培养基成份对大麦花粉植株高频率再生的影响

在一种基本培养基 FHG 上研究了培养基的多种成份对大麦花粉植株再生频率的影响。诱导培养基中不同的激素配比对愈伤组织诱导数影响很大,在145诱导培养基上,得到一个花药产生16.70块愈伤组织和5.5棵绿苗,分别是对照的2.4倍和3.8倍。在不同的分化培养基上,绿苗分化率以R63培养基为好;培养基中补加 MET 后,能明显的提高绿苗分化率及绿苗产量,最适宜的浓度为0.6mg/L,分别是对照的4.1倍和4.4倍。MET 对大麦花粉植株诱导生根及壮苗也有明显的作用。不同的氨基酸种类对绿苗分化率及绿苗产量作用不同,这种作用具有基因型效应。对 Igri 以730mg/L 的谷氨酰胺绿苗产量最高;谷氨酸次之。     

基因型和培养方式对大麦花粉植株高频率再生的影响

在基本培养基 FHG 上研究了基因型、培养方式、Ficoll 400及分化培养温度对大麦花粉植株再生频率的影响。结果,不同的基因型其花粉植株诱导频率不同。15个供试材料平均绿苗产量为每个花药产生1.46株,最低的是温Ⅰ,最高的是 Igri 的～个花培后代 B631,分别为0.16和3.96株。平均愈伤组织诱导数为6.308块,绿苗分化率为23.24%,固体培养与液体培养比较,绿苗产量分别为每个花药2.3l和4.15株。在液体培养基中补加 Ficoll 400(100g/l),虽使愈伤组织诱导数和绿苗产量有所减少,但绿苗分化率及 G/A 值却有明显提高。分化培养时不同的培养温度其绿苗分化率也不同,20℃、15℃,10℃及25℃分别为38.27%、33.33%、26.67%和0%。     

大麦花药培养中甘露醇预处理作用的研究

在基本培养基 FHG 上系统研究了甘露醇预处理对大麦花药培养的影响。结果,甘露醇预处理能明显提高花粉粒存活率和质量,有利于进一步分裂形成胚状体和愈伤组织;并且,各发育时期明显比对照提早2～5天。不同浓度甘露醇预处理3天可以显著提高绿苗产量,最高的为0.5M,达到17.13株绿苗,但不同浓度之间差异较小。同一浓度甘露醇预处理不同天数的效应十分明显,出愈数和绿苗产量均以3天为最高,分别为43.42块和16.86株,其中,绿苗产量是对照的64.8倍。绿苗分化率以5天为最高,达到55.00%。甘露醇预处理与低温预处理比较,以前者各参数略高,并且采用甘露醇预处理可以缩短30～45天的实验周期。另外,在0.1M 甘露醇预处理3天的处理中一个培养皿60枚花药,绿苗产量达到每个花药产生27.95株的最高值。