肽-HLA-A2融合蛋白用于四聚体(Tetramer)的改造

目的对蛋白四聚体(Tetramer)进行改造,简化其制备过程,提高制备效率,节约成本.方法利用基因工程技术,将肽-HLA-A2和BirA酶的底物肽(BSP)形成一个融合蛋白,该融合蛋白在原核中以包涵体的形式被表达,对表达的包涵体蛋白进行稀释复性、酶切和纯化后,再在BirA酶的作用下对其生物素化,最后将其连接到荧光素标记的亲和素上,即形成了改造的Tetramer.结果获得了可溶性的蛋白四聚体.结论该方法制备过程简单,蛋白复兴效率高,成本低,值得继续深入研究.     

粪肥纤维单胞菌木质素 11A基因野生型与点突变子底物结合特性研究(英文)

本文报道 ,应用点突变技术获得的粪肥纤维单胞菌 (Cellulomonasfimi)木质素酶 11A(Xyn11A)基因的3个点突变子 ,即R2 62G ,R573G和R2 62G R573G ,表达产物结合底物特性的测定结果。试验表明 ,R2 62G R573GXyn11A与野生型Xyn11A基因表达产物结合底物的特性明显不同 ,表现为前者不与木质素结合而与纤维素结合 ,后者与纤维素和木质素均结合 ,但与木质素结合能力更强 ,与野生型Xyn11A一样 ,R2 62GXYN11A和R573GXyn11A也能与纤维素和木质素两者结合 ,但与纤维素的结合力更强 ,而与木质素结合力弱。用纤维素作为底物测定Xyn11A和R2 62G ,R573G和R2 62G R573GXyn11A的Kr值分别为 0 .6,1.1,1.1和 1.9L g。