胃癌患者外周血中CK19mRNA的表达及其临床意义

目的探讨靶基因CK19mRNA在胃癌患者外周血中的表达,以及与胃癌生物学行为的相关性。方法采用RT—PCR方法检测66例胃癌患者外周血的CK19mRNA,10例正常健康志愿者外周血为阴性对照;10例胃癌肿瘤组织为阳性对照。结果66例胃癌患者外周血中CK19mRNA性率为59．09％（39／66）,并与胃癌临床分期和有无淋巴结转移呈显著相关（P〈0．05）。而健康成人外周血则呈现阴性。结论应用RT-PCR方法检测胃癌患者外周血中的CK19mRNA具有较高敏感性和特异性。有望成为判断胃癌患者转移和复发以及疗效评估的一种肿瘤标志物。     

胃癌肿瘤细胞组织因子的表达与淋巴结转移的关系

目的 探讨组织因子在胃癌肿瘤细胞中的表达与淋巴转移的关系.方法 采用组织因子单抗对手术切除的胃癌及转移淋巴结的石蜡切片标本行免疫组化染色,对比阳性和阴性组间淋巴结转移、肝转移、肿瘤分期等的差异,以及原发灶和转移淋巴结的组织因子表达的差异.结果 原发灶肿瘤细胞的TF阳性表达率为62.5%(20/32),Duke分期越高,阳性表达率越高,阳性组淋巴结转移和肝转移率明显高于阴性组.转移淋巴结组织因子的阳性表达率为84.2%(16/19),与原发灶的表达没有关系.结论 组织因子在胃癌的原发灶和淋巴结转移灶中有较高的阳性表达率,对肿瘤的淋巴转移及淋巴结中肿瘤的生长有促进作用,组织因子阳性表达的肿瘤细胞可能具有淋巴转移的潜能.     

CEA mRNA在胃癌患者外周血中的表达及临床意义

目的探讨靶基因CEA mRNA在胃癌患者外周血中的表达以及与胃癌生物学行为的相关性。方法采用RT—PCR方法检测66例胃癌患者外周血的CEA mRNA,10例正常健康志愿者外周血为阴性对照;10例胃癌肿瘤组织为阳性对照。结果66例胃癌患者外周血中CEA mRNA阳性率为65．15％（43／66）,并与胃癌临床分期和浸润深度呈显著相关（P〈0．05）。而健康成人外周血则呈现阴性。结论应用RT—PCR方法检测胃癌患者外周血中的CEA mRNA具有较高敏感性和特异性,并有望成为判断胃癌患者转移和复发以及疗效评估的一种肿瘤标志物。     

Smad4在胃癌组织中表达的研究

目的检测Smad4在胃癌组织及其相应正常胃粘膜组织中的表达分布,并分析其与胃癌患者临床病理学特征之间的关系。方法选取39例经外科手术切除及组织病理学证实的胃癌患者癌组织标本及相应正常胃粘膜组织,应用冰冻切片免疫组化染色方法,在蛋白水平进行检测。结果正常胃粘膜细胞浆中都有Smad4阳性表达,39例胃癌患者癌组织中22例有Smad4阳性表达(56.4%),两者之间差异有显著性(P<0.05)。Smad4蛋白的表达与癌细胞的分化程度及浸润程度相关,分化程度越低、浸润程度越重,其阳性表达率越低(P<0.05);而Smad4蛋白的表达与年龄、性别、TNM分期、淋巴结转移、远处转移无相关性。结论Smad4的表达下降与胃癌的发生有关,而且与癌细胞的分化程度及浸润程度密切相关,Smad4可能作为胃癌诊断和预后的分子标志。     

