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| 一株PEDV广东流行株S1基因遗传进化分析及其在昆虫细胞中的表达纯化 | |
| 作者姓名： | 刘郁夫 林晓慧 谭银娟 冯美莹 |
| 作者单位： | 1. 肇庆学院生命科学学院;2. 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 |
| 摘 要： | 为了解猪流行性腹泻病毒广东流行株的S1基因流行变异情况，制备相应的诊断试剂，试验采用RT-PCR从猪流行性腹泻疑似发病仔猪的肠道内容物中扩增获得S1基因，利用生物信息学软件构建S1基因的遗传进化树.将S1基因克隆至杆状病毒穿梭质粒pFastBac1，转化至DH10Bac感受态细胞中，经抗生素筛选重组杆粒，把重组杆粒转染到昆虫细胞Sf9，盲传3代后进行间接免疫荧光试验和Western blot鉴定.结果表明：该猪流行性腹泻病毒广东流行株分布于GII-b分支，与国内猪流行性腹泻病毒分离株（HN-HB1-2018、HBHA2015）的核苷酸相似性为98.0%～98.3%，而与猪流行性腹泻病毒经典毒株CV777、DR13的核苷酸相似性仅为89.9%～90.0%.且S1重组蛋白可在昆虫细胞Sf9中以细胞培养分泌上清的形式表达.本研究可为猪流行性腹泻病毒的流行现状研究提供参考，以及后续猪流行性腹泻病毒诊断制品的研发提供前期基础. |
| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 S1基因 遗传进化 昆虫细胞 |