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以大白菜 341 1 - 7自交系为材料 ,使用 PE公司生产的 Thermal Cycler480型 PCR仪 ,对影响大白菜 RAPD扩增的因素进行了研究 ,确定了模板 ,Mg2 +,d NTPs,引物和 Taq DNA聚合酶的适宜浓度和最佳的循环次数 .实验结果表明 ,在 2 5μL反应体系中使用 2 0— 60 ng的模板 DNA,1 .5— 2 .0 mmol/L 的 Mg2 +,0 .1 5— 0 .2 5 mmol/L d NTPs,0 .8— 1 .0 μmol/L随机引物 ,1 .0— 1 .5 U Taq DNA聚合酶 ;在 94℃下预变性 5 min后执行 94℃ 1 min,37℃ 1min,72℃ 2 min,35个循环 ,最后 72℃再延伸 5 min的条件下 ,大白菜的 RAPD扩增效果较好 相似文献
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