补肾益髓中药对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织Runx2的mRNA及蛋白表达的影响

目的 观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠模型骨组织Runt相关基因2(Runx2)mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制以及补肾益髓中药的疗效及其调控作用.方法 采用后肢肌注地塞米松(2.5 mg/kg,每周2次,连续9w)的方法复制GIOP大鼠模型,按体重分层随机分为正常组、模型空白组、补肾益髓中药组、补中益气颗粒组、血府逐瘀胶囊组、骨疏康颗粒阳性对照组.灌胃给药9w.应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,以评价动物模型的成立及药物疗效.实时定量RT-PCR(Real-Time Quantitative RT-PCR)检测骨组织Runx2 mRNA表达,Western blot检测骨组织Runx2蛋白表达.结果 (1)股骨骨密度:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾益髓中药组明显升高(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组明显升高(P<0.05),补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有升高趋势,但无统计学意义(P>0.05).(2)骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾益髓中药组明显上调(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组也有明显上调(P<0.05),补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有所升高,但无统计学意义(P>0.05).结论 (1)肌注地塞米松可以成功复制GIOP大鼠模型,(2)骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达水平降低可能是GIOP的发病机制之一,(3)应用补肾益髓中药具有明显防治效果,疗效优于健脾中药和活血中药,其作用机理与上调骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达密切相关.     

人肾微血管内皮细胞转分化在移植肾间质纤维化形成中的作用

目的:探讨人肾微血管内皮细胞-间充质细胞转分化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)在移植肾间质纤维化形成中的意义及相关机制?方法:通过对南京医科大学第一附属医院25例慢性移植肾失功能(chronic allograft dysfunction,CAD)患者和25例正常人血生化指标进行分析,对移植肾组织标本和正常肾组织标本进行糖原(PAS)和马松三色(Masson)染色检查分析,观察两组肾功能?肾小管萎缩?肾小球塌陷及肾间质纤维化程度的差异?用免疫组织化学和间接免疫荧光双重染色方法检测两组肾组织标本中血管内皮细胞标志物CD34和肌成纤维细胞标志物α-平滑肌细胞肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)以及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达和分布特点?进一步以原代人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)为体外研究对象,以TGF-β1(5 ng/ml)作用0~72 h,采用免疫印迹方法观察细胞中CD34和α-SMA的表达变化?结果:与正常人相比,CAD患者血清肌酐水平明显升高,PAS和Masson三色染色结果显示CAD患者移植肾组织中出现明显肾小管萎缩?肾小球塌陷及肾间质纤维化改变;半定量统计分析结果表明两者间存在统计学差异(P < 0.01)?免疫组织化学及间接免疫荧光染色结果表明,与正常组相比,CAD组中CD34阳性表达率降低而α-SMA及TGF-β1阳性表达率显著升高,CAD组中部分肾小球和间质微血管内皮细胞呈CD34和α-SMA双重染色阳性?体外研究显示,TGF-β1作用于HUVECs细胞后,随着时间延长,CD34表达逐渐降低而α-SMA表达逐渐增多,与对照组相比,具有统计学差异(P < 0.01)?结论:人肾微血管内皮细胞可能在TGF-β1介导下通过发生EndMT现象进而在移植肾间质纤维化形成中起重要作用?     

CagA阳性幽门螺杆菌感染与消化性溃疡、胃炎相关性512例临床分析

目的：探讨CagA阳性Hp感染与消化性溃疡、胃炎等胃及十二指肠疾病的关系.方法采用ELISA法对Hp阳性(13 C-呼气试验为阳性)、胃黏膜快速尿素酶联免疫法阳性的512例胃十二指肠疾病患者及80例对照者(健康体检：13 C-呼气试验为阴性、胃黏膜快速尿素酶联免疫法阴性)行血清CagA抗体检测.512例胃十二指肠疾病患者中慢性浅表性胃炎(CSG)184例,慢性萎缩性胃炎(CAG)120例,十二指肠球溃疡(DU)100例,胃溃疡(GU)108例.结果 CagA抗体阳性检出率对照组为30%,慢性浅表性胃炎组阳性率为61.96%,慢性萎缩性胃炎组阳性率为63.33,十二指肠溃疡组阳性率为68.00%,胃溃疡组阳性率为74.07%.胃十二指肠疾病患者CagA阳性总检出率为66.02%,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05).结论胃十二指肠疾病Hp阳性感染者中CagA抗体阳性总检出率明显高于对照组,提示CagA抗体阳性感染与胃十二指肠疾病密切相关;两组胃炎患者CagA抗体阳性检出率明显高于对照组,提示CagA抗体阳性感染与胃炎密切相关;胃十二指肠溃疡患者CagA抗体阳性检出率明显高于对照组,提示CagA抗体阳性感染与消化性溃疡密切相关.     

