甘蓝多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白BoPGIP基因的克隆及序列分析

PGIP是一种特异性结合和抑制真菌内切PG活性的细胞壁结合蛋白,在植物分子抗病育种中占有十分重要的地位.甘蓝PGIP基因的克隆和序列分析,将为进一步通过转基因技术培育抗病甘蓝新品种奠定基础.本研究通过同源序列克隆法,根据GenBank已登录的青花菜BoPGIP1(Accession:JF325875)基因全长序列设计基因特异性引物,利用PCR扩增技术从甘蓝中克隆基因,利用生物信息学的方法对其编码蛋白的结构和功能进行了预测.将获得的PGIP基因命名为BoPGIP.该基因DNA全长为1065bp,包含1个内含子和2个外显子.外显子全长975 bp,编码342个氨基酸,分子量为36.2 kD,等电点是6.26.该基因属于PGIP基因家族,具有典型的LRR结构域;功能位点分析显示编码蛋白序列中包括4个N-糖基化位点(65～68,106～109,130～133,254～257),1个蛋白激酶C磷酸化位点(189～191),5个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点(73～76,78～81,151～154,182～185,304～307)和4个N-豆蔻酰化位点(157～162,188～193,236～241,273～278);N末端具有一明显跨膜区域和一个典型信号肽序列;二级结构中包含31.79％helix,13.89sheet和54.32％loop,二级结构以无规则卷曲为主.通过对所克隆的甘蓝BoPGIP基因分析可知,该基因属于PGIP基因家族的新成员,基因的克隆及序列分析为进一步验证甘蓝BoPGIP的功能奠定了基础.     

半夏属植物凝集素基因片段克隆与序列分析

半夏属植物凝集素同其他天南星科植物凝集素一样,有3个甘露糖专一结合位点,且具显著的抗虫性.本研究根据已知掌叶半夏凝集素基因表达序列的相关信息设计引物,采用RT-PCR方法,分别从滴水珠、石蜘蛛、盾叶半夏、掌叶半夏、三叶半夏中克隆出长约530bp的凝集素基因片段.使用Genesean软件、ORF finder软件、Ex2PASy Proteomics Server软件对5个凝集素基因片段进行分析,结果表明:克隆出的滴水珠、石蜘蛛、盾叶半夏、掌叶半夏、三叶半夏凝集素基因片段分别编码107、171、170、170、170个氨基酸,在它们所编码的肽链中,都具有酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、蛋白激酶C磷酸化位点和N-糖基化位点三类不同的功能位点.但由于编码序列碱基的突变,引起肽链中的氨基酸发生变化,从而导致这五种植株的凝集素基因存在较高的多态性以及存在功能位点的差异.其凝集素基因多态性及功能位点的差异对凝集素功能的影响需进一步分析.本实验为克隆五种植物凝集素基因的表达序列与结构基因以及深入研究半夏属凝集素的功能提供了有意义的参考资料.     

小相岭山系大熊猫种群生存力分析

小相岭山系现存大熊猫约34只,数量稀少,且受到人为活动干扰强度较大,基因交流困难,整个种群处于濒危境地.本文运用VORTEX模型对该山系未来100 a内大熊猫种群动态进行了模拟.结果表明:尽管从年龄结构上看小相岭山系大熊猫属于稳定型种群,但在考虑竹子开花和森林火灾的情况下,其近亲繁殖系数将在90 a后达到1.0,该种群将于80 a后灭绝.因此,对该地大熊猫采取更为有效的保护措施已经迫在眉睫.     

雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶cDNA的克隆与序列分析

参照Kajiwara等人获得的β-胡萝卜素酮化酶cDNA序列设计引物,利用RT-PCR技术扩增雨生红球藻的β-胡萝卜素酮化酶cDNA的完整编码片段并进行了序列测定与分析.结果表明,所获得cDNA序列与Kaji-wara等人报道序列具有96.4%的相似性,蛋白序列具有98.3%的相似性,说明所获得的cDNA序列确为β-胡萝卜素酮化酶的cDNA序列.     

油茶查尔酮合酶和异构酶基因的cDNA克隆

查尔酮合酶和查尔酮异构酶是类黄酮代谢与色素苷代谢的关键酶.以油茶近成熟种子cDNA文库和EST文库为材料,通过分子克隆方法鉴定了1条查尔酮合酶基因全长cDNA和1条查尔酮异构酶全长cDNA.结果表明:油茶查尔酮合酶基因的cDNA含1479 bp,编码412个氨基酸,为目前最长的查尔酮合酶,与其它物种的查尔酮合酶具有极高的相似性,在进化上高度同源;油茶查尔酮异构酶基因的cDNA含899 bp,编码206个氨基酸,与茶的查尔酮异构酶基因高度同源,但与其它物种的相似性较低.     

