| ARF基因导入烟草的遗传转化研究 |
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| 引用本文： | 徐刚标,卢孟柱,陆燕.ARF基因导入烟草的遗传转化研究[J].中南林业科技大学学报(社会科学版),2007(5). |
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| 作者姓名： | 徐刚标 卢孟柱 陆燕 |
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| 作者单位： | 中南林业科技大学 中国林业科学研究院林业研究所 中南林业科技大学 湖南长沙 湖南长沙 |
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| 摘 要： | 以烟草无菌苗叶片为外植体,利用叶盘法,将含生长素应答基因(auxin response factor,ARF)的根癌农杆菌LBA4404携带双元质粒载体(pBin438)介导进行遗传转化.结果表明:诱导烟草叶片不定芽的最佳分化培养基为MS+0.8 mg.L-16-BA+0.05mg.L-1NAA,生根培养基为1/2MS+0.02 mg.L-1IBA+0.02 mg.L-1NAA,分化率、生根率分别为96.9%、96.7%;将预培养3 d的外植体与农杆菌菌液浸染3~5 min后,共培养2~3 d,然后转化到含Km75 mg.L-1的选择培养基上进行分化筛选,再转入Km为75 mg.L-1、100 mg.L-1的培养基上进行生根筛选,生根率为66.1%;与对照相比,转基因烟草在形态上发生了明显的改变,叶片颜色变深绿,叶片增厚,主叶脉变粗壮等.PCR扩增,获得40株阳性转基因苗,证明ARF基因已导入烟草中.
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| 关 键 词： | 生物技术 ARF基因 烟草 根癌农杆菌 遗传转化 |
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