血管内皮生长因子在老年乳腺癌组织中的表达

目的分析血管内皮生长因子(VEGF)在老年乳腺癌组织中的表达及其与临床病理分期的关系。方法选取48例原发乳腺癌老年患者,采集乳腺癌组织标本,选用Max Vision快捷免疫组化染色检测法对其乳腺癌组织中血管内皮生长因子的表达情况进行检测,分析血管内皮生长因子与临床病理分期的相关性。结果在本次研究中,患者血管内皮生长因子的阳性表达率为64.6%,血管内皮生长因子阳性表达率和乳腺癌组织中肿瘤大小无明显相关(P0.05),淋巴转移阳性者血管内皮生长因子阳性表达率高于阴性者,Ⅲ期、Ⅴ期患者阳性表达率高于0期、Ⅰ期、Ⅱ期患者。结论血管内皮生长因子是临床判断乳腺癌预后的一项重要指标,是乳腺癌的治疗靶点。     

雌激素减轻β-淀粉样蛋白所致PC12细胞毒活性的机制

目的观察17β雌激素对β淀粉样蛋白25~35片段(Aβ25~35)所致PC12细胞毒活性影响的可能机制。方法用逆转录一聚合酶链反应(RT PCR)技术,观察雌激素对Aβ25~35损伤的PC12细胞的Bcl~2mRNA及Bax mRNA表达的影响。结果用Aβ25~35处理PC12细胞24h,与对照组相比,Bcl~2mRNA的表达水平降低,Bax mRNA的表达水平升高;而Aβ25~35加17β雌激素引起Bcl~2mRNA的表达水平较单纯Aβ处理组增高,Bax mRNA的表达水平较单纯Aβ处理组降低。结论17β雌激素在Aβ25~35所致PC12细胞毒性的神经保护作用中,其机制是通过上调Bcl~2mRNA的表达与下调Bax mRNA的表达来实现的。     

中药治疗慢性萎缩性胃炎及癌前病变35例临床分析

目的 探讨中药对慢性萎缩性胃炎(CAG)伴异型增生(ATP)或肠上皮化生(IM)的临床症状、CAG及ATP或IM的胃镜及病理活检改变的影响.方法 将确诊为CAG伴ATP或IM的患者随机分为治疗组和对照组,治疗组用自拟中药方治疗,对照组用深圳南方制药厂的三九胃泰胶囊口服,观察前、观察后第15天内作胃镜和病理活检,活检标本尽可能在原病变部位钳取.结果 临床症状疗效比较:治疗组总有效率94.3%,对照组45.7%(P＜0.01);对IM、ATP的疗效比较:治疗组总有效率82.9%,对照组54.3%(P＞0.05).结论 中药可以改善CAG伴ATP或IM患者临床症状;对CAG伴ATP或IM有逆转作用.     

食管鳞状细胞癌中ARTN、GFRα3的表达及临床意义

探讨ARTN和GFRα3在食管鳞状细胞癌组织中的表达及与临床病理参数之间的关系及意义。应用免疫组化SP两步法检测25例食管正常组织、17例高级别上皮内瘤变组织、114例食管鳞状细胞癌组织中ARTN、GFRα3蛋白的表达。结果表明:ARTN在正常食管黏膜、高级别上皮内瘤变组织和食管鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为0、23.5%、80.7%,GFRα3阳性表达率分别为0、29.4%、76.3%,差异具有统计学意义(P0.05),其与食管鳞状细胞癌浸润深度及临床分期有关,浸润深度T3、T4表达高于T1、T2(P0.05);临床分期Ⅲ、Ⅳ期高于Ⅰ、Ⅱ期(P0.01),ARTN与GFRα3在食管鳞癌中的表达呈正相关(r=0.198,P0.05)。由此说明ARTN和GFRα3表达与鳞状细胞癌生物学密切相关,两者协同作用可能促进食管鳞状细胞癌浸润及进展。     

