口服型重组草鱼生长激素基因的创建及其原核表达最佳条件研究

生长激素是脊椎动物分泌的一种多肽激素,具有调节鱼类生长发育和代谢等作用.本研究通过将反式转录激活因子(TAT,Trans-activating transcriptional activator)、草鱼生长激素(GH,growth hormone)和细胞穿透环肽(CP,cyclic peptides)等三个基因片段,柔性拼接成一种新型口服型渔用生长激素基因(TGC)并构建其原核表达载体,再将其转化至表达菌株Escherichia coli BL21 (DE3)中,获得基因工程菌(TGC-DE3),并对该基因工程菌原核表达条件进行优化.结果表明,柔性拼接后得到的TGC基因片段完整并正向整合到表达载体,TGC-DE3基因工程菌能诱导表达得到分子质量约34.0 kDa的目的蛋白.当IPTG浓度为0.05 mmol/L,诱导温度为37℃,诱导转速为100 rpm,诱导表达到最佳时间1.5 h时,目的蛋白表达量最高.本研究为渔用生长激素的使用从注射走向口服提供了可能,也为口服型草鱼生长激素蛋白的规模化原核表达生产提供了技术支持.