荧光假单胞菌BIT-18磷脂酶B基因的克隆及生物信息学分析

利用PCR从Pseudomonas fluorescens BIT-18总DNA中成功扩增到编码Pf-PLB的全长基因,并进行测序.通过生物信息学分析,可知Pf-PLB基因全长1272 bp,编码423个氨基酸,理论分子量为45.8kDa,等电点为5.53,在N末端有一个包含23个氨基酸的信号肽.进化树及序列分析结果显示,pfplb是PLBs新基因家族的成员.采用模建软件Modeller进行人工建模,结果表明Pf-PLB为由14股Strand组成的β-桶状蛋白,本研究为Pf-PLB进一步高效表达及其脱胶机理研究奠定基础.     

雏鹅绿脓杆菌病病原的分离及鉴定

通过对重庆某地养鹅场病死雏鹅细菌分离、形态观察、培养特性、生化试验及本动物接种试验,鉴定为雏鹅绿脓杆菌病,在国内尚属首次报道。药敏试验证实了对妥布霉素、丁胺卡那、链霉素高度敏感,为临床防制提供了可靠依据。     

天津地区老年患者院内感染耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药性探究

目的探究造成老年患者院内感染铜绿假单胞菌亚胺培南耐药的OprD2基因缺失在天津地区三所三甲医院内的分布情况。方法采用PCR方法检测60株来自天津市三所医院不同科室60岁以上患者感染的耐亚胺培南铜绿假单胞菌（IRPA）的OprD2基因缺失情况。结果60株IRPA中有38株OprD2基因缺失,且三所医院的OprD2基因缺失率无显著性差异（P〉0.05）。结论IRPA的OprD2基因缺失在天津地区的分布没有明显的医院差异,且提示尚有其他原因造成亚胺培南耐药株流行发作。     

响应面法优化固定化荧光假单胞菌磷脂酶B的研究

以脱胶油磷含量为响应值,采用响应面法和Central-Composite设计对制备固定化荧光假单胞菌磷脂酶B(PfPLB)主要工艺参数(海藻酸钠浓度、壳聚糖浓度和加酶量)进行了优化,并且采用回归分析拟合了三个固定化因子与响应值(磷含量)的回归模型.该模型预测最佳的固定化Pf-PLB条件为:海藻酸钠3%,壳聚糖1.14%,加酶量1000 U/kg.研究固定化Pf-PLB的酶学性质,结果表明其最适反应温度为40℃,比游离酶提高15℃;最适反应pH为5.5,比游离酶降低1个pH单位.固定化Pf-PLB具有较好的酶活稳定性,连续反应6次,其相对活性为初始值的51.6%,显示出良好的应用前景.