TWIST基因和蛋白与宫颈癌发生发展关系的研究

目的:检测TWIST基因在宫颈癌组织和宫颈正常组织中的表达,探讨其与宫颈癌发生?发展的相关性及在宫颈癌诊疗中的意义?方法:收集56例宫颈癌组织和35例宫颈正常组织,用实时定量PCR检测TWIST mRNA的表达;用Western blot检测TWIST蛋白的表达,并分析TWIST mRNA在宫颈癌中的表达水平与临床病理因素及高危型HPV病毒载量相关性?结果:实时定量PCR结果显示宫颈癌组织中TWIST mRNA表达高于宫颈正常组织,差异具有统计学意义(P < 0.01);Western blot在蛋白质水平上证实了这一点(P < 0.01)?宫颈癌组织中TWIST的表达与淋巴结转移相关(P = 0.022),但与年龄?FIGO分期?肿瘤大小?病理类型?肿瘤分化程度无关(P均> 0.05),Logistic回归分析显示,高水平的TWIST mRNA表达是淋巴结转移的独立危险因子(P < 0.05)?而TWIST基因的相对表达水平与高危型HPV病毒载量无相关性(r = 0.205,P > 0.05)?结论:宫颈癌组织中TWIST的表达上调,且与是否有淋巴结转移相关,TWIST的表达可能对宫颈癌的发生?发展及转移有重要作用?     

吡格列酮对正常MC3T3-E1成骨细胞增殖、凋亡以及功能蛋白表达的影响

目的 探讨不同浓度吡格列酮(PIO)对正常糖浓度培养下MC3T3-E1小鼠早期成骨细胞增殖、凋亡及功能蛋白分泌表达的影响.方法 体外培养MC3T3-E1细胞,分为正常对照组、不同浓度PIO干预组(5 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L、40 μmol/L),分别干预24、48 h.CCK-8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RIA法和ELISA法分别检测相关功能蛋白骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP),RT-PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、成骨因子runt相关基因2(Runx2)及骨形成蛋白-2(BMP-2)mRNA表达水平.结果 (1)与对照组比较,MC3T3-E1细胞增殖能力在5μmol/L PIO干预组增加显著(P<0.05)、在PIO大于5 μmol/L～10 μmol/L干预组则降低(P<0.05).干预时间由24 h延长至48 h,各组细胞增殖能力呈不同程度增加,但在20、40 μmol/L PIO干预的两组增加无统计学差别.(2)对照组及各PIO浓度干预干预24 h,细胞凋亡率分别为:1.97%、0.43%、13.0%、48.30%、81.00%;(3)随着PIO浓度从0～40μmol/、L范围内的增加,MC3T3-E1细胞的PPARγmRNA表达水平呈增加趋势(P<0.05);Runx2 mRNA表达量在5 μmol/L PIO浓度组时较对照组增加,在剂量较高时(PIO≥10 μmol/L)随浓度升高表达下降.(4)细胞功能蛋白ALP、OCN的分泌及BMP-2的表达在5 μmol/L PIO浓度组时最高,PIO≥10 μmol/L时,上述蛋白量逐渐下降(P<0.05);随干预时间从24～48 h延长,各PIO浓度干预组ALP以及BMP-2量增加(P<0.05),而OCN无显著改变(P>0.05).结论 PIO对正常糖浓度培养的MC3T3-E1细胞具有双向作用:低浓度促进细胞增殖,高浓度则促进凋亡.PPARγ适当激活可促使成骨细胞通过Runx2增加功能蛋白的合成;过度激活,则表现出细胞毒性.     

