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采用PCR技术扩增mRuby2,将其插入原核表达载体p ET30a(+)中,用p ET30a(+)-mRuby2转化BL21(DE3)并诱导重组蛋白表达,用荧光显微镜及SDS-PAGE观察、检测目标蛋白的表达情况,以Ni亲和层析技术纯化重组蛋白。结果表明:构建的重组表达菌株经IPTG诱导后,发酵液颜色随诱导时间延长逐渐转为橙红,离心后的沉淀菌体为深粉红色,在荧光显微镜下,菌体发出明亮的红色荧光。SDS-PAGE检测发现,IPTG诱导5 h,重组蛋白表达量达到峰值。采用Ni螯合亲和层析技术从发酵菌体中分离出纯度大于80%的重组蛋白。由此可见:采用DNA重组技术能在原核系统中成功表达mRuby2编码的荧光蛋白,该重组蛋白亮度高、可视性好,能直观呈现实验结果,便于观察相关实验现象、理解并掌握实验原理,非常适合于生化、分子生物学实验教学。 相似文献
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为了解创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder, PTSD)在大学生中的流行病学特征及影响因素,以重庆市某大学学生为研究对象,采取随机抽样法,利用自拟问卷和创伤后应激障碍症状自评量表平民版(PTSD check-list-civilian version, PCL-C)对大学生PTSD的流行病学进行调查,并利用卡方检验及多因素非条件Logistic回归分析相关影响因素。研究结果表明:在调查的387名大学生中,PTSD阳性症状者64名,占16.54%;不同性别的大学生PCL-C得分女性高于男性,两者差异显著(P<0.05),而不同年龄段间的PCL-C得分无显著差异(P>0.05);暴露于创伤性事件的时间越长PCL-C得分越高,越易患PTSD(P<0.05),而是否经历创伤及在创伤事件中的角色不影响PTSD的患病率(P>0.05);父母去世者可能更易患PTSD(P<0.05)。因此,本调查范围的大学生中PTSD的发生率为16.54%,且性别、创伤事件暴露时间及父母是否健在可能为PTSD的主要影响因素。可见,重庆大学生PTSD状... 相似文献
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成对免疫球蛋白样受体B(paired immunoglobulin-like receptor B,PirB)作为中枢微环境中的髓鞘相关抑制因子及主要组织相容性复合体I的共同受体,在中枢神经系统损伤后可抑制轴突再生,且对突触可塑性具有明显的调节作用。在正常情况下,PirB参与的抑制信号有助于平衡学习和记忆等基本大脑功能所需的稳态,而在损伤状态下这种抑制效应则会影响突触可塑性,导致神经元回路的永久性损伤。综述了PirB的生物学功能并在此基础上深入探讨了PirB介导突触可塑性调控学习记忆的作用机制,为认知及精神障碍类疾病的预防与治疗提供了理论依据。 相似文献
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