从种群生存力分析看大相岭大熊猫未来

大相岭大熊猫现仅有荥河与瓦屋山两个种群,彼此隔离,数量稀少,处于极度濒危境地.本文运用VORTEX模型对大相岭大熊猫未来动态进行了探讨,结果表明在没有近亲繁殖、灾害等的影响下,种群决定性增长率r＞0,显示种群有增长的潜在趋势.但由于统计随机性及环境波动等影响,大相岭大熊猫种群平均统计增长率r＜0,种群将逐渐走向灭绝.荥河种群和瓦屋山种群的平均绝灭时间分别为48 a和33 a.竹子开花、近亲繁殖等均对种群有明显影响.为保护该地大熊猫,采取有效保护措施刻不容缓.     

Orlicz-Lorentz模序列空间(Ⅰ)

我们在文[1]中建立了 Orlicz—Lorentz 序列空间并得到了一系列结果.本文用 Orlicz函数列{M■(x)}■=1,代替 Orlicz 函数 M(x),给出了更广泛的一类 Orlicz—Lorentz 模序列空间,并证明了这类空间具有有界完备对称基.     

关于第二类级联构造Bent序列的讨论(英文)

考虑用 4个长为 2 n - 2 的Bent序列或线性序列级联构造Bent序列的问题 ,给出了第二类线性基Bent序列的类型以及级联序列为第二类Bent基Bent序列的一个充分条件 .     

通用干扰素与胸腺肽融合基因构建与表达研究

临床上将干扰素(IFN)和胸腺肽(THYα1)联合使用远大于各自单独使用的效果,根据细胞因子协同作用的特点,本文通过DNA重组技术将两者构成一个融合基因。本实验用PCR技术将化学合成的胸腺肽α1基因与干扰素基因通过PCR拼接、扩增并克隆到PGEM-T载体中,构建克隆质粒PGEM-IFNTHY。为使IFNTHY基因在原核细胞中表达,克隆质粒经酶切、插入到表达载体pET28 a中。将重组质粒转化至表达宿主BL21(DE3)中,经诱导,SDS-PAGE和W esterb lot检测显示,pET28 IFNTHY基因得到了表达;微量细胞病变抑制法和玫瑰花结法显示表达产物有活性。     

中国大熊猫保护体系的建立

中国政府对保护大熊猫高度重视，经过半个多世纪的努力，建成了以分级、属地管理 ，多部门协同配合，社会广泛参与的综合保护体系。但在我国社会经济快速发展和体制转型 与改革过程中，大熊猫保护也面临着诸多新的挑战，需要对现有体系进行进一步优化与调整 ，完善政策，加强协调宣教功能，提高管理效能，扩大社会参与。     

哈萨克族节气的牧业特点及比较研究

自8世纪以来,哈萨克族二十四节气一直保存于民间。直到1994年才得以从民间搜集、整理、问世。本文以多文种资料的互为补证为基础,首次梳理了哈萨克族二十四节气的国内外研究现状、牧业特点,并将它与汉族节气进行了天文、民俗等方面的对比研究。     

贡嘎山湾坝乡大熊猫的数量调查及方法比较

利用路线法于2003年5月对贡嘎山保护区所属湾坝乡盐水塘进行调查,与以往不同,作者应用了7种处理方法,筛选了具有不同结果的2种方法即最远距离法和Ward's法对粪便咬节值进行聚类分析,并结合实际情况来进行判断.结果表明,在不足20km2的研究面积上,共生活着3只大熊猫,2只在沟谷的最里边,1只在另一个沟口.     

电影《功夫熊猫》两个中文配音译本之解读

梦工厂推出的《功夫熊猫》是内地首部票房收入过亿的动画电影,该片获得了美国动画片的＂奥斯卡＂……＂安妮奖＂,2009年在中国获得了外国动画长片金奖——＂美猴奖＂。该片在上映时就采用了两个中文配音译本,这在电影的配音中是少有的。本文以德国功能理论中的＂目的论＂为框架,来探讨这两个译本,以阐释该理论对影视翻译的解释力。     

从连锁餐饮巨头比邻而居看聚合经营

应用纳什均衡理论,并通过创建假设模型,分析两大连锁餐饮巨头麦当劳与肯德基比邻而居的现象,可揭示出连锁超市、连锁企业等聚合选址、聚合经营的原理：聚合选址、聚合经营同类型或者相近产品可以在有效地刺激消费者需求,加速商品流通与周转速度的同时,极大降低商家的经营风险与成本。同时,企业若想在聚合经营中求得生存和发展,还须努力打造出自身特色,塑造拥有竞争力的完美个性。