HCV不同基因型对慢性丙型肝炎抗病毒治疗疗效的影响

目的：探讨干扰素联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎患者临床疗效的相关影响因素.方法对110例慢性丙型肝炎患者进行PEG-IFNα-2a 180μg/周联合RBV 800~1200 mg/d的标准治疗,并完成治疗后24周随访,同时分析HCV基因型、HCV-RNA定量对持续病毒学应答( SVR)的影响.应用罗氏试剂检测丙肝病毒定量,应用反转录-套式聚合酶链反应( PT-PCR)法检测HCV基因型.结果在110例进行标准联合治疗、并完成治疗后24周随访的慢性丙型肝炎患者中,68例患者获得SVR.其中,HCV 基因1b 型感染者SVR率为51.4%(37/72),HCV基因N-1b 型感染者SVR率为81.5%(31/38);基线HCV-RNA水平<1.0×105 IU/mL的患者SVR率为71.2%(42/59),基线 HCV-RNA水平≥1.0×105 IU/mL的患者SVR率为50.9%(26/51).结论非1b基因型SVR率高于1b基因型;基线低病毒RNA水平(血清HCV-RNA水平<1.0×105 IU/mL)SVR率高于基线高病毒RNA水平(血清HCV-RNA水平≥1.0×105 IU/mL).     

钠氢交换体1 mRNA在心衰患者心肌组织中的表达

目的观察钠氢交换体1（sodium—hydrogen exchanger1，NHE1）在心力衰竭患者心肌组织中的表达，探讨NHE1在心衰发生和发展中的作用。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）检测35例心力衰竭患者心肌组织NHE1mRNA的表达水平。结果实时荧光定量PCR（FQ—PCR）检测心功能Ⅰ级组、心功能Ⅱ级组、心功能Ⅲ级组心力衰竭患者心肌组织NHE1mRNA的△Ct值分别为6．29±0．66、5．01±0．60、4．40±0．74。与心功能Ⅰ级组比较，在心功能Ⅱ级组、心功能Ⅲ级组患者心肌组织中NHE1mRNA表达明显高于心功能Ⅰ级组（P〈0．01），同时与心功能Ⅱ级组比较，心功能Ⅲ级组患者心肌组织中NHE1mRNA水平增高，且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论心衰患者心肌组织中存在NHE1mRNA的高水平表达，提示NHE1可能在心衰的发生和发展过程中起着重要作用。     

不同葡萄糖浓度对3T3-L1脂肪细胞诱导分化中解偶联蛋白2基因表达的影响

目的 观察体外培养条件下葡萄糖浓度对3T3-L1脂肪细胞诱导分化过程中UCP2mRNA表达水平的变化.方法 体外培养3T3-L1脂肪细胞,在诱导3T3-L1脂肪细胞分化成熟的基础上,经不同葡萄糖浓度5.5,25,45mmol/L培养后,3T3-L1脂肪细胞干第3,5,7天抽提总RNA,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测UCP2mRNA的表达.结果 随着脂肪细胞逐渐分化成熟,在第7天,45mmol/L葡萄糖终浓度培养条件下,3T3-L1脂肪细胞UCP2mRNA的表达受到抑制(P＜0.05);5.5mmol/L葡萄糖终浓度培养条件下,3T3-L1脂肪细胞可增加UCP2mRNA的表达(P＜0.01).结论 体外培养中,葡萄糖浓度的变化对脂肪细胞中UCP2mRNA的表达与调控具有一定的影响.     

