SSAO酶抑制剂对脂肪细胞内GLUT4转运作用的研究

SSAO酶在脂肪细胞中的含量较多,位于细胞膜上的SSAO酶的活性和其蛋白质的免疫反应性都是最大的。对于体内葡萄糖的运输和葡萄糖转运蛋白的转运,此酶起到了一定的促进作用,当它与底物在膜上反应后会引起信号传导刺激细胞内葡萄糖转运蛋白(GLUT4)从内部囊泡转移到细胞表面程,从而促进葡萄糖的运输和细胞对葡萄糖的吸收。如果有SSAO酶抑制剂存在,如氨基脲,二溴乙胺等,这种对GLUT4转运的促进作用就会被削弱。本研究的目的在于建立一种新的定量方法—竞争ELISA法来测试脂肪细胞膜上GLUT4的含量,从而确定SSAO酶抑制剂对GLUT4转运的作用。实验结果说明当SSAO醇抑制剂和脂肪细胞预温育一段时间后,质膜上GLUT4的含量发生下降,钒盐使得这种下降的程度加大,证明GLUT4由细胞内囊泡向细胞质膜转运的易位过程受到了抑制。此种竞争性ELISA的测试方法优点在于只需要少量的细胞膜样品就可以确定GLUT4的含量,灵敏度较高。     

压力驱动的毛细管等电聚焦分离牛血清白蛋白和血红蛋白

蛋白质的聚焦过程完成后,实现了压力驱动毛细管内完成聚焦的聚焦区带迁移,进行聚焦区带的检测。实验证明,在较低流速下不会破环聚焦区带,得到了理想的分离结果,方法可行,且操作简单。     

SSAO酶活性的测定方法研究

SSAO(semicarbazide-Sensitive Amine Oxidase 1、4、3、6)是时氨基脲敏感的一系列酶的统称,它在人体内广泛分布但生理功能尚不清楚。一些研究显示该酶可能与糖尿病并发症、心脏病以及一些神经系统疾病等有着一定的联系。SSAO的内源性底物包括甲胺和氨基丙酮等,它们通过酶催化氧化脱氨产生相应的醛、过氧化氢和氨。甲醛、丙酮醛和过氧化氢都是细胞毒性的物质。本研究我们用ABTs作为衍生过氧化氢的试剂,建立了一种操作简便、安全并且具有相当灵敏度的一种测定方法。实验结果显示该方法具有足够的灵敏度,能够满足SSAO酶活性测定的需要。该方法的建立为糖尿病和心脑血管疾病等疾病的病因学研究以及临床样品分析提供了一种适用的方法。     

多巴胺对SH-SY5Y神经元的细胞毒性及相关神经保护研究

帕金森病是一种普遍的神经退行性疾病,其病理特征是人脑黑质区多巴胺(DA)能神经元的进行性变性、死亡。帕金森病的病因和发病机制虽然至今未明,但氧化应激是主要因素。DA作为脑内主要神经递质,也是一种神经毒素。我们的研究中采用DA作为氧化应激诱导剂,观察了6种神经保护剂的作用效果。MTT分析其存活率、荧光双染色法观察其形态变化以及流式细胞仪分析凋亡和细胞周期变化,结果显示DA诱导后细胞存活率随浓度、时间进行式降低,而6种保护剂分别有不同程度的保护效果。     

基于重复博弈的集群企业合作关系研究

集群企业间重复交易形成的合作关系,可分解为可观测的经济交易合作和不可观测的基于信任和社会关系的合作,分别利用显性契约和关系契约进行描述,并基于重复博弈讨论了集群企业间合作关系的影响因素.研究表明,集群企业的合作关系受到企业集群中核心企业对双方关系的评价以及小企业的市场价格等因素的影响;核心企业可以依据小企业的市场价格来缔结双方的合作关系,以获取最大收益;而小企业提高自身的价值可改善双方的合作关系.     

发酵液中木糖酸的测定

本研究建立了发酵液中木糖酸的分析方法。分别采用反相高效液相色谱法和比色法对发酵液中的木糖酸进行分析。结果通过考察回收率和精密度等指标证明了高效液相色谱法对发酵液中木糖酸的分析优于比色法。高效液相色谱法对复杂的生物体系中的木糖酸含量测定具有快速,简便、灵敏、重现性好的特点,为木糖酸的生产、应用等研究打下了良好的基础。     

基于工作设计的薪酬激励机制研究

基于工作的内在激励效用,利用委托代理框架,讨论了工作设计对薪酬激励机制的作用规律,并对知识工作复杂性设计的情形进行了分析.研究表明,在一定条件下,工作设计能够有效地利用工作的内在激励作用,提高员工的努力水平,优化薪酬激励机制;增加知识工作的复杂性对薪酬激励机制具有或正或负的影响,这取决于复杂性导致的边际风险与边际产出之间的相互作用;工作设计具有提高产出和降低转移支付的收益,同时也使员工承担更多努力和风险成本,收益等于成本时知识工作的复杂性设计处于最优水平.     

小鼠脂肪细胞糖尿病药物筛选模型的优化及应用

糖尿病已经成为世界范围内危害人类健康的主要疾病之一,对糖尿病的研究和治疗具有重要意义,本文首先建立并优化小鼠脂肪细胞糖尿病药物筛选模型,然后使用临床抗糖尿病药物对该模型进行考察,并对海糖平(H)和杉糖平(S)两种降糖新药进行了筛选。通过Western-blot法检测GLUT4(葡萄糖转运蛋白4)以确定药物的药效。结果表明,用临床抗糖尿病药物考察模型能客观反映该药物药效。在此模型上,对杉糖平和海糖平的各个馏分进行初步筛选,发现两种药物的一些有效成分。     

不同浓度的多巴胺对SH-SY5Y细胞中多巴胺转运体分布的影响

多巴胺是脑内一种天然的神经递质,对于体外培养的 SH-SY5Y 细胞,不同浓度的多巴胺会对其产生不同的影响。本文研究了一系列浓度梯度的多巴胺对 SH-SY5Y 细胞生长状态的影响,得出了其从对细胞生长促进作用转入毒性作用的拐点。并且对这些细胞中的多巴胺转运蛋白进行了染色,观察了它们在不同多巴胺浓度下,在细胞膜表面及细胞内部的分布规律。     

生物功能化色谱新概念及其方法学研究

生物体内大多数生物过程在某种意义上与色谱的作用机理类似, 因此我们提出一个色谱新概念,即利用仿生固定相和流动相模拟生物过程。目前色谱的应用主要局限在它的分离和定量功能。如果使固定相具有生物特性,即利用色谱模拟生物过程,将不仅进一步拓展色谱的应用空间,而且也可以解决大量的生命科学中的问题。生物功能化色谱尚未见报道,这个新技术不仅可以迅速、准确地测定生物特性,同时结合色谱的分离能力可以实现高通量测定。在本研究中我们发展了用于模拟多巴胺代谢的生物功能化色谱。根据影响多巴胺在体内代谢过程的相关酶以及它们的作用机理,通过构筑具有生物活性的色谱固定相和流动相把生物分子之间的作用过程用色谱模拟出来。这个具有生物功能的色谱已经尝试性地用于帕金森病的药物筛选。