述了毛细管电色谱柱的类型及制备技术的进展情况.     

五味子与南五味子的化学模式识别与计算机辨识研究

目的用高效液相色谱法鉴别五味子与南五味子。方法采用RP-HPLC,以五味子甲素峰为参考峰,色谱柱：DIKMA DIAMONSIL C18柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）;流动相：甲醇-水（65∶35）;检测波长：254 nm。结果在选定的色谱条件下,对五味子与南五味子进行系统聚类与判别分析,提供了稳定可控的液相色谱图。结论能够满足鉴别五味子与南五味子的要求;采用系统聚类与判别分析和液相色谱技术鉴别五味子与南五味子是切实可行的。     

直接电导检测离子排斥色谱法测定酱油中的有机酸

研究了直接电导检测离子排斥色谱法分离测定酱油中多种有机酸。以Shim-packSCR-102H柱为分离柱,选用对甲苯磺酸和乙腈为淋洗液,考察了淋洗液浓度、色谱柱温度及淋洗液中乙腈含量对分离和测定有机酸的影响。通过实验确定最佳的色谱条件:2mmol/Lp-甲苯磺酸:乙腈(v/v,91/9)淋洗液,流速1.0mL/min,柱温50℃。方法对所测有机酸的检出限在0.06～1.05mg/L之间,相对标准偏差在3.3%以下(n=5),加标回收率在96.5%～100.6%之间。     

有效UPLC的实现

本文介绍了超高效液相色谱(UPLC)方法的成功实现。系统中泵、阀、色谱柱和检测器的设计以及如何将其连接成为一个独立的UPLC系统都是至关重要的。     

珠蛋白水解产物的二维液相色谱分析

本文以强阳离子交换色谱(SCX)作第一维,反相色谱(RP)作第二维,以一个10通阀直接连接两支色谱柱,构建正交的SCX/RP二维液相色谱系统,并以珠蛋白水解产物的分析对其加以评价。样品首先由第一维阳离子交换色谱(HyperilSCX,100mm×4.6mmI.D.)在pH4.0的磷酸盐缓冲体系中以0.5mL/min的低流速洗脱分离,洗脱产物通过10通阀直接富集在反相分析柱(HypersilBDSC18,250mm×4.6mmI.D.)顶端,切换10通阀后进一步进行反相分析。阳离子交换色谱采用不连续的逐步增加盐浓度的19步台阶梯度方式洗脱,切割转移样品组份后再进行第二维分析。二维液相色谱系统的分辨率、峰容量都得到提高,出峰数量达到690多个,系统峰容量达到5643。二维液相色谱系统均采用常规尺寸的色谱柱,可以处理大进样量的样品,对生物样品的制备纯化有一定的指导意义。     

采用脉冲火焰光度检测器进行丙烯中含硫化合物的气相色谱分析

在气相色谱分析中采用Agilent J&W低硫选择性色谱柱及硫特异性检测器如脉冲火焰光度检测器(PFPD),可将含硫化合物从基质中高效地分离出来,因而可对丙烯基质中痕量H2S,COS与CH3SH进行检测。将含硫化合物从基质中分离出来再检测,可避免基质引起的抑制效应并提高含硫化合物的响应。该色谱柱为活性含硫化合物如H2S提供了较好的响应,使含量低至20ppb的检测成为可能。尽管这是一种多孔层开管柱(PLOT),但它不会出现颗粒物质脱落现象,色谱图无锐峰。因此,与阀结合使用是安全的。     

柱后离子色谱法在生物样品检验中的应用

随着柱后反应技术(PCT)的不断开发,使离子色谱(IC)法在分析领域的应用显示出越来越广阔的前景。本文综述了除抑制柱以外的其他常用的 IC 柱后反应器(PCR)、应用于柱后技术的有关反应及近年来国内外有关柱后 IC 法在生物样品检验中的应用。     

毛细电色谱中流动相的选择

本文以实验为依据 ,介绍了毛细电色谱中用 ODS反相柱分离中性物质时流动相的选择     

单糖混合物的毛细柱色谱分离

本文对单醛糖在不同毛细柱上的分离情况作了分析,认为恒温及程序升温条件对色谱分离有影响。     

仪器维护时应遵循的基本规则

1一次规则当系统出了故障,你可以试探性地改变某些状态,一次可以改变一个参数。例如,限制色谱峰脱维的问题,可以依次改变流动相,换保护柱,换分析柱等。做一些简单的改变步骤,也许就能解决问题。