重庆忠县老年原发性肝癌患者乙肝病毒表达现况分析

目的分析重庆忠县地区老年原发性肝癌(PHC)患者外周血乙肝病毒(HBV)表达现况。方法连续选择2007年至2014年在重庆市忠县人民医院确诊的老年PHC患者194例。对照组为同期在我院确诊的中青年PHC患者295例。两组对象就诊期间接受了外周血HBV标识物检测。结果两组对象外周血HBV标识物均以HBsAg阳性加HBeAg阴性加HBeAb阳性表达居多,而HBsAg阳性加HBeAg阴性加HBeAb阴性表达次之。老年PHC组与中青年PHC组之间外周血HBV标识物各类异常表现形式分布均无明显区别(P0.05)。结论重庆忠县地区不同年龄PHC患者外周血HBV标识物表达现况相同。     

紫杉醇联合卡培他滨对比奥沙利铂联合卡培他滨在胃癌术后辅助化疗中的临床研究

目的对比紫杉醇联合卡培他滨以及奥沙利铂联合卡培他滨在胃癌术后辅助化疗的临床疗效。方法回顾性分析我院2011年1月至2013年1月收治的105例胃癌根治术后行辅助化疗的患者,分为A组和B组,A组55例患者实施奥沙利铂联合卡培他滨方案行术后辅助化疗,B组50例患者实施紫杉醇联合卡培他滨方案行术后辅助化疗,观察两组患者无病生存期(DFS)、总生存期(OS)以及不良反应发生情况。结果 A组和B组患者1年、2年、3年和5年DFS率、OS率对比差异均无统计学意义(P 0. 05); A组、B组DFS分别为(32. 3±2. 5)个月、(27. 1±2. 2)个月,对比差异无统计学意义(P0. 05); A组、B组OS分别为(55. 7±3. 6)个月、(47. 4±3. 9)个月,对比差异无统计学意义(P 0. 05);两组患者均无化疗相关性死亡;化疗不良反应多为Ⅰ～Ⅱ度,Ⅲ～Ⅳ度相对较少; B组脱发发生率显著高于A组,对比差异有统计学意义(P 0. 05); B组Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制发生率高于A组,但对比差异无统计学意义(P 0. 05)。结论两种方案在胃癌术后辅助化疗中临床疗效相近,不良反应均可耐受,临床上可根据患者的年龄、体力状况及其他因素个体化选择化疗方案。     

COX-2抑制剂对PC-3细胞的放射增敏作用研究

目的应用选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS-398作用于胰腺癌细胞株PC-3,观察其放射增敏作用,并对其可能增敏机制进行初步探讨。方法体外培养胰腺癌细胞株PC-3;以流式细胞术(FCM)单抗标记技术检测PC-3细胞的COX-2表达水平;以MTT实验检测细胞增殖抑制情况及NS-398对细胞放射敏感性的影响;以FCM分析细胞周期变化,以RT-PCR分析细胞周期相关蛋白P21表达变化。结果 FCM显示PC-3细胞存在COX-2的异常高表达;MTT实验显示NS-398可显著增强PC-3细胞的放射敏感性;FCM显示NS-398联合放射组G0-G1期比率上调;RT-PCR显示NS-398联合放射组细胞内P21mRNA表达上调。结论选择性COX-2抑制剂NS-398可增强胰腺癌细胞PC-3的放射敏感性,其机制可能与上调P21mRNA表达,进而诱导细胞周期阻滞于G0-G1期相关。     

绝经后骨质疏松患者雌激素及相关细胞因子表达分析

目的调查绝经后女性骨质疏松患者外周血雌激素及相关细胞因子表达情况。方法选择2019年春季参加中一东北国际医院健康体检的老年绝经后女性217例,入选对象按有无骨质疏松症(OP)分为老年绝经后骨质疏松症组(105例)和对照组(无骨质疏松症者,112例),入组者均接受外周血相关细胞因子指标检测,包括雌二醇(E_2)、骨碱性磷酸酶(BAP)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-6(IL-6)。结果老年绝经后骨质疏松症组外周血BAP、TNFα、IL-1和IL-6浓度均明显高于对照组,而E_2浓度低于对照组(P0.01,P0.05)。结论老年绝经后骨质疏松症存在着明确的外周血雌激素及相关细胞因子表达异常。