| 兜兰二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因的克隆及其表达特性 |
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| 引用本文： | 李冬梅,操君喜,朱根发,吕复兵,孙映波,王真.兜兰二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因的克隆及其表达特性[J].内蒙古农业大学学报(社会科学版),2012,28(5). |
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| 作者姓名： | 李冬梅 操君喜 朱根发 吕复兵 孙映波 王真 |
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| 作者单位： | 广东省园林花卉种质创新与利用重点实验室/广东省农业科学院花卉研究所,广州,510640 |
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| 基金项目： | 广州市科技计划项目，广东省农业科学院院长基金 |
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| 摘 要： | 克隆同色兜兰二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因DFR,分析其序列特征,了解其在不同组织部位的表达情况.采用RT-PCR和RACE技术从花中克隆DFR的全长cDNA,用生物信息学方法分析序列特征,并用半定量RT-PCR研究其在不同组织的表达.分离到DFR,该cDNA全长1267bp,具有1个1074 bp的完整开放阅读框,编码357个氨基酸.序列分析表明,该DFR蛋白含有1个NADB_Rossmann superfamily保守结构域,1个NADP(H)结合域和1个底物特异性结合域,其与文心兰、石斛兰和大花蕙兰等的DFR同源性在75％～80％.系统进化树显示,该DFR蛋白与兰科植物的DFR蛋白亲缘关系比较近.半定量RT-PCR表明,该DFR在成熟花和营养叶中的表达量最高,在子房、苞叶、萼片和花瓣中的表达量相当,在唇瓣中的表达量次之,在蕊柱中的表达量较唇瓣中的低,在花茎中的表达量最低,在根中几乎检测不到.原核表达结果表明,该DFR在大肠杆菌中获得表达.从兜兰中克隆到花色代谢途径中的关键酶基因DFR,该基因可能参与调控花色素的合成.
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| 关 键 词： | 兜兰 二氢黄烷酮醇-4-还原酶基因 RT-PCR 基因克隆 表达分析 |
Molecular Cloning and Expression Analysis of a Dihydroflavonol 4-reductase Gene from Paphiopedilum |
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| Li Dongmei
,
Cao Junxi
,
Zhu Genfa
,
Lv Fubing
,
Sun Yingbo
,
Wang Zhen.Molecular Cloning and Expression Analysis of a Dihydroflavonol 4-reductase Gene from Paphiopedilum[J].Journal of Inner Mongolia Agricultural University(Social Science Edition),2012,28(5). |
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| Authors: | Li Dongmei Cao Junxi Zhu Genfa Lv Fubing Sun Yingbo Wang Zhen |
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